血清胃蛋白酶原對(duì)幽門螺桿菌感染的診斷價(jià)值

金 鑫， 李樹(shù)錦， 陳 貞， 沈佐君

[1.合肥市第二人民醫(yī)院 安徽醫(yī)科大學(xué)附屬合肥醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽 合肥 230011；2.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)附屬第一醫(yī)院（安徽省立醫(yī)院）科研處，安徽 合肥 230001]

幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，HP）感染可引起胃炎、消化性潰瘍、胃癌及黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤等多種胃腸道疾病[1]。HP持續(xù)感染會(huì)導(dǎo)致胃黏膜炎癥和胃腺體萎縮，而萎縮性胃炎是胃癌的重要危險(xiǎn)因素之一[2]。HP感染者患胃癌的風(fēng)險(xiǎn)至少是非感染者的20倍[3]。因此，HP被認(rèn)為是Ⅰ類致癌物質(zhì)之一[4]。胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前體，在pH值＜5.0時(shí)可活化為胃蛋白酶，根據(jù)其生化和免疫學(xué)特性可分為胃蛋白酶原Ⅰ（pepsinogen Ⅰ，PGⅠ）和胃蛋白酶原Ⅱ（pepsinogen Ⅱ，PGⅡ）。PGⅠ主要由胃底的主細(xì)胞和黏液細(xì)胞分泌，而PGⅡ除由上述2種細(xì)胞分泌外，還可由胃賁門腺、幽門腺、十二指腸Brunner腺分泌，胃蛋白酶原分泌入胃腔后約有1%吸收入血，其水平間接反映了胃黏膜組織的狀態(tài)和功能[5]。將胃蛋白酶原用于診斷胃黏膜萎縮嚴(yán)重程度并預(yù)測(cè)胃癌風(fēng)險(xiǎn)的標(biāo)準(zhǔn)已被建立。胃癌的患病風(fēng)險(xiǎn)在有無(wú)HP感染的個(gè)體之間差異很大，因此診斷患者是否感染HP比確定胃黏膜萎縮的嚴(yán)重程度更為重要。如果可以通過(guò)血清學(xué)試驗(yàn)評(píng)估胃癌的患病風(fēng)險(xiǎn)，無(wú)HP感染的低風(fēng)險(xiǎn)患者可以避免不必要的胃鏡檢查。KIKUCHI等[3]提出了一種通過(guò)胃蛋白酶原水平判斷患者是否存在HP感染的方法，并建立了相關(guān)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)。然而，國(guó)內(nèi)對(duì)這方面的研究甚少。為此，本研究擬探討PGⅠ、PGⅡ以及胃蛋白酶原Ⅰ/胃蛋白酶原Ⅱ比值（pepsinogen Ⅰ/pepsinogen Ⅱ ratio，PGR）在判斷HP感染中的價(jià)值。

1 材料和方法

1.1 研究對(duì)象

選取2017年2月—2019年8月在合肥市第二人民醫(yī)院進(jìn)行血清HP抗體和胃蛋白酶原檢測(cè)并接受尿素呼氣試驗(yàn)檢查的住院患者。納入血清HP抗體和尿素呼氣試驗(yàn)結(jié)果一致的患者88例，其中男50例、女38例，年齡19～85歲。

1.2 方法

采集所有研究對(duì)象空腹靜脈血5 mL，室溫靜置30 min，1 610×g離心5 min，分離血清。

采用膠乳免疫比濁法檢測(cè)血清總HP抗體水平，包括IgG、IgM和IgA，試劑盒購(gòu)自北京萬(wàn)泰德瑞公司，檢測(cè)儀器為7600全自動(dòng)生化分析儀（日本日立公司）。根據(jù)試劑盒提供的臨界值判斷陰陽(yáng)性：HP抗體＞15 AU/mL為陽(yáng)性、≤15 AU/mL為陰性。根據(jù)廠商聲明，該法診斷HP感染的敏感性、特異性及精確度均達(dá)到90%以上。

采用熒光免疫層析法檢測(cè)血清PGⅠ、PGⅡ水平并計(jì)算PGR，試劑盒購(gòu)自芬蘭必歐瀚生物公司，檢測(cè)儀器為HIT-91A熒光免疫分析儀（芬蘭必歐瀚生物公司）。

1.3 HP感染的判定

所有患者均進(jìn)行尿素呼氣試驗(yàn)，根據(jù)第5次全國(guó)HP感染處理共識(shí)報(bào)告，尿素呼氣試驗(yàn)是目前非侵入性診斷HP感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”，同時(shí)參照合肥市第二人民醫(yī)院消化內(nèi)科診療標(biāo)準(zhǔn)，將尿素呼氣試驗(yàn)和HP抗體同時(shí)陽(yáng)性判定為HP感染（HP感染組56例），同時(shí)陰性判定為未感染HP（HP非感染組32例），僅1項(xiàng)陽(yáng)性不納入本研究。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。呈非正態(tài)分布的數(shù)據(jù)以中位數(shù)（M）[四分位數(shù)（P25～P75）]表示，組間比較采用非參數(shù)Mann-WhitneyU檢驗(yàn)。采用受試者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線評(píng)估各項(xiàng)指標(biāo)判斷HP感染的價(jià)值。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HP感染組與HP非感染組血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的比較

88例患者中HP感染率為63.64%（56/88）。HP感染組血清PGⅠ、PGⅡ水平均高于HP非感染組（P值分別為0.021、0.000），PGR低于非感染組（P=0.000）。見(jiàn)表1。

表1 HP感染組與HP非感染組血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的比較 M（P25～P75）

2.2 不同性別之間血清PGⅠ、PGⅡ水平及PGR的比較

男性血清PGⅠ、PGⅡ水平均高于女性（P值分別為0.002、0.008），PGR男性、女性之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.601）。見(jiàn)表2。

表2 不同性別之間PGⅠ、PGⅡ含量以及PGR值比較 M（P25～P75）

2.3 PGⅠ、PGⅡ及PGR判斷HP感染的效能

ROC曲線分析結(jié)果顯示，PGⅠ、PGⅡ及PGR判斷HP感染的曲線下面積（area under curve，AUC）分別為0.648、0.785和0.789，PGⅡ和PGR的最佳臨界值分別為15.57 μg/L、9.27，敏感性分別為76.79%、75.00%，特異性分別為78.13%、68.75%。采用Logistic回歸分析建立PGⅡ和PGR聯(lián)合檢測(cè)的模型：Log（P）=2.332+0.080×PGⅡ-0.313×PGR，聯(lián)合檢測(cè)模型判斷HP感染的AUC為0.829，敏感性為92.86%，特異性為65.63%。見(jiàn)圖1。

圖1 PGⅠ、PGⅡ、PGR及PGⅡ+PGR聯(lián)合檢測(cè)判斷HP感染的ROC曲線

3 討論

流行病學(xué)調(diào)查顯示，我國(guó)人群HP的自然感染率為50%～60%[6]，本研究的HP感染率為63.64%，與文獻(xiàn)報(bào)道[6]基本一致。本研究結(jié)果顯示，HP感染組血清PGⅠ、PGⅡ水平均高于HP非感染組（P值分別為0.021、0.000），PGR低于HP非感染組（P=0.000），與國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道[7-8]一致。本研究結(jié)果還顯示，男性血清PGⅠ、PGⅡ水平均高于女性（P值分別為0.002、0.008），PGR男性、女性之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.601），與蔣葉華等[9]的研究結(jié)果一致。

HP感染導(dǎo)致的胃黏膜變化是一個(gè)較長(zhǎng)的演變過(guò)程。OKUDA等[7]的研究結(jié)果顯示，HP感染可導(dǎo)致胃蛋白酶原分泌增加，在胃黏膜炎癥或輕度萎縮患者中，PGⅠ、PGⅡ分泌增多，且PGⅡ增多的幅度通常較大，故PGR降低。隨著胃黏膜萎縮的進(jìn)展，胃底的主細(xì)胞數(shù)量逐漸減少，血清PGⅠ水平降低，但PGⅡ水平無(wú)明顯變化，導(dǎo)致PGR降低更為顯著[10]。因此，血清胃蛋白酶原和PGR的變化可被用于評(píng)估胃黏膜的狀態(tài)和功能，在一定程度上也可以判斷是否有HP感染。日本學(xué)者KIKUCHI等[3]提出可用胃蛋白酶原水平來(lái)區(qū)分有無(wú)HP感染，但國(guó)內(nèi)相關(guān)的研究甚少。采用血清胃蛋白酶原水平來(lái)判斷有無(wú)HP感染的目的在于使有HP感染的胃癌高風(fēng)險(xiǎn)患者能得到及時(shí)地診斷和治療，同時(shí)盡量減少無(wú)HP感染的胃癌低風(fēng)險(xiǎn)患者不必要的上消化道內(nèi)鏡檢查。KIYOHIRA等[11]采用放射免疫法檢測(cè)胃蛋白酶原水平，并將PGⅡ≥15 μg/L或PGR≤6.5作為HP感染的陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)。KIKUCHI等[3]分別采用化學(xué)發(fā)光磁顆粒免疫分析法和膠乳凝集法檢測(cè)胃蛋白酶原水平，并分別建立HP感染陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，化學(xué)發(fā)光磁顆粒免疫分析法為PGⅡ≥10 μg/L或PGR≤5.0，膠乳凝集法為PGⅡ≥12 μg/L或PGR≤4.0。

尿素呼氣試驗(yàn)是目前臨床應(yīng)用最廣、檢測(cè)準(zhǔn)確性相對(duì)較高的HP檢測(cè)方法，是非侵入性診斷HP感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”[12]。本研究為了避免假陽(yáng)性，同時(shí)用膠乳比濁法檢測(cè)血清HP抗體水平加以驗(yàn)證。陳文舉等[13]采用與本研究相同的試劑和方法檢測(cè)血清HP抗體，結(jié)果顯示，膠乳免疫比濁法檢測(cè)血清HP抗體的敏感性為93.3%，特異性為96.7%，診斷符合率為95.0%，與病理組織嗜銀染色法比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。因此，本研究采用尿素呼氣試驗(yàn)和HP抗體聯(lián)合檢測(cè)來(lái)確定患者是否感染HP，排除二者結(jié)果不一致的患者，大大提高了臨床診斷HP感染的準(zhǔn)確性，且與臨床診療標(biāo)準(zhǔn)相一致。ROC曲線分析結(jié)果顯示，將PGⅡ≥15.57 μg/L作為判斷HP感染的標(biāo)準(zhǔn)，敏感性為76.79%，特異性為78.13%；將PGR≤9.27作為判斷HP感染的標(biāo)準(zhǔn)，敏感性為75.00%，特異性為68.75%；二者聯(lián)合檢測(cè)的診斷效能更佳，判斷HP感染的AUC為0.829，敏感性為92.86%，特異性為65.63%。本研究結(jié)果與KIYOHIRA等[11]的研究結(jié)果基本一致，與其他文獻(xiàn)報(bào)道有一定差異，原因可能與檢測(cè)方法及試劑不同有關(guān)。本研究結(jié)果顯示，將PGⅡ與PGR聯(lián)合檢測(cè)用于排除HP感染，65.63%的特異性提示可使約66% HP非感染者避免內(nèi)鏡檢查。

本研究存在一定的局限性：首先，收集的樣本量較小，可能會(huì)導(dǎo)致結(jié)果出現(xiàn)偏差；其次，本研究未結(jié)合患者胃鏡及病理結(jié)果，建立胃蛋白酶原水平判斷HP感染的標(biāo)準(zhǔn)需要結(jié)合胃鏡檢查結(jié)果；再次，未排除曾經(jīng)感染過(guò)HP但已成功根除且血清抗體消除的患者，有研究結(jié)果顯示，已成功根除HP的感染者發(fā)生胃癌的風(fēng)險(xiǎn)高于從未感染HP者[3]。因此，有必要對(duì)患者病史進(jìn)行仔細(xì)詢問(wèn)。

綜上所述，血清胃蛋白酶原是評(píng)價(jià)胃黏膜功能較為簡(jiǎn)單、客觀的方法，也可作為HP感染的標(biāo)志物，可以避免對(duì)無(wú)HP感染的胃癌低風(fēng)險(xiǎn)者進(jìn)行不必要的胃鏡檢查。