分子生物學(xué)檢驗技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用進展

周晏玲

【關(guān)鍵詞】分子生物學(xué);檢驗技術(shù);醫(yī)學(xué)檢驗

【中圖分類號】R446 【文獻標(biāo)識碼】A 【文章編號】1002-8714（2020）05-0122-01

1 PCR在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用

聚合酶鏈反應(yīng)的英文為polymerase chain reaction，簡寫為PCR，是多聚酶鏈反應(yīng)、無細(xì)胞克隆技術(shù)等，能夠通過酶促進特異DNA或者DNA片段的合成。該技術(shù)主要包括三個步驟，分別為高溫變形2、低溫退火、適溫延伸，通過反復(fù)循環(huán)這三個步驟，利用特異耐熱酶-TaqDNA聚合酶的催化作用實現(xiàn)DNA聚合酶催化反應(yīng)。在1995年美國臨床檢驗標(biāo)準(zhǔn)委員會頒布了感染性疾病分子診斷應(yīng)用準(zhǔn)則，1998年國際臨床化學(xué)學(xué)會頒布了分析擴增在臨床引用中的準(zhǔn)則。其中國際臨床化學(xué)學(xué)會還詳細(xì)論述了PCR操作的各個環(huán)節(jié)步驟，并且得到了權(quán)威性文件的認(rèn)可，可見，在醫(yī)學(xué)檢驗方面，PCR技術(shù)發(fā)揮著重要的價值。當(dāng)前在寄生蟲學(xué)、腫瘤學(xué)、微生物學(xué)、遺傳學(xué)、基因治療、免疫學(xué)、出入境檢驗檢疫、食品檢測等領(lǐng)域都開始廣泛地應(yīng)用PCR技術(shù)。PCR技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)學(xué)檢驗工作中能夠?qū)悠窓z測的可靠性和準(zhǔn)確性顯著提升，同時在節(jié)省人力資源、物力和財力方面也都發(fā)揮著重要作用，該技術(shù)無論是經(jīng)濟效益還是社會效益都具有良好的體現(xiàn)。石偉先等在研究甲型流感病毒檢測中采用了實時熒光PCR法、膠體金快速檢測法和病毒分離培養(yǎng)法，對幾種檢測技術(shù)的靈敏度、特異度等進行了比較分析，得出結(jié)果認(rèn)為，實時熒光PCR法具有明顯優(yōu)勢，適合臨床確診中應(yīng)用。Skladal等在監(jiān)測血清中的丙型肝炎病毒（HCV） DNA結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄及PCR擴增過程時采用寡核苷酸探針修飾的電壓傳感器方式，僅僅用了10min就完成了整個過程的監(jiān)測。該技術(shù)能夠研究基因分離、克隆和核算序列還能夠?qū)Υ嬖贒NA、RNA的部位以及疾病診斷。

2 分子生物遺傳器在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用

分子生物傳感器是結(jié)合傳感技術(shù)和分子生物診斷技術(shù)的一種方法。在小分子有機物、核算、體液內(nèi)微量蛋白等各類物質(zhì)檢測中可以采用分子生物傳感器技術(shù)。如有的學(xué)者抽出受檢者體液作為標(biāo)本，研究標(biāo)本的微量蛋白或小分子有機物，通過利用分子生物傳感器接觸這些標(biāo)本能夠確定其存在的特異性，得出的結(jié)果在臨床診斷和評估病情方面發(fā)揮著重要價值。Waswa 等在2007年對食物中大腸埃希菌O157：H7進行了檢測，采用的SPR生物傳感器的靈敏度在102 ～ 103 CFU/ ml之間。斯城燕等在2011年快速檢測大腸桿菌O157：H 7中采用的是表面等離子共振原理的生物傳感器方法，僅需5-7分鐘即可完成一個樣品的檢測。該方法的檢測限為 3 ×10 5 CFU. ml-1。SPR生物傳感器有著良好的穩(wěn)定性，節(jié)省了檢測時間，操作十分便捷，同時能夠?qū)Φ退降募?xì)菌、病毒等生物分子進行檢測。

3 分子生物芯片技術(shù)的應(yīng)用

傳統(tǒng)的生物技術(shù)已經(jīng)難以滿足現(xiàn)代醫(yī)學(xué)發(fā)展需要，無論是基因序列數(shù)據(jù)還是蛋白序列的增長速度都非常驚人，生物技術(shù)開始朝著更加準(zhǔn)確、快速、自動化的方向發(fā)展，在市場需求的刺激下，產(chǎn)生了生物芯片。生物芯片計算機芯片不同。從狹義上來講，所謂生物芯片就是微陣列芯片。在分析過程中，是以硅片、玻表面以點陣方式固定的一系列可尋址的識別分子琍、塑料等為分析的基本單位，每一個點陣中的點都可以看做一個探頭。在一定條件下，芯片表面固定的分析會合被檢測物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，通過電化學(xué)法、同位素法、酶標(biāo)法、化學(xué)熒光法等可以顯示出檢測結(jié)果，然后用儀器記錄好結(jié)果，所得到的數(shù)據(jù)結(jié)果經(jīng)過計算機進行分析處理能夠得到最終檢驗結(jié)果。從廣義上來講，生物芯片為固體器件，該器件大小約厘米見方，其有著高效處理分析生物成分的作用。生物芯片技術(shù)是高度交叉各種學(xué)科的新技術(shù)，其涉及到生物學(xué)、化學(xué)、物理學(xué)、電子學(xué)、計算機等技術(shù)。生物芯片技術(shù)經(jīng)過十多年的研究已經(jīng)得到了較為完善的應(yīng)用方法，其有著較高的自動化程度，較為簡便的操作方式，能夠檢測數(shù)量眾多的分子，該技術(shù)奠定了后基因組計劃研究的基礎(chǔ)。

4 分子生物納米技術(shù)在醫(yī)學(xué)檢驗中的應(yīng)用

現(xiàn)如今國內(nèi)外生物技術(shù)領(lǐng)域加大了對分子生物納米技術(shù)的研究力度，該技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)和衛(wèi)生領(lǐng)域能夠發(fā)揮良好的效果。雖然該技術(shù)已經(jīng)可以較為成熟地應(yīng)用于各個生命科學(xué)領(lǐng)域，但是并不表明其檢測結(jié)果萬無一失，所以如何提高檢測準(zhǔn)確度是未來研究的一個方向。分子生物納米技術(shù)涉及到納米動力學(xué)、納米藥物學(xué)、納米材料、納米電子學(xué)等多方面的專業(yè)知識，在未來發(fā)展中有著更大的應(yīng)用價值，這也是分子生物納米技術(shù)的獨特優(yōu)勢。

5 分子蛋白組學(xué)的應(yīng)用

在蛋白組學(xué)研究中，人類基因組合無數(shù)病原體測序發(fā)揮了重要的價值，利用其基因序列編碼框架可以更好地開展蛋白組學(xué)得開發(fā)和研究，加快了蛋白組學(xué)研究的腳步，同時也促進了早期診斷和檢測生物標(biāo)志物的研究。當(dāng)前在疾病病因、早期診斷和治療上仍然存在一些不足之處，分子蛋白組學(xué)和其他方法相比可以更好地實現(xiàn)腫瘤早期檢測、新生物標(biāo)志的發(fā)現(xiàn)，有助于及時、良好地治療疾病。在未來蛋白組學(xué)技術(shù)研究中應(yīng)當(dāng)將敏感度提升，積極應(yīng)用先進的檢測技術(shù)，提高疾病診斷和治療效果。

6 結(jié)語

當(dāng)前醫(yī)學(xué)檢驗領(lǐng)域普遍認(rèn)可了分子生物學(xué)技術(shù)，該技術(shù)的應(yīng)用可以將醫(yī)學(xué)檢驗程序中較差污染問題有效降低，同時有助于將醫(yī)學(xué)檢驗操作整體效率提升，提高檢驗靈敏度和精確度。

參考文獻

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