66%丁草胺·解草啶乳油的氣相色譜分析方法研究

劉為東，陸雪芳*，陳蕓蕓

(南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司，江蘇南通226017)

丁草胺(butachlor)是一種高效內(nèi)吸傳導(dǎo)型苯乙酰胺類芽前除草劑[1]，主要被雜草幼芽吸收，抑制雜草幼芽和幼根正常生長發(fā)育，從而使雜草死亡。而除草劑安全劑是一種能夠選擇性地保護(hù)農(nóng)作物免遭除草劑的藥害，但不降低除草劑對靶標(biāo)雜草的活性的物質(zhì)。解草啶(fenclorim)化學(xué)名稱為4,6-二氯-2-苯基嘧啶，是一種重要的除草劑解毒劑。由解草啶與丁草胺配成的乳油，對水稻有很好的選擇性[1,2]。目前有關(guān)解草啶的高效液相色譜方法已有報(bào)道[3]，而丁草胺含量的檢測也有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)[4]，但兩種成分在同一色譜條件下進(jìn)行同柱分析的方法尚未見報(bào)道，采用國家標(biāo)準(zhǔn)發(fā)現(xiàn)解草啶與伯酰胺不能很好地分離。本文采用氣相色譜法對丁草胺及其雜質(zhì)伯酰胺有很好的分離效果，對農(nóng)藥產(chǎn)品中解草啶的質(zhì)量檢測提供了較好技術(shù)支持。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

主要儀器：7890B型氣相色譜儀配氫離子火焰檢測器、分流/不分流毛細(xì)柱進(jìn)樣口和色譜工作站(美國安捷倫公司)；FA1004型萬分之一電子天平(上海天平儀表廠)。

試劑和藥劑：丙酮(分析純，上海凌峰化學(xué)試劑有限公司)；磷酸三苯酯(內(nèi)標(biāo)物，阿拉丁)；丁草胺標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%(沈陽化工研究院提供)；解草啶標(biāo)樣，質(zhì)量分?jǐn)?shù)≥98.0%(沈陽化工研究院提供)；66%丁草胺·解草啶乳油樣品(南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司提供)。

內(nèi)標(biāo)溶液配制：稱取約0.6 g磷酸三苯酯(精確至0.000 2 g)于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解，定容，搖勻，備用。

1.2 氣相色譜操作條件

色譜柱采用HP-5石英毛細(xì)管柱[長30 m×320 μm(id)，膜厚 0.25 μm]。程序升溫條件：初始柱溫 45 ℃，維持2 min，以25 ℃/min的速率升溫至250 ℃，維持6 min。汽化室溫度250 ℃；檢測器溫度250 ℃；載氣流速：氮?dú)?N2)為 4 mL/min；氫氣(H2)為40 mL/min；空氣(Air)為 400 mL/min；進(jìn)樣體積 1.0 μL。在上述色譜條件下，解草啶、伯酰胺、丁草胺和磷酸三苯酯的保留時(shí)間分別為16.3、16.4、19.0、20.5 min。典型的丁草胺解和草啶標(biāo)樣和樣品的氣相色譜圖見圖1和圖2。

圖1 丁草胺、解草啶標(biāo)樣色譜圖(1-解草啶、2-丁草胺、3-磷酸三苯酯)

圖2 66%丁草胺·解草啶乳油色譜圖(1-解草啶、2-丁草胺、3-磷酸三苯酯、4-伯酰胺)

1.3 測定步驟

標(biāo)樣溶液的配制：稱取約0.06 g丁草胺及解草啶標(biāo)樣(精確至0.000 2 g)于25 mL三角碘量瓶中，用移液管準(zhǔn)確加入5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，搖勻，備用。

試樣溶液的配制：稱取試樣0.05 g(精確至0.000 2 g)于25 mL三角碘量瓶中，用移液管準(zhǔn)確加入5 mL上述內(nèi)標(biāo)溶液，搖勻，備用。

測定：在上述色譜操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，計(jì)算各針相對響應(yīng)值，待相鄰兩針的相對響應(yīng)值變化小于1.5%，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測定。

1.4 計(jì)算

將測得的兩針試樣溶液以及試樣前后兩針標(biāo)樣溶液中丁草胺(或解草啶)與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比分別進(jìn)行平均，丁草胺(或解草啶)質(zhì)量百分含量 X(%)，按下式計(jì)算：

式中：A1為標(biāo)樣溶液中丁草胺(或解草啶)峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；A2為試樣溶液中丁草胺(或解草啶)峰面積與內(nèi)標(biāo)物峰面積比的平均值；P為標(biāo)準(zhǔn)品中丁草胺(或解草啶)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；m1為丁草胺(或解草啶)標(biāo)樣的質(zhì)量，g；m2為試樣質(zhì)量，g。

2 結(jié)果與討論

2.1 溶劑的選擇

分別選用丙酮、三氯甲烷、DMF等氣相色譜常見的溶劑對樣品進(jìn)行溶解分析，結(jié)果表明樣品有效成分在丙酮中的溶解效果比較好，而且丙酮沸點(diǎn)低，極性小，毒性小，出峰比較快，能與樣品的雜質(zhì)峰、內(nèi)標(biāo)峰、丁草胺及解草啶峰均有很好的分離。

2.2 內(nèi)標(biāo)物的選擇

分別采用正十八烷、鄰苯二甲酸二戊酯、鄰苯二甲酸二丁酯、磷酸三苯酯等常見的內(nèi)標(biāo)物對丁草胺及解草啶進(jìn)行分析試驗(yàn)，結(jié)果表明在上述色譜操作條件下，以磷酸三苯酯為內(nèi)標(biāo)時(shí)，丁草胺、解草啶與內(nèi)標(biāo)物能很好地分離，尤其不受雜質(zhì)的干擾，且峰形對稱。

2.3 色譜條件的選擇

采用丁草胺行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的條件進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)解草啶與雜質(zhì)伯酰胺保留時(shí)間一致，兩峰基本重疊。經(jīng)多次試驗(yàn)，同時(shí)考慮與丁草胺行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的一致性，選擇HP-5小口徑石英毛細(xì)柱，磷酸三苯酯為內(nèi)標(biāo)，采用程序升溫進(jìn)行測定，基線平穩(wěn)，解草啶與丁草胺和伯酰胺峰能較好地分離。

2.4 方法的線性相關(guān)性

分別稱取丁草胺標(biāo)樣0.6 g(精確至0.000 2 g)、解草啶標(biāo)樣0.6 g(精確至0.000 2 g)，于50 mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀釋至刻度，搖勻，配成標(biāo)準(zhǔn)儲備液。分別準(zhǔn)確移取該標(biāo)準(zhǔn)儲備液1、3、5、7、9 mL于5個(gè)25 mL三角碘量瓶中，加入5 mL內(nèi)標(biāo)溶液，搖勻。在上述色譜條件下分別進(jìn)行測定，得出相應(yīng)的峰面積(表1)。以待測組分的質(zhì)量(x)為橫坐標(biāo)，試樣有效成分與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比為縱坐標(biāo)(Y)，繪制校正曲線(圖3、圖4)。得到的線性方程為：丁草胺：Y=0.017 6x-0.007 9，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9；解草啶：Y=0.019 8x-0.002 1, 線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9。

表1 分析方法的線性相關(guān)性測定結(jié)果

圖3 丁草胺線性關(guān)系圖

圖4 解草啶線性關(guān)系圖

2.5 方法的精密度

從同一產(chǎn)品中準(zhǔn)確稱取5個(gè)試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行平行測定，測得丁草胺的標(biāo)準(zhǔn)偏差為 0.25，變異系數(shù)為 0.41%；解草啶的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.024，變異系數(shù)為0.39%(表2)。

表2 精密度試驗(yàn)測定結(jié)果

2.6 方法的準(zhǔn)確度

準(zhǔn)確稱取5個(gè)已知含量的試樣，分別加入一定量的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，然后按上述色譜條件進(jìn)行重復(fù)測定，測得丁草胺的平均回收率為 99.8%，解草啶的平均回收率為99.7%(表3)。

表3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)測定結(jié)果

3 結(jié) 論

本文建立了氣相色譜儀同時(shí)測定66%丁草胺·解草啶乳油中丁草胺和解草啶含量的方法。該方法線性關(guān)系良好，具有較高的準(zhǔn)確度和精密度，并且操作簡便，快速，是一種比較理想的分析方法。