• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    利拉魯肽作用腸道固有淋巴細(xì)胞改善小鼠炎癥性腸病

    2020-08-18 10:05:48孫寒曉李詠梅盛慧明
    關(guān)鍵詞:利拉魯貨號(hào)結(jié)腸

    李 月 ,孫寒曉,殳 潔,李詠梅,盛慧明#

    1. 北華大學(xué)醫(yī)學(xué)院,吉林132013;2. 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬同仁醫(yī)院檢驗(yàn)科,上海200336

    炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease,IBD)是一種慢性炎癥性腸道疾病,包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)和克羅恩?。–rohn's disease,CD)[1]。流行病學(xué)顯示IBD 發(fā)病率在亞洲國(guó)家和其他發(fā)展中國(guó)家呈逐年上升趨勢(shì)[2],嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。目前,其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確[3],臨床上并無(wú)完全治愈IBD 的有效治療手段。因此,進(jìn)一步探討IBD 的發(fā)病機(jī)制,尋找新的防治策略和干預(yù)靶點(diǎn)是目前亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題。

    胰高血糖素樣肽-1 受體激動(dòng)劑(glucagon-like peptide-1 receptor agonist,GLP-1RA)是目前治療2 型糖尿病的有效藥物,且經(jīng)FDA 批準(zhǔn)使用的GLP-1RA 主要有利拉魯肽、艾塞那肽等[4]。研究[5]表明利拉魯肽不僅具有血糖調(diào)節(jié)作用,還具有抗炎等特性,但關(guān)于利拉魯肽參與腸道炎癥的抗炎作用研究甚少。

    隨著對(duì)IBD 的作用機(jī)制的深入研究,人們逐漸聚焦到了一類新的免疫細(xì)胞——固有淋巴細(xì)胞(innate lymphoid cell,ILC)。ILC 是一類與T 淋巴細(xì)胞表型和功能相似的天然免疫細(xì)胞[6]。ILC 家族主要分為3 個(gè)亞群,分別是 1 型ILC(group 1 ILC,ILC1)和自然殺傷細(xì)胞(natural killer cell,NK) 細(xì) 胞、2 型ILC(group 2 ILC,ILC2)、淋巴組織誘導(dǎo)細(xì)胞和3 型ILC(group 3 ILC,ILC3)[7-8]。ILC 可分泌細(xì)胞因子,主要通過(guò)與間質(zhì)細(xì)胞以及其他免疫細(xì)胞之間的相互作用在IBD 等多種自身免疫性疾病中發(fā)揮效應(yīng)[9]。研究[10-11]顯示ILC 參與腸道黏膜穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié),并在IBD 的發(fā)生和發(fā)展中起著重要的作用。

    葡聚糖硫酸鈉鹽(dextran sulfate sodium,DSS)誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型所致臨床和病理特征與人類IBD 相似,因此是研究IBD 常用的動(dòng)物疾病模型[12-13]。本研究通過(guò)對(duì)C57BL/6 小鼠進(jìn)行DSS 誘導(dǎo)構(gòu)建小鼠IBD 模型,應(yīng)用利拉魯肽進(jìn)行治療,從小鼠的糞便性狀、結(jié)腸外觀和病理改變、免疫細(xì)胞數(shù)量以及炎性細(xì)胞因子的表達(dá)等方面評(píng)估利拉魯肽對(duì)DSS 誘導(dǎo)IBD 小鼠的作用,以期為輔助治療IBD 提供新的理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

    1 對(duì)象與方法

    1.1 研究對(duì)象

    1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 6 ~10 周齡C57BL/6 野生型雌性小鼠,體質(zhì)量16 ~22 g,購(gòu)于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(滬)2017-0005。所有小鼠均飼養(yǎng)在中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究所SPF 級(jí)動(dòng)物房,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)為(滬)SYXK2019-0001。飼養(yǎng)條件如下:動(dòng)物房室內(nèi)溫度18 ~22 ℃,相對(duì)濕度50%~60%,分籠飼養(yǎng),自由攝食飲水,適應(yīng)環(huán)境后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均得到中國(guó)科學(xué)院上海生命科學(xué)研究所醫(yī)學(xué)研究倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

    1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器 GalliosTM流式細(xì)胞儀(美國(guó)貝克曼公司),ECLIPSE 80i 顯微鏡(日本尼康公司),ZHWY-100H經(jīng)典型多振幅軌道搖床(中國(guó)智城分析儀器制造有限公司),Eppendorf AG 22331 Hamburg 低速離心機(jī)(德國(guó)艾本德公司)。

    1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑 FITC 標(biāo)記的CD3e 抗體、CD11b 抗體、CD11c 抗體、B220 抗體、粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GMCSF)抗體,PE 標(biāo)記的白介素-5 (interleukin-5,IL-5)抗體,APC 標(biāo)記的視黃酸相關(guān)的孤兒受體γt (retinoid-related orphan receptor γt,RORγt) 抗 體,PerCP-Cy5.5 標(biāo) 記 的CD11b 抗體、IL-17A 抗體,PE-Cy7 標(biāo)記的IL-13 抗體、CD3e 抗體、CD11b 抗體(美國(guó)eBioscience 公司);PE 標(biāo)記的Siglec-F(sialic acid-binding immunoglobulin-like lectin F)抗體,APC 標(biāo)記的GATA3(GATA binding protein 3)抗 體、Ly6G(lymphocyte antigen 6 complex locus protein G6D)抗體(美國(guó)BD Biosciences 公司);PE 標(biāo)記的IL-22抗體,PE-Cy7 標(biāo)記的CD11c 抗體,CD16/32 抗體(美國(guó)Biolegend 公司);PE-Cy7 標(biāo)記的B220 抗體(美國(guó)Thermo Fisher Scientific 公 司 )。PMA(phorbol-12-myristate-13-acetate)(美國(guó)Sigma 公司,貨號(hào)H9268-10G),離子霉素(美國(guó)Sigma 公司,貨號(hào)10004974-1),布雷菲德菌素A(美國(guó)Sigma 公司,貨號(hào)11861-5),LIVE/DEAD?固定式死細(xì)胞染色試劑盒(美國(guó)Invitrogen 公司,貨號(hào)L34955),F(xiàn)oxp3/轉(zhuǎn)錄因子染色緩沖液(美國(guó)Thermo Fisher Scientific公司,貨號(hào)00-5523-00),蘇木精- 伊紅(hematoxylineosin,H-E)染色試劑盒(中國(guó)碧云天公司,貨號(hào)C0105),DSS(美國(guó)MP Biomedicals 公司,貨號(hào)160110),利拉魯肽諾和力注射液(丹麥諾和諾德公司,規(guī)格18 mg/3 mL),二硫蘇糖醇(美國(guó)Promega 公司,貨號(hào)V3155),乙二胺四乙酸(美國(guó)Invitrogen 公司,貨號(hào)25200-072),胎牛血清(美國(guó)GEMINI 公司,貨號(hào)900-108),脫氧核糖核酸酶Ⅰ(美國(guó)Sigma 公司,貨號(hào)DN25-1G),膠原酶Ⅷ(美國(guó)Sigma 公司,貨號(hào)C2139-500M),RPMI 1640 培養(yǎng)基(美國(guó)Invitrogen 公司,貨號(hào)22409015),Percoll 細(xì)胞分離液(德國(guó)Amersham/GE 公司,貨號(hào)17089102)。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 動(dòng)物分組及模型構(gòu)建 適應(yīng)性喂養(yǎng)7 d 后,隨機(jī)選取20 只小鼠分為4 組,每組5 只,分別為對(duì)照組、利拉魯肽組、模型組和治療組。對(duì)照組小鼠每日飲用無(wú)菌水,并腹腔注射磷酸鹽緩沖液(phosphate buffer saline,PBS);利拉魯肽組小鼠每日飲用無(wú)菌水,并腹腔注射利拉魯肽;模型組小鼠每日飲用DSS 濃度為3%的無(wú)菌水溶液,并腹腔注射PBS;治療組小鼠每日飲用DSS 濃度為3%的無(wú)菌水溶液,并腹腔注射利拉魯肽。注射液現(xiàn)用現(xiàn)配,PBS 劑量0.6 mg/ (kg·d),利拉魯肽劑量0.6 mg/ (kg·d),共處理7 d。每日觀察并記錄小鼠體質(zhì)量、糞便形態(tài)以及有無(wú)便血等情況,判斷結(jié)腸炎嚴(yán)重程度。

    1.2.2 小鼠腸道固有層細(xì)胞的提取 無(wú)菌環(huán)境下取小鼠結(jié)腸,PBS 洗滌后,室溫下在含有1 mmol/L 二硫蘇糖醇的PBS 中振搖10 min,經(jīng)PBS 洗滌,在含有30 mmol/L 乙二胺四乙酸的PBS 中于37 ℃振蕩孵育10 min,重復(fù) 2 次。加入含有1% 胎牛血清、脫氧核糖核酸酶Ⅰ和膠原酶Ⅷ的RPMI 1640 培養(yǎng)液,在37 ℃、5% CO2的培養(yǎng)箱消化1.5 h 后,劇烈搖動(dòng)組織勻漿,使其通過(guò)100 μm 細(xì)胞過(guò)濾器,室溫以1 048×g 離心20 min 后,從80%和40% Percoll 梯度液的中間層收獲腸道固有層細(xì)胞。

    1.2.3 流式細(xì)胞術(shù)分析 腸道固有層譜系(lineage,Lin)標(biāo)志物包括CD3e、B220、CD11b 和CD11c。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠結(jié)腸內(nèi)的中性粒細(xì)胞(CD11b+Ly6G+)、嗜酸 性 粒 細(xì) 胞(CD11b+Siglec-F+)、ILC2(Lin-GATA3+)和ILC3(Lin-RORγt+),以評(píng)估腸炎的嚴(yán)重程度。將分離出的腸道固有層細(xì)胞,用50 ng/mL PMA 和500 ng/mL 離子霉素刺激4 h,在收獲細(xì)胞前2 h 添加2 μg/mL 布雷菲德菌素A。收集細(xì)胞,使用CD16/32 抗體室溫孵育5 min,然后稀釋CD3e 抗體、B220 抗體、CD11b 抗體、CD11c抗體、Siglec-F 抗體和Ly6G 抗體,4 ℃孵育30 min 進(jìn)行細(xì)胞表面蛋白的染色。經(jīng)PBS 洗滌后,根據(jù)說(shuō)明書(shū)使用Foxp3/轉(zhuǎn)錄因子染色緩沖液將細(xì)胞進(jìn)行固定透化,胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子(GATA3、 RORγt)、細(xì)胞因子(IL-5、 IL-13、IL-17、IL-22 和GM-CSF) 于4 ℃孵 育45 min,PBS 洗滌重懸后經(jīng)GalliosTM流式細(xì)胞儀檢測(cè)分析,數(shù)據(jù)經(jīng)Flow JoV10 軟件分析。

    1.2.4 組織學(xué)分析 取小鼠肛門(mén)以上1 cm 處的結(jié)腸組織,長(zhǎng)約0.5 cm,PBS 洗滌后用4%多聚甲醛固定24 h,將組織包埋在石蠟中,制備5 μm 厚度的組織切片,進(jìn)行H-E 染色。使用光學(xué)顯微鏡隨機(jī)選取3 個(gè)視野,觀察結(jié)腸的病理改變。根據(jù)黏膜層炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度(1 ~3 分)、肌層炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度(0 ~2 分)、杯狀細(xì)胞缺失情況(0 ~2 分)、黏膜糜爛至潰瘍程度(0 ~2 分)等4 個(gè)方面,采用盲法進(jìn)行組織病理學(xué)分析并評(píng)分,最高得分為 9 分[14]。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用GraphPad Prism 6.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,定量資料用±s 表示,組間比較采用非配對(duì)Student's t 檢驗(yàn)。P<0.05 時(shí)認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 利拉魯肽顯著緩解DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸損傷

    實(shí)驗(yàn)第5 日,模型組小鼠體質(zhì)量較第1 日下降12.23%,第6 ~7 日體質(zhì)量繼續(xù)下降。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中觀察到小鼠有稀便甚至血便現(xiàn)象,視為建模成功。模型組小鼠腸道內(nèi)血便情況較為嚴(yán)重,而治療組血便情況相對(duì)較輕。實(shí)驗(yàn)第5 日,與對(duì)照組相比,模型組小鼠體質(zhì)量明顯降低(P=0.014);處理7 d 后,與模型組相比,治療組小鼠體質(zhì)量下降明顯緩解(P=0.043)(圖1A)。小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度比較結(jié)果顯示,模型組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度明顯短于對(duì)照組(P=0.008);而治療組與模型組相比,結(jié)腸縮短情況明顯緩解(P=0.007)(圖1B、C)。

    圖1 利拉魯肽顯著緩解DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸損傷Fig 1 Liraglutide significantly alleviated colon injury induced by DSS in IBD mice

    2.2 利拉魯肽顯著緩解DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸黏膜屏障損傷

    H-E 染色結(jié)果顯示,模型組小鼠黏膜上皮細(xì)胞大量壞死脫落,杯狀細(xì)胞缺失,黏膜下層存在淋巴細(xì)胞重度浸潤(rùn),幾乎沒(méi)有完整的黏膜結(jié)構(gòu)(圖2A)。而經(jīng)過(guò)利拉魯肽處理后,組織學(xué)損傷得到了明顯改善,結(jié)腸組織結(jié)構(gòu)、固有層腸腺、黏膜肌層相對(duì)完整,黏膜下層輕中度淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。組織病理學(xué)評(píng)分顯示,與對(duì)照組相比,模型組小鼠評(píng)分明顯升高(P=0.008);而經(jīng)過(guò)利拉魯肽處理后,評(píng)分明顯降低(P=0.008)(圖2B)。

    圖2 利拉魯肽顯著緩解DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸黏膜屏障損傷Fig 2 Liraglutide significantly alleviated the colonic mucosal barrier injury induced by DSS in IBD mice

    2.3 利拉魯肽改善DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)

    應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠結(jié)腸內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞和中性粒細(xì)胞比例,以評(píng)估腸炎的嚴(yán)重程度,其分選策略如圖3A所示。結(jié)果(圖3B ~E)顯示模型組小鼠結(jié)腸內(nèi)嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞比例明顯高于對(duì)照組(均P=0.001),經(jīng)過(guò)利拉魯肽處理后,中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞比例較模型組顯著降低(P=0.004,P=0.002),說(shuō)明利拉魯肽能夠改善DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸內(nèi)炎癥細(xì)胞的浸潤(rùn)。

    圖3 利拉魯肽改善DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)Fig 3 Liraglutide improved the colonic inflammatory cell infiltration induced by DSS in IBD mice

    2.4 利拉魯肽影響DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠腸道ILC 的變化

    應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠結(jié)腸ILC2、ILC3 及其分泌的細(xì)胞因子(分選策略如圖4A、B 所示),評(píng)估利拉魯肽處理前后ILC2、ILC3 數(shù)量和功能的變化。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,模型組小鼠結(jié)腸內(nèi)ILC2 占總ILC 的比例升高(P=0.032),而經(jīng)過(guò)利拉魯肽處理后ILC2 比例較模型組降低(P=0.032),提示利拉魯肽可抑制結(jié)腸內(nèi)ILC2 的數(shù)量(圖4C);但通過(guò)比較模型組與治療組之間ILC2 分泌的主要細(xì)胞因子IL-5、IL-13、IL-17 的水平,未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(結(jié)果未顯示)。與模型組相比,治療組ILC3 的比例明顯增加(P=0.008)(圖4D),其IL-22 的分泌水平亦明顯升高(P=0.008)(圖4E),但2 組間其他細(xì)胞因子IL-17、GM-CSF 分泌水平的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(結(jié)果未顯示)。

    圖4 利拉魯肽影響DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠腸道ILC 的變化Fig 4 Liraglutide affected the intestinal ILC of IBD mice induced by DSS

    3 討論

    本研究通過(guò)分析小鼠的體質(zhì)量變化、結(jié)腸長(zhǎng)度以及結(jié)腸的病理學(xué)改變、免疫細(xì)胞數(shù)量,明確利拉魯肽可延緩DSS 誘導(dǎo)的小鼠IBD 的發(fā)生發(fā)展。對(duì)結(jié)腸內(nèi)ILC 及其分泌的細(xì)胞因子分析后發(fā)現(xiàn),經(jīng)利拉魯肽處理后,DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠結(jié)腸內(nèi)ILC2 比例明顯降低,ILC3 比例明顯升高,且ILC3 分泌的細(xì)胞因子IL-22 的水平顯著增加。

    ILC3 主要存在于腸黏膜組織中,表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子RORγt, 主要分泌IL-22、IL-17 和GM-CSF 等細(xì)胞因子,在黏膜穩(wěn)態(tài)和炎癥反應(yīng)中起重要作用[15]。IL-22 信號(hào)會(huì)誘導(dǎo)黏蛋白產(chǎn)生,還可通過(guò)促進(jìn)上皮細(xì)胞的增殖和存活來(lái)促進(jìn)組織修復(fù)。此外,IL-22 還能促進(jìn)核苷酸寡聚結(jié)構(gòu)域蛋白2(nucleotide oligomerization domain-containing protein 2,NOD2)產(chǎn)生,而NOD2 信號(hào)的激活也可促進(jìn)黏蛋白分泌,保護(hù)腸上皮細(xì)胞免受細(xì)菌侵襲。ILC3 產(chǎn)生的IL-22 可與腸上皮細(xì)胞表達(dá)的受體結(jié)合,通過(guò)激活蛋白酪氨酸激酶-信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與轉(zhuǎn)錄激活子(just another kinase-signal transducer and activator of transcription,JAK-STAT)信號(hào)通路,促進(jìn)上皮細(xì)胞增殖,從而使上皮屏障保持完整性[16]。同時(shí),IL-22 可以誘導(dǎo)產(chǎn)生抗微生物因子Reg( regenerating) - Ⅲβ 和Reg- Ⅲγ,限制共生菌與上皮細(xì)胞接觸,避免腸道炎癥產(chǎn)生[17]。在本研究中,利拉魯肽作用后,腸固有層ILC3 比例及IL-22 的分泌明顯增加,說(shuō)明IL-22 可能通過(guò)以上方式在腸道黏膜免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。

    ILC2 主要分布在腸道、肺部、淋巴組織、肝臟和腸系膜中[18],主要分泌Ⅱ型細(xì)胞因子如IL-4、IL-5 和IL-13等。GATA3 是ILC2 的主要轉(zhuǎn)錄因子[19],是ILC2 發(fā)育、存活和功能發(fā)揮的關(guān)鍵調(diào)控因子[20]。在唑酮誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎模型中,ILC2 由于受到IL-25 的刺激,可加速促進(jìn)腸道炎癥[21]。在新確診的IBD 患者中,疾病早期病變處腸黏膜內(nèi)ILC2 比例明顯增加[22],提示ILC2 可能在IBD中發(fā)揮促進(jìn)炎癥的作用。另有研究[23]發(fā)現(xiàn)GLP-1RA 可作用于自身免疫性疾病,如抑制IL-33 的釋放以及過(guò)敏氣道炎癥,推測(cè)GLP-1RA 可能是治療ILC2 介導(dǎo)的過(guò)敏性哮喘的一種新手段。結(jié)合本研究結(jié)果,GLP-1RA 利拉魯肽可能通過(guò)抑制腸道ILC2 從而改善DSS 誘導(dǎo)的小鼠IBD,但其具體機(jī)制尚需進(jìn)一步研究。

    近年來(lái)研究[24]發(fā)現(xiàn),ILC 與輔助性T 細(xì)胞類似,具有一定的可塑性。ILC2 在發(fā)育和維持過(guò)程中可能向ILC3 轉(zhuǎn)化,炎性ILC2 可能分化產(chǎn)生IL-17 的ILC3 樣細(xì)胞[25]。在人類CD 患者的腸樣本中發(fā)現(xiàn)ILC2 分泌的IL-13 和γ- 干擾素(interferon-γ,IFN-γ)明顯增加[26],說(shuō)明炎性ILC3 可能轉(zhuǎn)變?yōu)榉置贗FN-γ 的ILC2 樣細(xì)胞。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)中ILC2比例降低伴ILC3 比例升高也提示,存在ILC2 向ILC3 轉(zhuǎn)化的可能性。既往研究表明ILC2 分泌的IL-4 對(duì)于抵抗細(xì)胞外寄生蟲(chóng)感染的保護(hù)性免疫至關(guān)重要[27],同時(shí)也與IBD的嚴(yán)重程度有關(guān)[28]。所以利拉魯肽是否影響ILC2 分泌IL-4,進(jìn)而減緩疾病的進(jìn)程仍需后續(xù)研究進(jìn)一步明確。

    此外,本研究仍具有一定的局限性:首先,DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠模型僅模仿了UC 患者一些典型的組織病理學(xué)特征和某些免疫學(xué)特征,并不能完全代表CD 的復(fù)雜特征;其次,樣本例數(shù)較少。因此,迫切需要開(kāi)發(fā)能夠解決現(xiàn)有局限性且更接近CD 和UC 特征的其他實(shí)驗(yàn)?zāi)P蚚29],并增加研究病例數(shù)以明確實(shí)驗(yàn)結(jié)論。

    綜上,本研究發(fā)現(xiàn)GLP-1RA 利拉魯肽可能作用于腸道ILC,明顯延緩DSS 誘導(dǎo)的IBD 小鼠的疾病發(fā)生與發(fā)展,為利拉魯肽的潛在治療用途提供了理論依據(jù)。

    參·考·文·獻(xiàn)

    [1] Bian XY, Wu WR, Yang LY, et al. Administration of Akkermansia muciniphila ameliorates dextran sulfate sodium-induced ulcerative colitis in mice[J]. Front Microbiol, 2019, 10: 2259.

    [2] Parada Venegas D, De la Fuente MK, Landskron G, et al. Short chain fatty acids (SCFAs)-mediated gut epithelial and immune regulation and its relevance for inflammatory bowel diseases[J]. Front Immunol, 2019, 10: 277.

    [3] Nie Y, Lin QL, Luo FJ. Effects of non-starch polysaccharides on inflammatory bowel disease[J]. Int J Mol Sci, 2017, 18(7): 1372.

    [4] Trujillo JM, Nuffer W, Ellis SL. GLP-1 receptor agonists: a review of head-tohead clinical studies[J]. Ther Adv Endocrinol Metab, 2015, 6(1): 19-28.

    [5] Yaribeygi H, Maleki M, Sathyapalan T, et al. Anti-inflammatory potentials of incretin-based therapies used in the management of diabetes[J]. Life Sci, 2020, 241: 117152.

    [6] Lim AI, Di Santo JP. ILC-poiesis: ensuring tissue ILC differentiation at the right place and time[J]. Eur J Immunol, 2019, 49(1): 11-18.

    [7] Putignani L, Del Chierico F, Vernocchi P, et al. Gut microbiota dysbiosis as risk and premorbid factors of IBD and IBS along the childhood-adulthood transition[J]. Inflamm Bowel Dis, 2016, 22(2): 487-504.

    [8] Lim AI, Verrier T, Vosshenrich CA, et al. Developmental options and functional plasticity of innate lymphoid cells[J]. Curr Opin Immunol, 2017, 44: 61-68.

    [9] Ebbo M, Crinier A, Vély F, et al. Innate lymphoid cells: major players in inflammatory diseases[J]. Nat Rev Immunol, 2017, 17(11): 665-678.

    [10] Marion-Letellier R, Savoye G, Ghosh S. IBD: in food we trust[J]. J Crohns Colitis, 2016, 10(11): 1351-1361.

    [11] Forkel M, Mj?sberg J. Dysregulation of group 3 innate lymphoid cells in the pathogenesis of inflammatory bowel disease[J]. Curr Allergy Asthma Rep, 2016, 16(10): 73.

    [12] Mizoguchi A. Animal models of inflammatory bowel disease[J]. Prog Mol Biol Transl Sci, 2012, 105: 263-320.

    [13] Eichele DD, Kharbanda KK. Dextran sodium sulfate colitis murine model: an indispensable tool for advancing our understanding of inflammatory bowel diseases pathogenesis[J]. World J Gastroenterol, 2017, 23(33): 6016-6029.

    [14] Pavlick KP, Ostanin DV, Furr KL, et al. Role of T-cell-associated lymphocyte function-associated antigen-1 in the pathogenesis of experimental colitis[J]. Int Immunol, 2006, 18(2): 389-398.

    [15] Zeng BN, Shi SN, Ashworth G, et al. ILC3 function as a double-edged sword in inflammatory bowel diseases[J]. Cell Death Dis, 2019, 10(4): 315.

    [16] Guo XH, Qiu J, Tu T, et al. Induction of innate lymphoid cell-derived interleukin-22 by the transcription factor STAT3 mediates protection against intestinal infection[J]. Immunity, 2014, 40(1): 25-39.

    [17] Xu X, Fukui H, Ran Y, et al. The link between type Ⅲ Reg and STAT3-associated cytokines in inflamed colonic tissues[J]. Mediators Inflamm, 2019, 2019: 7859460.

    [18] Peters CP, Mj?sberg JM, Bernink JH, et al. Innate lymphoid cells in inflammatory bowel diseases[J]. Immunol Lett, 2016, 172: 124-131.

    [19] Halim TY, MacLaren A, Romanish MT, et al. Retinoic-acid-receptor-related orphan nuclear receptor α is required for natural helper cell development and allergic inflammation[J]. Immunity, 2012, 37(3): 463-474.

    [20] Hoyler T, Klose CS, Souabni A, et al. The transcription factor GATA-3 controls cell fate and maintenance of type 2 innate lymphoid cells[J]. Immunity, 2012, 37(4): 634-648.

    [21] Camelo A, Barlow JL, Drynan LF, et al. Blocking IL-25 signalling protects against gut inflammation in a type-2 model of colitis by suppressing nuocyte and NKT derived IL-13[J]. J Gastroenterol, 2012, 47(11): 1198-1211.

    [22] Forkel M, van Tol S, H??g C, et al. Distinct alterations in the composition of mucosal innate lymphoid cells in newly diagnosed and established Crohn's disease and ulcerative colitis[J]. J Crohns Colitis, 2019, 13(1): 67-78.

    [23] Toki S, Goleniewska K, Reiss S, et al. Glucagon-like peptide 1 signaling inhibits allergen-induced lung IL-33 release and reduces group 2 innate lymphoid cell cytokine production in vivo[J]. J Allergy Clin Immunol, 2018, 142(5): 1515-1528. e8.

    [24] Colonna M. Innate lymphoid cells: diversity, plasticity, and unique functions in immunity[J]. Immunity, 2018, 48(6): 1104-1117.

    [25] Krabbendam L, Bal SM, Spits H, et al. New insights into the function, development, and plasticity of type 2 innate lymphoid cells[J]. Immunol Rev, 2018, 286(1): 74-85.

    [26] Lim AI, Menegatti S, Bustamante J, et al. IL-12 drives functional plasticity of human group 2 innate lymphoid cells[J]. J Exp Med, 2016, 213(4): 569-583.

    [27] Panda SK, Colonna M. Innate lymphoid cells in mucosal immunity[J]. Front Immunol, 2019, 10: 861.

    [28] Fuss IJ, Heller F, Boirivant M, et al. Nonclassical CD1d-restricted NK T cells that produce IL-13 characterize an atypical Th2 response in ulcerative colitis[J]. J Clin Invest, 2004, 113(10): 1490-1497.

    [29] Bamias G, Arseneau KO, Cominelli F. Mouse models of inflammatory bowel disease for investigating mucosal immunity in the intestine[J]. Curr Opin Gastroenterol, 2017, 33(6): 411-416.

    猜你喜歡
    利拉魯貨號(hào)結(jié)腸
    利拉魯肽聯(lián)合二甲雙胍治療2型糖尿病的療效及對(duì)血糖水平的影響
    微小RNA在先天性巨結(jié)腸中的研究進(jìn)展
    鞋品牌新品爆單“故事匯”
    提壺揭蓋法論治熱結(jié)腸腑所致咳嗽
    作者更正致歉說(shuō)明
    黃葵膠囊聯(lián)合利拉魯肽對(duì)早期糖尿病腎病患者的臨床療效
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:00
    利拉魯肽治療肥胖型2型糖尿病療效觀察
    利拉魯肽聯(lián)合二甲雙胍治療肥胖2型糖尿病17例臨床療效觀察
    經(jīng)肛門(mén)結(jié)腸拖出術(shù)治療先天性巨結(jié)腸護(hù)理體會(huì)
    “瀉劑結(jié)腸”的研究進(jìn)展
    成年美女黄网站色视频大全免费| 日韩视频在线欧美| 一本久久精品| 成人亚洲欧美一区二区av| 一边摸一边做爽爽视频免费| 黑人猛操日本美女一级片| 丝袜人妻中文字幕| 亚洲性久久影院| 久久人人97超碰香蕉20202| 91精品伊人久久大香线蕉| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲人成77777在线视频| 伊人久久国产一区二区| 成人无遮挡网站| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 免费人成在线观看视频色| 99热6这里只有精品| www日本在线高清视频| 日韩一区二区三区影片| 18禁动态无遮挡网站| 新久久久久国产一级毛片| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 日韩电影二区| 蜜桃在线观看..| 久久av网站| 国产成人精品福利久久| 香蕉丝袜av| 成人毛片a级毛片在线播放| 丝袜人妻中文字幕| 最黄视频免费看| 日日撸夜夜添| 一边亲一边摸免费视频| 人人澡人人妻人| 好男人视频免费观看在线| 在线免费观看不下载黄p国产| 日本91视频免费播放| 久久久久久久久久久免费av| 观看av在线不卡| 日本av手机在线免费观看| 欧美3d第一页| 国产伦理片在线播放av一区| 丝袜人妻中文字幕| www.熟女人妻精品国产 | 99香蕉大伊视频| 色视频在线一区二区三区| 韩国高清视频一区二区三区| 亚洲精品一二三| 亚洲av中文av极速乱| 激情五月婷婷亚洲| 最近2019中文字幕mv第一页| 国产xxxxx性猛交| 成年美女黄网站色视频大全免费| 日韩三级伦理在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 丰满乱子伦码专区| 国产成人aa在线观看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 男女免费视频国产| 亚洲国产欧美在线一区| 大香蕉97超碰在线| 一个人免费看片子| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日韩精品有码人妻一区| 高清不卡的av网站| 香蕉精品网在线| 不卡视频在线观看欧美| 哪个播放器可以免费观看大片| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲在久久综合| 日本av免费视频播放| 色视频在线一区二区三区| 亚洲精品456在线播放app| 十八禁网站网址无遮挡| 国产精品无大码| 黄色怎么调成土黄色| 国产成人欧美| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 69精品国产乱码久久久| 久久青草综合色| 欧美 日韩 精品 国产| 欧美日本中文国产一区发布| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 免费人妻精品一区二区三区视频| 国产视频首页在线观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 男女边摸边吃奶| 中文字幕最新亚洲高清| 热re99久久精品国产66热6| 不卡视频在线观看欧美| 欧美人与性动交α欧美精品济南到 | 亚洲精品国产色婷婷电影| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲欧美成人精品一区二区| 久久99蜜桃精品久久| 视频中文字幕在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| av有码第一页| 亚洲国产av影院在线观看| 最后的刺客免费高清国语| 免费黄频网站在线观看国产| 永久网站在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产 精品1| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 日本色播在线视频| 中文字幕av电影在线播放| 亚洲美女搞黄在线观看| 人体艺术视频欧美日本| 日韩三级伦理在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 水蜜桃什么品种好| 宅男免费午夜| 国产熟女午夜一区二区三区| 久久韩国三级中文字幕| 国产亚洲精品第一综合不卡 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 高清av免费在线| 日韩一区二区三区影片| 捣出白浆h1v1| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲四区av| 少妇的逼水好多| 免费人妻精品一区二区三区视频| 视频中文字幕在线观看| 熟妇人妻不卡中文字幕| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久av网站| 成人国产麻豆网| 午夜福利影视在线免费观看| 日本欧美视频一区| 视频在线观看一区二区三区| 黄色怎么调成土黄色| 老熟女久久久| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产视频首页在线观看| 亚洲国产成人一精品久久久| 成人亚洲欧美一区二区av| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 午夜激情av网站| 亚洲性久久影院| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 精品视频人人做人人爽| 超色免费av| 一二三四中文在线观看免费高清| av黄色大香蕉| 久久久久久久久久久久大奶| 国产精品女同一区二区软件| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 全区人妻精品视频| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 久久精品久久久久久久性| 亚洲经典国产精华液单| 精品久久蜜臀av无| 久久久久国产精品人妻一区二区| 国产男人的电影天堂91| 日日摸夜夜添夜夜爱| 高清在线视频一区二区三区| 亚洲av日韩在线播放| 欧美精品av麻豆av| 亚洲精品456在线播放app| 插逼视频在线观看| 国产片内射在线| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 全区人妻精品视频| 欧美国产精品一级二级三级| 啦啦啦啦在线视频资源| 五月开心婷婷网| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲,欧美,日韩| 少妇人妻 视频| 女性被躁到高潮视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 成人黄色视频免费在线看| 99九九在线精品视频| 秋霞伦理黄片| 看非洲黑人一级黄片| 久久国内精品自在自线图片| 久热这里只有精品99| 黄片无遮挡物在线观看| 国产在视频线精品| 日韩成人伦理影院| 日韩精品有码人妻一区| 久久久久网色| 午夜福利,免费看| 少妇人妻久久综合中文| 国产精品久久久久久精品电影小说| 亚洲在久久综合| 日韩三级伦理在线观看| 丰满饥渴人妻一区二区三| 亚洲经典国产精华液单| 2018国产大陆天天弄谢| 亚洲成人一二三区av| 在线天堂最新版资源| 国产亚洲最大av| 久久人人97超碰香蕉20202| 男的添女的下面高潮视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产又爽黄色视频| 69精品国产乱码久久久| av不卡在线播放| 欧美激情国产日韩精品一区| 女人精品久久久久毛片| 一级黄片播放器| 性高湖久久久久久久久免费观看| 欧美精品国产亚洲| 婷婷色av中文字幕| 高清黄色对白视频在线免费看| 免费大片18禁| 在线观看一区二区三区激情| 国产一区二区三区av在线| 高清欧美精品videossex| 国产成人一区二区在线| 日韩中文字幕视频在线看片| 丰满饥渴人妻一区二区三| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 欧美性感艳星| 免费黄频网站在线观看国产| 亚洲熟女精品中文字幕| 欧美人与性动交α欧美软件 | 91精品伊人久久大香线蕉| 成人午夜精彩视频在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 人妻少妇偷人精品九色| 国产免费现黄频在线看| 国产片内射在线| 91成人精品电影| 日本av免费视频播放| www日本在线高清视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看 | 亚洲国产精品一区三区| 国产高清三级在线| 91国产中文字幕| 老司机影院成人| 免费看光身美女| 久久久国产一区二区| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 性色avwww在线观看| 国产精品国产av在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 国产女主播在线喷水免费视频网站| 91在线精品国自产拍蜜月| 成年女人在线观看亚洲视频| 最新中文字幕久久久久| 国产精品一区www在线观看| av有码第一页| 制服人妻中文乱码| 97在线人人人人妻| 国产 一区精品| 国产精品99久久99久久久不卡 | 九草在线视频观看| 国产亚洲最大av| 国产一区有黄有色的免费视频| 最黄视频免费看| 97精品久久久久久久久久精品| 一级黄片播放器| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| av国产精品久久久久影院| av视频免费观看在线观看| 日日撸夜夜添| 欧美亚洲日本最大视频资源| av网站免费在线观看视频| 成人无遮挡网站| 捣出白浆h1v1| 激情五月婷婷亚洲| 一级爰片在线观看| 久久精品国产自在天天线| 欧美xxxx性猛交bbbb| av.在线天堂| 久久韩国三级中文字幕| 免费在线观看完整版高清| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 成年av动漫网址| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 亚洲四区av| 亚洲人成77777在线视频| 日韩成人av中文字幕在线观看| h视频一区二区三区| 国产麻豆69| 国产成人欧美| 免费高清在线观看视频在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 九草在线视频观看| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 夜夜爽夜夜爽视频| 日本vs欧美在线观看视频| 国产精品久久久久久久久免| 一级,二级,三级黄色视频| 日本欧美国产在线视频| 久久久国产精品麻豆| 欧美性感艳星| 午夜视频国产福利| 又粗又硬又长又爽又黄的视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产极品粉嫩免费观看在线| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久久久久久久久久久大奶| 日本欧美国产在线视频| 色网站视频免费| 久久国产亚洲av麻豆专区| 亚洲久久久国产精品| 精品久久国产蜜桃| 亚洲国产毛片av蜜桃av| av片东京热男人的天堂| 纯流量卡能插随身wifi吗| 一区二区三区精品91| 日韩 亚洲 欧美在线| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 亚洲高清免费不卡视频| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 久久久久久久久久人人人人人人| 人人澡人人妻人| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 色哟哟·www| 国产xxxxx性猛交| 中国三级夫妇交换| av线在线观看网站| 国产熟女午夜一区二区三区| 在线观看www视频免费| freevideosex欧美| a级毛片黄视频| 制服丝袜香蕉在线| 亚洲国产最新在线播放| 看十八女毛片水多多多| 免费观看无遮挡的男女| 在线精品无人区一区二区三| www.熟女人妻精品国产 | 精品少妇久久久久久888优播| 热99久久久久精品小说推荐| 一边亲一边摸免费视频| 国产又爽黄色视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 午夜福利视频在线观看免费| 国产成人免费观看mmmm| 久久精品国产a三级三级三级| 欧美bdsm另类| 国产精品蜜桃在线观看| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲av综合色区一区| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 熟女人妻精品中文字幕| 伊人亚洲综合成人网| 亚洲国产精品成人久久小说| 大话2 男鬼变身卡| 热99国产精品久久久久久7| 全区人妻精品视频| 春色校园在线视频观看| 99国产综合亚洲精品| 丝袜美足系列| 免费高清在线观看日韩| 美女福利国产在线| 国产在线免费精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 99re6热这里在线精品视频| 欧美精品av麻豆av| av视频免费观看在线观看| 夫妻午夜视频| h视频一区二区三区| 免费久久久久久久精品成人欧美视频 | 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 精品第一国产精品| 久久亚洲国产成人精品v| 亚洲欧洲日产国产| 久热这里只有精品99| 欧美另类一区| 国产午夜精品一二区理论片| 久久ye,这里只有精品| 日韩在线高清观看一区二区三区| 在线观看国产h片| 欧美变态另类bdsm刘玥| av一本久久久久| 午夜免费男女啪啪视频观看| 久久久精品94久久精品| 免费看不卡的av| 男女国产视频网站| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美精品国产亚洲| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 日韩精品免费视频一区二区三区 | 国产在线一区二区三区精| 又大又黄又爽视频免费| 伊人久久国产一区二区| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 91成人精品电影| 精品久久蜜臀av无| h视频一区二区三区| 男女国产视频网站| 色5月婷婷丁香| 视频中文字幕在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 久久韩国三级中文字幕| 久久女婷五月综合色啪小说| 日韩欧美精品免费久久| av.在线天堂| 国产片特级美女逼逼视频| 午夜福利网站1000一区二区三区| 亚洲四区av| 国产成人精品久久久久久| 色婷婷久久久亚洲欧美| 精品福利永久在线观看| 国产精品一区www在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 啦啦啦啦在线视频资源| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲伊人色综图| 我的女老师完整版在线观看| 亚洲第一av免费看| 激情五月婷婷亚洲| 99国产精品免费福利视频| 亚洲精品av麻豆狂野| 老司机影院毛片| 99久久精品国产国产毛片| 天天操日日干夜夜撸| 一级黄片播放器| 欧美日韩视频精品一区| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 十分钟在线观看高清视频www| 国产xxxxx性猛交| 激情五月婷婷亚洲| 亚洲精品美女久久久久99蜜臀 | 亚洲欧美精品自产自拍| 欧美日韩av久久| 蜜臀久久99精品久久宅男| 亚洲精品456在线播放app| 少妇人妻 视频| 国产高清三级在线| 欧美另类一区| 国产探花极品一区二区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 九九在线视频观看精品| 在线 av 中文字幕| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 国产成人欧美| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲国产看品久久| 欧美性感艳星| 久久久久久久久久久免费av| 国产精品久久久久成人av| 久久久亚洲精品成人影院| 另类精品久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品亚洲成国产av| 免费av中文字幕在线| 久久久精品区二区三区| 看非洲黑人一级黄片| 精品亚洲成a人片在线观看| 亚洲国产欧美在线一区| 97在线人人人人妻| 一级片'在线观看视频| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲成人手机| 亚洲精品aⅴ在线观看| 久久99热6这里只有精品| 精品国产乱码久久久久久小说| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 九色成人免费人妻av| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲成人手机| 久久久久久久久久久久大奶| 如何舔出高潮| av又黄又爽大尺度在线免费看| 国产又色又爽无遮挡免| 国精品久久久久久国模美| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 国产日韩欧美视频二区| 国产麻豆69| 美女中出高潮动态图| 亚洲情色 制服丝袜| 夫妻性生交免费视频一级片| 九色亚洲精品在线播放| 最黄视频免费看| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产高清国产精品国产三级| 亚洲av电影在线进入| a 毛片基地| 国产熟女午夜一区二区三区| 亚洲欧美色中文字幕在线| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久精品人人爽人人爽视色| 97人妻天天添夜夜摸| 亚洲天堂av无毛| 伊人久久国产一区二区| 亚洲精品国产色婷婷电影| 女人久久www免费人成看片| www日本在线高清视频| 两性夫妻黄色片 | 久久精品久久久久久噜噜老黄| 在线观看一区二区三区激情| 人人澡人人妻人| 插逼视频在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o| 草草在线视频免费看| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 啦啦啦中文免费视频观看日本| av.在线天堂| 人妻系列 视频| 视频区图区小说| tube8黄色片| 搡老乐熟女国产| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲五月色婷婷综合| 欧美bdsm另类| 少妇精品久久久久久久| 青春草亚洲视频在线观看| 久久久久久久久久久免费av| 国产精品99久久99久久久不卡 | 国产精品偷伦视频观看了| av黄色大香蕉| 久久午夜综合久久蜜桃| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 中文字幕人妻熟女乱码| 男人添女人高潮全过程视频| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产成人精品久久久久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 日韩三级伦理在线观看| 91精品三级在线观看| 日本欧美国产在线视频| 哪个播放器可以免费观看大片| 国产精品久久久av美女十八| 天美传媒精品一区二区| 满18在线观看网站| 亚洲精品国产av蜜桃| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 黄色视频在线播放观看不卡| 又大又黄又爽视频免费| 亚洲人成网站在线观看播放| av卡一久久| 国产黄色免费在线视频| 91成人精品电影| 免费大片18禁| 亚洲av日韩在线播放| 久久久久久久大尺度免费视频| 精品久久蜜臀av无| 看免费成人av毛片| 国产精品99久久99久久久不卡 | 观看av在线不卡| 久久狼人影院| 国产免费视频播放在线视频| 中文天堂在线官网| 99久久人妻综合| 久久影院123| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 黄网站色视频无遮挡免费观看| 国产 一区精品| 天天影视国产精品| 亚洲色图综合在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 久久精品国产亚洲av天美| 男女国产视频网站| 国产有黄有色有爽视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日韩av免费高清视频| 亚洲经典国产精华液单| a级毛色黄片| 黑人高潮一二区| www.av在线官网国产| 午夜激情av网站| 国产成人91sexporn| 国产成人一区二区在线| 久久久久网色| 一区二区av电影网| 亚洲国产精品999| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕 | 中国三级夫妇交换| 亚洲精品美女久久av网站| 国产成人aa在线观看| 国产国语露脸激情在线看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久热在线av| 国产免费一级a男人的天堂| 内地一区二区视频在线| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 欧美日韩亚洲高清精品| 精品一区在线观看国产| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 国产精品蜜桃在线观看| 精品一区在线观看国产| av.在线天堂| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 国产免费福利视频在线观看| 九九爱精品视频在线观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲精品一区蜜桃| 黄片播放在线免费| 久久久久久久久久久久大奶| 丁香六月天网| 亚洲,一卡二卡三卡| 久久免费观看电影| av在线app专区| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲一区二区三区欧美精品| 一级爰片在线观看| 热re99久久国产66热| 国产精品偷伦视频观看了| 久久婷婷青草| 亚洲欧美清纯卡通|