流式細(xì)胞儀在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用

王蘭平

流式細(xì)胞儀是醫(yī)學(xué)檢驗中常用的一種儀器設(shè)備，用于自動分析和分選細(xì)胞。該儀器能夠?qū)崿F(xiàn)對液體中懸浮分散細(xì)胞的快速測量、貯存、顯示，同時給出生物化學(xué)、生物物理等各方面的特征參數(shù)，還能夠依據(jù)預(yù)先設(shè)定的參量范圍，從中分選出指定的細(xì)胞亞群。很多普通的流式細(xì)胞儀只能夠?qū)?xì)胞中的總蛋白量、總核酸量等指標(biāo)加以檢測，而無法鑒別測出某個特定位置的蛋白或核酸，因此在細(xì)節(jié)分辨率上通常為零。不過，這仍然不會影響其在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用價值，例如在細(xì)胞表面物質(zhì)、細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)、細(xì)胞受體、腫瘤細(xì)胞DNA、RNA含量和免疫細(xì)胞功能的分析中，其都能發(fā)揮巨大的作用。

流式細(xì)胞儀的介紹

流式細(xì)胞儀是一種比較先進(jìn)的新型高科技儀器設(shè)備，整合了單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、計算機(jī)技術(shù)、光電測量技術(shù)、電子物理技術(shù)和激光技術(shù)等諸多先進(jìn)技術(shù)，能夠在快速直線流動的細(xì)胞或生物顆粒中，實現(xiàn)快速定量分析多種參數(shù)及分選目標(biāo)細(xì)胞亞群的功能。目前，隨著技術(shù)水平的不斷發(fā)展，流式細(xì)胞儀得到了進(jìn)一步的完善，在細(xì)胞分析及分選中能夠發(fā)揮出更大的作用。流式細(xì)胞儀在生物化學(xué)、細(xì)胞遺傳學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、腫瘤學(xué)、血液學(xué)和免疫學(xué)等諸多基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)或臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中都有所應(yīng)用，為臨床疾病的研究提供了巨大的幫助。流式細(xì)胞儀的構(gòu)成主要包括了四個部分，分別是計算機(jī)及分析系統(tǒng)、光電管及檢測系統(tǒng)、激光源及光學(xué)系統(tǒng)、流動式及液流系統(tǒng)。

流式細(xì)胞儀的操作使用方法

使用流式細(xì)胞儀前，操作人員需要進(jìn)行調(diào)試和校準(zhǔn)，確保儀器最佳的運行狀態(tài)。調(diào)試內(nèi)容主要包括了測量區(qū)光路、液流速度、激光強(qiáng)度等。操作使用中，操作人員先將電源打開，并預(yù)熱系統(tǒng)，然后將氣體閥打開，調(diào)節(jié)壓力參數(shù)，得到適合的液流速度，并將光源冷卻系統(tǒng)開啟;將去離子水加入樣品管中，沖洗液流噴嘴系統(tǒng);使用校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物品調(diào)整儀器，調(diào)定放大器電路增益、光電倍增管電壓、激光功率，確保散射熒光強(qiáng)度達(dá)到最高，變異系數(shù)達(dá)到最小;選定測量參數(shù)、測量細(xì)胞數(shù)、流速后，以相同工作條件，分別測量目標(biāo)樣品及對照樣品;選擇計算機(jī)屏上數(shù)據(jù)顯示方式，直接觀察和了解測量進(jìn)程;測量完成后使用去離子水沖洗液流系統(tǒng);實驗數(shù)據(jù)存入計算機(jī)系統(tǒng)后，關(guān)閉氣體閥及測量裝置，讓計算機(jī)處理數(shù)據(jù)，得出最終結(jié)果。

流式細(xì)胞儀在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用

在醫(yī)學(xué)檢驗中，流式細(xì)胞儀的具體應(yīng)用非常廣泛，本文只選取幾個比較有代表性的應(yīng)用予以介紹。

（一）在腫瘤學(xué)中的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀在腫瘤細(xì)胞學(xué)診斷中，能夠達(dá)到較高的準(zhǔn)確率。相關(guān)人員可以使用該儀器開展細(xì)胞周期分析、DNA倍體分析、檢測細(xì)胞增殖標(biāo)志物定量分析、細(xì)胞表面物質(zhì)分析、癌基因蛋白產(chǎn)物分析、耐藥蛋白分析、細(xì)胞凋亡分析等。通過檢測可以得到更加充足的信息，在腫瘤的臨床診斷、治療、預(yù)防中，提供依據(jù)和指導(dǎo)，輔助選擇化療藥物及放療時間強(qiáng)度，同時還可早期診斷癌癥，鑒別腫瘤良惡性等。利用流式細(xì)胞儀檢測腫瘤細(xì)胞多藥耐藥相關(guān)蛋白表達(dá)水平，醫(yī)生能夠輔助選擇腫瘤化療藥物，并監(jiān)測判斷腫瘤化療效果。

（二）在免疫學(xué)中的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀可用于測定淋巴細(xì)胞亞群，如NK淋巴細(xì)胞群、B淋巴細(xì)胞群、T淋巴細(xì)胞群等。自身免疫性疾病患者，淋巴細(xì)胞水平可能會升高，如自身免疫性溶血、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡等。免疫缺陷性疾病的患者，自身免疫功能下降，因而淋巴細(xì)胞水平較低，如再生性貧血障礙、活動性肝硬化、腫瘤、病毒感染、艾滋病等。在具體的臨床應(yīng)用中，通過測定CD4+淋巴細(xì)胞、CD8+淋巴細(xì)胞的水平占比，能夠監(jiān)測免疫反應(yīng)患者、自身免疫性疾病患者、免疫缺陷疾病患者的免疫狀態(tài)。

（三）在血液病中的應(yīng)用

流式細(xì)胞儀可以用于診斷、分型白血病，同時能夠輔助醫(yī)生選擇治療方案，判斷評估預(yù)后情況，研究疾病發(fā)病機(jī)理等。白血病類型主要包括T淋巴細(xì)胞白血病、B淋巴細(xì)胞白血病、NK淋巴細(xì)胞白血病、紅白血病、巨核細(xì)胞白血病等。醫(yī)生可以使用該儀器檢測白血病及淋巴瘤，特別是對在細(xì)胞化學(xué)染色及形態(tài)學(xué)檢查中無法確診的患者，能夠達(dá)到理想的診斷效果。通過細(xì)胞儀分析判斷白血病，醫(yī)生能夠有效補(bǔ)充和深化常規(guī)形態(tài)學(xué)方法，如形態(tài)學(xué)檢出急性淋巴細(xì)胞白血病，或急性未分化白血病，可利用流式細(xì)胞儀判斷特異性淋巴細(xì)胞系統(tǒng)，從而提高診斷準(zhǔn)確率。

流式細(xì)胞儀在醫(yī)學(xué)檢驗中有著十分廣泛的應(yīng)用，在很多疾病的輔助診斷、選擇治療方案、評估預(yù)后效果、分析發(fā)病原理等方面，都有較好的應(yīng)用效果，具有重要的臨床應(yīng)用價值。