MTHFR C677T基因多態(tài)性與高血壓病患者頸動脈斑塊及內(nèi)膜厚度的關(guān)聯(lián)性研究

魯大勝，章宏祥,吳小雷，汪 娟，賀常萍，楊凌飛

(1.皖南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院 心內(nèi)科，安徽 蕪湖 241000；2.皖南醫(yī)學(xué)院 血管性疾病研究中心，安徽 蕪湖 241000)

高血壓病是常見的心血管疾病，隨著生活節(jié)奏及人口老年化的加快，高血壓病的發(fā)病率、患病率呈逐年上漲的趨勢，在全球的發(fā)病率達(dá)10%[1]。有報道指出到2025年全球?qū)⒂?6億高血壓病患者[2]。高血壓刺激血管壁且損傷血管內(nèi)皮，引起動脈粥樣硬化，最終可導(dǎo)致嚴(yán)重心腦血管并發(fā)癥。對于早期動脈粥樣硬化的防治是減少高血壓病靶器官損害的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前已有多項研究證實患者血清同型半胱氨酸水平(homocysteine，Hcy)與頸動脈粥樣硬化、高血壓病及腦梗死發(fā)生呈正相關(guān)[3-4]。N5,N10-亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase，MTHFR)是Hcy在體內(nèi)代謝轉(zhuǎn)化的關(guān)鍵酶之一，MTHFR C677T 基因突變，即胞嘧啶(C)被胸腺嘧啶(T)置換，CT或TT基因型頻率增加可導(dǎo)致體內(nèi)葉酸代謝異常，引起高同型半胱氨酸血癥[5]。而高血壓病與高Hcy共同作用可加劇血管病變。本研究通過檢測高血壓病患者M(jìn)THFR C677T 基因多態(tài)性及頸動脈超聲，探討MTHFR C677T 基因突變與高血壓病患者頸動脈硬化的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2019年12月～2020年2月在皖南醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院就診的高血壓病患者86例，平均年齡(65.1±11.5)歲，其中男性49例(57.0%)，女性37例(43.0%)。納入標(biāo)準(zhǔn):符合原發(fā)性高血壓病診斷，排除既往有頸動脈內(nèi)膜剝脫術(shù)或支架安裝術(shù)者，以及近期服用葉酸制劑者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),并征得患者知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 一般臨床資料采集 住院期間通過病史采集患者的基本信息，包括糖尿病病史、吸煙史、性別及年齡等。

1.2.2 標(biāo)本采集及基因測定 住院期間采集患者外周靜脈血，送至我院藥劑科，然后運用熒光染色原位雜交分析技術(shù)對樣本進(jìn)行MTHFR C677T 基因多態(tài)性檢測，具體操作依照試劑說明書逐項進(jìn)行。

1.2.3 頸動脈超聲檢查 所有患者均接受頸動脈超聲檢測，由兩名高年資超聲科醫(yī)師采用GE彩色多普勒超聲診斷儀完成檢查。分別測量雙側(cè)頸總動脈近端至遠(yuǎn)端、頸內(nèi)外動脈分叉處，頸內(nèi)動脈及頸外動脈近端至遠(yuǎn)端內(nèi)-中膜厚度，檢查指標(biāo)包括頸動脈內(nèi)-中膜厚度(intima media thickness，IMT)以及是否有斑塊形成，測量3次，取平均值[6]。以雙側(cè)IMT平均值作為該樣本最終值納入統(tǒng)計。

1.2.4 血液生化檢查 入院第2天采集患者外周靜脈血送至檢驗科，檢測患者血脂、腎功能、血糖等生化指標(biāo)。

2 結(jié)果

2.1 頸動脈斑塊組與對照組的基線資料比較 將86例患者按照頸動脈超聲檢查結(jié)果分為斑塊組及正常對照組。斑塊組患者平均年齡大于對照組患者(P<0.05)，兩組在性別、糖尿病病史、吸煙史及載脂蛋白a1/b上差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 對照組與斑塊組的基線資料比較

2.2 頸動脈斑塊組與對照組MTHFR C677T CC、CT、TT基因型頻率比較 MTHFR C677T CC、CT、TT基因型在對照組的分布頻率分別為50.0%、40.0%及10.0%；在斑塊組的分布頻率為19.6%、64.3%及16.1%。結(jié)果顯示，將攜帶缺陷基因T的CT及TT合并為基因突變型，而CC基因型作為野生純合子型，則對照組野生純合子型、基因突變型各占50.0%；斑塊組野生純合子型占19.6%，基因突變型占80.4%，兩者在兩組分布差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=8.535，P=0.003)。校正了年齡混雜因素后，Logistic回歸顯示基因突變型(OR=5.171,95%CI：1.717～15.572)是發(fā)生斑塊的獨立危險因素。

2.3 MTHFR C677T基因突變與頸動脈IMT及Hcy關(guān)系 基因突變組(CT/TT)的平均IMT大于野生純合子組(CC)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；而基因突變組與野生純合子組的性別組成、年齡、吸煙史、糖尿病史以及載脂蛋白a1/b差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，見表2。相關(guān)性分析顯示，IMT與MTHFR C667T的基因型呈正相關(guān)(rs=0.266，P=0.013)。

本研究共有52名患者同時完成葉酸MTHFR C677T基因及血Hcy檢測。攜帶T基因的基因突變組(n=37)平均Hcy水平(18.80±15.81)μmol/L高于未攜帶T基因的野生純合子組[n=15，(12.37±4.17)μmol/L]，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=1.543，P=0.129)。

表2 基因突變組與野生純合子組的臨床資料比較

3 討論

Hcy水平與高血壓病、冠心病、缺血性腦卒中等心腦血管病變密切相關(guān)。高血壓合并高同型半胱氨酸的患者更易出現(xiàn)早期頸部動脈粥樣硬化[7]。因此，對高同型半胱氨酸的預(yù)防至關(guān)重要。Hcy在體內(nèi)的代謝受到葉酸代謝的影響，而MTHFR C677T 基因突變會導(dǎo)致葉酸代謝異常，進(jìn)而可增加血Hcy水平，引發(fā)心腦血管事件[8]。本研究把頸部動脈粥樣硬化與MTHFR C677T基因突變相關(guān)聯(lián)，探討MTHFR C677T基因突變與頸部動脈粥樣硬化以及頸動脈IMT的關(guān)系。本研究中頸動脈斑塊組的患者年齡高于正常組，這符合動脈硬化發(fā)展的自身規(guī)律。但兩組間在其他高危因素方面，如糖尿病病史、吸煙史以及載脂蛋白水平等差異無統(tǒng)計學(xué)意義。組間卡方分析顯示斑塊組的患者攜帶MTHFR C677T缺陷基因T的比例更高，多因素分析在校正了年齡等混雜因素后，仍顯示MTHFR C677T基因突變是發(fā)生頸動脈粥樣斑塊的獨立危險因素。

本研究的結(jié)果與既往研究基本一致。鄒宏麗等[9]研究顯示MTHFR C677T基因多態(tài)性，特別是TT基因型與高血壓病患者頸動脈粥樣斑塊形成有關(guān),且MTHFR C677T基因突變是通過高Hcy發(fā)揮其促動脈硬化作用。 本研究不僅說明了MTHFR C677T基因多態(tài)性與頸動脈斑塊形成的關(guān)系，同時也評估了頸動脈IMT與MTHFR C677T基因突變的相關(guān)性。與之前研究不同的是，在本研究中，盡管有升高趨勢，但未觀測到MTHFR C677T基因突變與Hcy水平的顯著相關(guān)性。造成這一結(jié)果的原因可能為：①最終納入分析的樣本量較少，因此未能得到統(tǒng)計學(xué)顯著性；②人體內(nèi)Hcy的水平受到葉酸攝入的影響[10-11]。雖然本研究未納入近期服用葉酸制劑的患者，但并不能排除食物中葉酸攝入的差異。因此，即使攜帶T缺陷基因，但如果患者近期飲食結(jié)構(gòu)富含葉酸，則即時Hcy水平可能并不升高。因此Hcy的水平具有一定的波動性，而MTHFR C677T基因突變則相對來說可更穩(wěn)定地預(yù)測患者的疾病風(fēng)險。

綜上所述，高血壓病患者的MTHFR C677T基因突變與其頸動脈粥樣硬化斑塊形成及頸動脈IMT增加相關(guān)。MTHFR C677T基因突變是頸動脈斑塊形成的獨立危險因素之一。