厚樸的化學(xué)成分及藥理作用研究進展

張曉娟，左冬冬，胡妮娜，王艷麗

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040； 2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江哈爾濱 150040； 3.黑龍江護理高等?？茖W(xué)校，黑龍江 哈爾濱 150000）

厚樸為木蘭科木蘭屬植物厚樸（Magnolia officinalisrehd.et wils.）或凹葉厚樸（Magnolia offinalisrehd.et wils.var.biloba rehd.et wils.）的干燥干皮、根皮及枝皮，主產(chǎn)于湖北、四川、廣東、浙江、陜西、廣西、甘肅、河南、貴州等地區(qū)，多為繁殖栽培［1］。性味辛、苦、溫，歸脾、胃、肺、大腸經(jīng)，具有燥濕消痰、下氣除滿的功效。臨床主治濕滯傷中、脘痞吐瀉、食積氣滯、腹脹便秘、痰飲喘咳等。研究發(fā)現(xiàn)，臨床應(yīng)用厚樸以配伍為主，多在陽明經(jīng)證，對于虛實、類疾病通過配伍均可達到治療效果，小劑量配伍麻黃、杏仁、生姜、桂枝等可治療呼吸系統(tǒng)疾病，大劑量配伍半夏、人參、生姜、枳實等可治療消化系統(tǒng)疾病［2］。

《本草正》言厚樸“溫降，散滯，除寒濕瀉痢”；《開寶本草》云：“療霍亂及腹痛，脹滿，胃中冷逆”，強調(diào)了厚樸行氣除脹的功效；《本草經(jīng)疏》道：“胃冷嘔逆，腹痛泄瀉……娠婦腹痛瀉利”；《本草匯言》中載厚樸“傷寒頭痛寒熱，嘔逆瀉利，蟲積痞積”。現(xiàn)代研究證實，厚樸的化學(xué)成分主要包括為酚類、木脂素類、揮發(fā)油類、生物堿類等。其中酚類成分中的厚樸酚與和厚樸酚的含量占總化學(xué)成分的5%～12%，是中藥厚樸的重要質(zhì)量指標(biāo)，另外還包括四氫厚樸酚、異厚樸酚、龍腦基厚樸酚等其他活性成分。大量文獻證明厚樸具有抗菌、抗氧化、抗炎癥、抗抑郁、抗腫瘤以及保護肝臟等作用［3］，同時還可以促進腸胃蠕動的功能，對食積氣滯、腹脹便秘、消化不良、腹瀉均有顯著的治療效果［4］。本文主要綜述近幾年厚樸的化學(xué)成分以及藥理作用的研究進展，為下一步研究和開發(fā)厚樸提供依據(jù)。

1 化學(xué)成分

1.1 酚類成分

厚樸中酚類成分主要含有厚樸酚以及和厚樸酚，是疏水性的烯丙基聯(lián)苯酚類結(jié)構(gòu)的同分異構(gòu)體，在厚樸中含量占比最高，為厚樸的主要活性物質(zhì)［5］，化學(xué)結(jié)構(gòu)式見圖1。另外酚類中還含有四氫厚樸酚、異厚樸酚、龍腦基厚樸酚、辣薄荷基厚樸酚、辣薄荷基和厚樸酚、厚樸木脂素A～I、厚樸三醇、厚樸醛B～E、9'－二羥基和厚樸酚等成分［6］。

圖1 厚樸酚、和厚樸酚的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

1.2 生物堿類成分

生物堿是一種含氮的堿性有機化合物，常以結(jié)構(gòu)復(fù)雜的環(huán)為基礎(chǔ)，含有豐富的生物活性。厚樸中生物堿含量相對較低，約占0.07%，主要包括木蘭花堿和木蘭箭毒堿、厚樸堿、氧化黃心樹寧堿、海罌粟堿、觀音蓮明堿、阿西米洛賓、塔斯品堿等［7］，厚樸堿在生物堿類成分中含量最高，且具有一定的藥用價值。董佳悅等［8］采用非水滴定法分別測定四川產(chǎn)厚樸中總生物堿的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地厚樸中所含的生物堿有明顯的差異，其中尤其以峨眉山市產(chǎn)厚樸中生物堿的含量最高。郭健［9］使用乙醇配合使用氯仿提取厚樸中的生物堿成分，然后經(jīng)過陽離子交換樹脂進行分化提純，最后得到總生物堿的含量為0.29%。

1.3 揮發(fā)油類成分

厚樸中大概含有0.3%～1%的揮發(fā)油成分，其中桉葉油醇及其異構(gòu)體的含量最高，約占40%～55%，其次是聚傘花素，約占揮發(fā)油總量的10%～20%［10］。何小珍等［11］使用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測湖南和四川產(chǎn)厚樸揮發(fā)油成分，共得到111種揮發(fā)油有效成分。其中，α－桉葉醇的含量分別為7.91%和13.34%，β－桉葉醇的含量分別為23.88%和15.75%，γ－桉葉醇的含量分別為10.60%和9.68%。蹇順華等［12］采用超臨界CO2萃取技術(shù)提取厚樸揮發(fā)油，通過氣相色譜－質(zhì)譜的方法分析揮發(fā)油的成分。結(jié)果，厚樸揮發(fā)油中共含有32種化合物，占全部揮發(fā)油的86.05%。曾紅等［13］使用水蒸氣蒸餾法提取厚樸中揮發(fā)油的成分，再使用氣相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用的方法對該成分進行檢測，結(jié)果從凹葉厚樸的揮發(fā)油成分中分析出75種成分。研究發(fā)現(xiàn)，厚樸生品、姜浸厚樸、姜煮厚樸和姜炙厚樸揮發(fā)油中含量最高的成分均為β－桉葉油醇，其次是α－桉葉油醇、γ－桉葉油醇、石竹烯氧化物、茅蒼術(shù)醇等。姜制前后厚樸中揮發(fā)油成分和含量都發(fā)生了較大變化，姜浸厚樸多數(shù)主要成分的相對含量高于厚樸生品，而姜浸厚樸、姜煮厚樸和姜炙厚樸揮發(fā)油的多數(shù)主要成分的相對含量依次下降［14］。

1.4 多糖類成分

厚樸中的花、樹皮、莖以及葉中均含有多糖成分。姜寧等［15］通過Box－Behnken試驗優(yōu)化提取厚樸多糖，結(jié)果表明多糖提取率達3.35%～3.52%。龔榮崗等［16］采用微波輔助的方法提取厚樸葉中多糖的成分，并對厚樸多糖進行了測定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)厚樸葉中多糖的含量為13.99%。張芳芹等［17］將葡萄糖作為對照品然后使用苯酚－硫酸法進行顯色，并采用分光光度法檢測厚樸皮中多糖的含量，結(jié)果檢測出厚樸皮中多糖的含量為12.02 mg/g。

2 藥理作用

2.1 抗氧化

厚樸具有較強的抗氧化能力，特別是厚樸中的和厚樸酚，具有清除機體內(nèi)過多的自由基達到抗氧化的功能，使機體得以正常運行。張明發(fā)等［18］研究發(fā)現(xiàn)，厚樸酚與和厚樸酚具有抗炎、抗氧化以及抗衰老的功效，能通過對自由基的直接清除作用或者加強機體的抗氧化酶活性間接消滅自由基。戰(zhàn)英［19］制備厚樸乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、95%乙醇提取物以及總提取物，通過DPPH法與羥基自由基方法進行抗氧化活性的實驗研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同提取物之間清除自由基的能力各有不同，清除能力高低依次為厚樸正丁醇提取物、厚樸總提取物、厚樸的乙酸乙酯提取物、厚樸95%乙醇提取物，說明厚樸的正丁醇提取物的抗氧化活性最強。KHALID等［20］研究發(fā)現(xiàn)，厚樸酚能夠加強機體內(nèi)Nrf2、SOD2和HO－1水平的表達，通過抑制炎性介質(zhì)實現(xiàn)抗氧化的功效。楊巖等［21］使用HPLC法鑒別厚樸超臨界CO2提取物中化學(xué)成分的含量，再通過MTT法檢測抗氧化活性，結(jié)果表明厚樸超臨界CO2提取物具有明顯的抗氧化作用。田強等［22］研究厚樸葉7種不同溶劑提取物的抗氧化活性，并考察總酚含量與抗氧化活性的關(guān)系。結(jié)果表明，厚樸葉不同溶劑提取物具有良好的抗氧化活性，但抗氧化能力存在一定差異。其中正丁醇提取物的DPPH自由基清除率和ABTS自由基清除率最高，EC50值分別為40.67 μg/mL和26.67 μg/mL； 乙醇提取物的鐵離子還原能力最強，在濃度為 0.1 mg/mL時，其FRAP值為24.54%；含量測定顯示，乙醇提物中總酚含量最高，為174.14 mg/g；相關(guān)系數(shù)表明，總酚含量與抗氧化能力具有較好的相關(guān)性，提示乙醇可以作為厚樸葉抗氧化活性物質(zhì)提取的優(yōu)選溶劑。

2.2 保肝

厚樸中的有效活性物質(zhì)在保護肝臟方面上發(fā)揮出重要作用。劉長海等［23］研究和厚樸酚（HNK）治療四氯化碳（CCl4）導(dǎo)致小鼠肝臟受損的情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過HNK治療后的小鼠肝臟組織中TNF－α、IL－6和IFN－γ mRNA的表達明顯降低，說明HNK具有明顯的降低血糖以及保護肝臟的作用。陸少君等［24］檢測和厚樸酚對非酒精性脂肪肝大鼠的改善作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)和厚樸酚對大鼠脂肪肝病具有顯著的緩解作用，血脂、AUC及HOMA－IR水平明顯降低，能有效地改善非酒精性脂肪肝模型大鼠的血脂代謝紊亂、肝細胞受損及胰島素抵抗。研究發(fā)現(xiàn)，和厚樸酚通過抑制p38α，有效調(diào)控NF－κB通路，從而減輕ALD的炎癥反應(yīng)和脂質(zhì)代謝紊亂［25］。符健等［26］研究和厚樸酚對四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化及p38 MAPK/Nrf2信號通路的影響。結(jié)果，和厚樸酚能改善大鼠血清ALT、AST、ALP、GGT、HA、LN、PCⅢ、CⅣ、TNF－α、IL－6、IL－1β、肝組織MDA、p38MAPK、p－p38MAPK水平，肝組織SOD活性及Nrf2蛋白水平均顯著升高，肝組織病理學(xué)變化明顯改善。李琛等［27］探究和厚樸酚對D－氨基半乳糖/脂多糖誘導(dǎo)的急性肝損傷大鼠核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3（NLRP3）炎癥通路及肝細胞自噬的影響。結(jié)果，和厚樸酚能通過下調(diào)NLRP3炎癥通路從而減緩炎癥水平，同時促進肝細胞自噬實現(xiàn)對急性肝損傷的保護。

2.3 抗菌、抗炎

厚樸及其他有效成分均具有良好的抗炎、抗菌的作用，抗炎能力強、殺菌時間短，其機制與降低炎癥介質(zhì)的生成密切相關(guān)。張明發(fā)等［28］發(fā)現(xiàn)，厚樸提取物、厚樸酚及和厚樸酚可以通過阻止PI3K/Akt、ERK/MAPK和TLR/MAPK的信號通路，抑制炎性因子的表達，從而實現(xiàn)抗炎的作用。CHEN等［29］通過LC－MS、1H－和13C－NMR鑒定，發(fā)現(xiàn)厚樸酚對7種致病真菌均有效果，其抗真菌活性可能與細胞膜完整性破壞引起的菌絲扭曲密切相關(guān)。張明發(fā)等［30］對厚樸及其有效成分進行研究，通過加強真菌細胞內(nèi)活性氧的水平，破壞線粒體而導(dǎo)致真菌細胞凋亡和壞死，結(jié)果發(fā)現(xiàn)厚樸、厚樸酚與和厚樸酚具有廣譜的抗真菌作用。周詩雯等［31］研究發(fā)現(xiàn)，厚樸酚對脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小鼠乳腺炎模型體內(nèi)炎癥和脂多糖（LPS）刺激的小鼠乳腺上皮細胞（MMECs）具有保護作用機制。在體內(nèi)和體外均能明顯抑制脂多糖誘導(dǎo)的TNF－α、IL－6和IL－1β的產(chǎn)生，并降低LPS刺激的內(nèi)皮細胞I－κBα、p65、p38、ERK和JNK的磷酸化水平。研究發(fā)現(xiàn)，厚樸酚能顯著降低藥物組中血清TNF－α、IL－17、IL－22水平，并降低IL－17、TNF－α和核轉(zhuǎn)錄因子－κB（NF－κB）p65蛋白表達水平?？梢?，厚樸酚對于由LPS誘導(dǎo)的炎癥具有抑制作用，而其產(chǎn)生的抗炎效果與下調(diào)NF－κB p65炎癥通路的TNF－α和IL－17蛋白質(zhì)水平的表達水平有關(guān)［32］。

2.4 抗腫瘤

大量文獻證明，厚樸酚與和厚樸酚能通過阻止細胞周期、誘導(dǎo)細胞死亡來實現(xiàn)良好的抗腫瘤作用，尤其是對乳腺癌細胞、肺癌細胞等其他各種惡性腫瘤細胞均有著明顯的抑制作用。藺興遙等［33］研究和厚樸酚（HNK）對非小細胞肺癌（NSCLC）細胞系A(chǔ)549和H1299對低線性能量轉(zhuǎn)移（LET）X射線和高LET碳離子的輻射增敏效應(yīng)實驗。結(jié)果表明，HNK有效地抑制了NSCLC細胞DNA的DSB修復(fù)過程，阻止細胞的生成，誘導(dǎo)細胞凋亡以及增強細胞的輻射敏感性。CHIO等［34］研究發(fā)現(xiàn)，和厚樸酚與TMZ對藥物敏感和耐受性膠質(zhì)瘤細胞的自噬和隨后的細胞凋亡情況具有顯著的改善作用，表明和厚樸酚在治療神經(jīng)膠質(zhì)瘤疾病具有良好的藥用價值。劉暢等［35］探討不同濃度的和厚樸酚對肺癌A2細胞增殖和凋亡的影響，通過臺盼藍拒染法檢測和厚樸酚對細胞增殖情況。結(jié)果表明，和厚樸酚可以有效地阻止人肺癌A2細胞增殖，誘導(dǎo)細胞凋亡且對時間和劑量產(chǎn)生依賴性，還能上調(diào)Bax基因表達及下調(diào)BcL－2基因表達。宋劍楠等［36］研究和厚樸酚對膀胱癌細胞的生長抑制作用，通過蛋白印跡法檢測出，細胞在和厚樸酚作用下產(chǎn)生了凋亡蛋白，證實和厚樸酚能夠有效地抑制膀胱癌細胞的生長。

2.5 抗病毒

CHEN等［37］發(fā)現(xiàn)，和厚樸酚可以促進先天免疫相關(guān)基因的表達，通過NF－κB途徑增強了宿主對GCRV感染的先天性抗病毒反應(yīng)。周艷萌等［38］通過MTT法檢測厚樸及其提取物對細胞的毒性的抑制作用，結(jié)果表明厚樸酚和厚樸水浸液能通過調(diào)節(jié)細胞周期、提高細胞增殖指數(shù)達到對病毒的抑制作用。李龍［39］通過融合表達了熒光蛋白基因的重組病毒，包括HSV－1－GFP、KSHV－RGB－BAC16、MHV68－H2b－YFP等構(gòu)建方便檢測的皰疹病毒感染模型。借助于熒光顯微鏡觀察、實時定量PCR技術(shù)和蛋白免疫印跡技術(shù)等首次發(fā)現(xiàn)和厚樸酚具有抗皰疹病毒的作用，不僅可以抑制人的阿爾法型皰疹病毒（HSV－1）和伽馬型皰疹病毒（KSHV），也可以抗小鼠皰疹病毒（MHV68）。結(jié)果顯示，和厚樸酚抗HSV－1是通過抑制DNA復(fù)制，基因表達，病毒顆粒產(chǎn)生，并且對于病毒的入侵過程沒有影響。

2.6 對胃腸道作用

厚樸酚及和厚樸酚是鈣離子通道阻滯劑，能抑制胃腸道平滑肌收縮；也能促進胃動素和胃泌素分泌，增強胃腸道內(nèi)Cajal間質(zhì)細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的三磷酸肌醇受體和蘭尼堿受體的表達和受體活性，促進內(nèi)質(zhì)網(wǎng)釋放鈣離子，激活Cajal間質(zhì)細胞的起搏電流，增強胃腸道的節(jié)律性收縮。因此。厚樸酚及和厚樸酚對胃排空和胃腸推進運動產(chǎn)生雙向調(diào)節(jié)作用：當(dāng)各種病理因子引起胃腸道運動功能低下時表現(xiàn)為促進胃排空和胃腸推進運動；當(dāng)各種病理因子引起胃腸運動亢進時，表現(xiàn)為對抗亢進。加之厚樸酚及和厚樸酚的抗氧化和抗炎作用可保護腸黏膜免遭傷害，提高膿毒癥所致的胃腸道運動障礙，也能對抗各種腸炎和瀉藥所致的腹瀉。魏巍等［40］發(fā)現(xiàn)，厚樸酚及和厚樸酚可以抑制胃腸道平滑肌收縮，還能促進胃動素和胃泌素分泌，對胃排空和胃腸推進運動產(chǎn)生雙向調(diào)節(jié)作用。

3 小結(jié)

近年來，隨著對厚樸的化學(xué)成分及藥理機制的深入研究，發(fā)現(xiàn)其作用具有多靶點、多環(huán)節(jié)、多效應(yīng)、無不良反應(yīng)的獨特優(yōu)勢，應(yīng)用前景遼闊。厚樸中的有效成分復(fù)雜多樣，尤其是厚樸酚與和厚樸酚最為優(yōu)秀，另外還包括生物堿類、多糖類、揮發(fā)油類等其他有效成分，具有抗炎殺菌、抗氧化、治療癌癥、保護肝臟以及促進腸胃運動的作用。但也存在一些不足：①厚樸的藥理活性多種多樣，在研究檢測過程中也發(fā)現(xiàn)了一些新的活性物質(zhì)。多數(shù)文獻都是對已知的化學(xué)成分進行研究，對于厚樸的其他化學(xué)成分研究不深且研究數(shù)量較少。②現(xiàn)如今所具備的含量測定法基本是針對厚樸酚及和厚樸酚的檢測，并不能完全鑒定厚樸的化學(xué)成分。隨著科學(xué)分離技術(shù)的成熟和醫(yī)療事業(yè)的突破進展，厚樸中的活性物質(zhì)及藥理機制逐漸被大眾所發(fā)現(xiàn)和利用，因此在治療各種疾病方面的開發(fā)應(yīng)用上具有良好的發(fā)展前景。