6%羥乙基淀粉130/0.4 不同輸注方式對小鼠的免疫細(xì)胞的影響

衣秀娜 張建中 黃紹艷（通訊作者）

（1 煙臺(tái)山醫(yī)院麻醉科 山東 煙臺(tái) 264000）

（2 煙臺(tái)山醫(yī)院腫瘤科 山東 煙臺(tái) 264000）

HES 平均分子量為13 萬道爾頓，HES 的分子量呈正態(tài)分布并且更加集中，被a-淀粉酶降解的少，對凝血及肝腎功能的影響更小[1]。HES 已經(jīng)廣泛用于各種休克的治療[2]。但前期研究發(fā)現(xiàn)[3]，HES 輸入體內(nèi)后在低年齡組兒童會(huì)明顯的漏出血管外，這與兒童的血管發(fā)育不完善密切相關(guān)。HES 在血管內(nèi)被淀粉酶水解，漏出血管外HES 缺少淀粉酶水解需要巨噬細(xì)胞清除，對免疫系統(tǒng)影響需要進(jìn)一步研究。本研究采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究HES 對免疫細(xì)胞的影響，比較HES 通過腹腔和靜脈方式輸入小鼠體內(nèi)后對免疫細(xì)胞的影響，為HES 的臨床安全使用提供依據(jù)。

1.材料和方法

1.1 材料來源

將體重18 ～22 克成熟雌性的60 只四周齡小鼠隨機(jī)分為兩組，小鼠的血容量約占體重的7.5%，乙醚麻醉后，腹腔和眼靜脈輸入10%血容量的HES。B 組腹腔內(nèi)注射輸入10%血容量的HES，D 組經(jīng)眼靜脈內(nèi)注射輸入10%血容量的HES。

1.2 方法

輸入液體后第1（T0）、7（T1）、14（T2）天分批處死小鼠，檢測WBC、LYM、GRN。同時(shí)取新鮮的脾組織放研磨器內(nèi)研磨，200 目篩，PBS 溶液2ml，稀釋10 倍，顯微鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)板數(shù)細(xì)胞數(shù)。白細(xì)胞/L=每個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞數(shù)×稀釋倍數(shù)×106個(gè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS16.0 統(tǒng)計(jì)分析軟件分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組內(nèi)不同時(shí)間點(diǎn)的參數(shù)采用單因數(shù)方差分析，組間比較采用兩組獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，P＜0.05 認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

3.結(jié)果

3.1 兩組小鼠血免疫細(xì)胞指標(biāo)的比較

與T0時(shí)比較，B、D兩組WBC在T1和T2時(shí)升高；與T0時(shí)比較， B 組LYM 在T1、T2 時(shí)降低，D 組LYM 在T2 時(shí)升高；與T0 時(shí)比較， B 組GRN 在T1 時(shí)升高、T2 時(shí)降低，D 組GRN 在T1、T2 時(shí)降低。與B 組相比，D 組WBC 在T1 時(shí)降低、T2 時(shí)升高；與B 組相比， D 組LYM 在T0 時(shí)降低。與B 組相比，D 組GRN 在T1 降低，見表1。

表1 兩組小鼠血免疫細(xì)胞指標(biāo)的比較（±s，×109/L）

表1 兩組小鼠血免疫細(xì)胞指標(biāo)的比較（±s，×109/L）

指標(biāo) 組別 T0 T1 T2 WBC B 14.8±1.7 80.7±6.2ab 45.7±4.0a D 15.6±2.4 32.8±4.1ab 74.5±8.7ab LYM B 13.4±1.2 3.2±0.4ab 3.6±0.5a D 4.5±0.6b 4.6±0.5 6.1±0.8ab GRN B 0.52±0.05 0.85±0.07a 0.22±0.03a D 0.54±0.04 0.44±0.05ab 0.21±0.03a

3.2 兩組小鼠脾臟白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較

與T0 時(shí)比較，B、D 四組脾臟WBC 在T1 和T2 時(shí)升高；與B組比較，D 組脾臟WBC 在T1 時(shí)減低在T2 時(shí)升高，見表2。

表2 兩組小鼠脾臟白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較（±s，×109/L）

表2 兩組小鼠脾臟白細(xì)胞計(jì)數(shù)比較（±s，×109/L）

指標(biāo) T0 T1 T2 B 14.8±1.7 80.7±6.2a 45.7±4.0a D 15.6±2.4 32.8±4.1ab 74.5±8.7ab

3.討論

HES 作為一種大分子物質(zhì)可以治療血管毛細(xì)血管滲漏，與機(jī)械堵漏和抗炎作用有關(guān)[4]。本課題組前期研究通過測定HES與白蛋白的相關(guān)作用關(guān)系[5]，發(fā)現(xiàn)HES 輸入體內(nèi)后與白蛋白214位色氨酸結(jié)合形成1：1 復(fù)合物，體積增大理論上利于HES 在毛細(xì)血管綜合癥患者的機(jī)械堵漏。但同時(shí)發(fā)現(xiàn)HES 在血管內(nèi)皮損傷患者存在明顯的血管外滲漏[3]。本研究比較HES 通過腹腔和靜脈方式輸入小鼠體內(nèi)后對免疫細(xì)胞的影響，為HES 的臨床安全使用提供依據(jù)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同組間和不同時(shí)間點(diǎn)的免疫指標(biāo)存在明顯差異，與不同給藥方式對機(jī)體刺激強(qiáng)度不同有關(guān)。從分離的灌注小腸的小鼠模型結(jié)果發(fā)現(xiàn)[6]，HES損害腸屏障完整性和代謝功能，從而影響免疫細(xì)胞。但最新動(dòng)物研究表明[7]，HES 在小鼠全身和肺部炎癥期間降低血管通透性，減弱全身炎癥期間血管通透性的增加，改善免疫功能。因此，HES對小鼠的免疫細(xì)胞有多方面的影響，因此在臨床中對人體的免疫系統(tǒng)的影響需要進(jìn)一步研究。