南寧市4307例婦女宮頸HPV感染狀況及基因型分析

韋淑玉 黃衛(wèi)彤 李筱瑜

南寧市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣西南寧 530011

人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）是一種致病性很強(qiáng)的 DNA 病毒，根據(jù)其致病能力大小可分為高危和低危2個(gè)亞型[1]。研究證實(shí)低危型主要引起皮膚疣等良性病變，而高危型的持續(xù)感染在宮頸癌、宮頸上皮內(nèi)瘤變、宮頸小細(xì)胞神經(jīng)內(nèi)分泌癌等腫瘤的發(fā)展中起到了關(guān)鍵的作用[2-3]。從HPV感染到宮頸癌形成需要10～15年的時(shí)間[4]，因此及時(shí)熟知本地區(qū)HPV分型特征，盡早進(jìn)行HPV感染防治對(duì)降低宮頸癌的發(fā)生率具有重大意義。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)，HPV在不同地理區(qū)域的感染率及型別分布均存在一定差異[5-6]，本研究通過分析南寧市4307例婦女宮頸分泌物HPV的感染率及分型結(jié)果，旨在探討感染的地域差異，為指導(dǎo)疫苗的研制及接種提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)，為降低HPV感染率，指導(dǎo)本市宮頸癌的預(yù)防及早期發(fā)現(xiàn)提供可靠依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

采集2017年1月～2019年9月在本院婦科門診就診并參加分型檢測(cè)的女性患者4307例，年齡16～78歲。合格的受檢者條件：近期未懷孕、未來月經(jīng)且7d內(nèi)未有性生活、未經(jīng)子宮切除術(shù)、48h內(nèi)未服用陰道治療藥物。所收集的數(shù)據(jù)均為合格患者初次進(jìn)行基因分型檢測(cè)的結(jié)果，剔除二次復(fù)查數(shù)據(jù)。

1.2 樣本采集

宮頸分泌物樣本由婦科醫(yī)生使用專用樣本采集器采集，隨后將采集器置于加有專用細(xì)胞保存液的取樣管中蓋緊并作好標(biāo)記，4℃保存，一周內(nèi)檢測(cè)完畢。

1.3 主要試劑及檢測(cè)儀器

深圳亞能生物技術(shù)有限公司試劑盒、黑馬9600擴(kuò)增儀、亞能YN-H16恒溫雜交儀。

1.4 檢測(cè)方法

按照試劑說明書操作步驟提取DNA后，使用基因擴(kuò)增儀對(duì)提取的DNA進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物通過DNA反向點(diǎn)雜交結(jié)合法，與包被23種基因型目的片段（包含 17 種高危亞型：-16，18，31，33，35，39，45，51，52，53，56，58，59，66，68，73，82；6 種低危亞型：-6，11，42，43，81，83）的分型探針雜交，通過雜交信號(hào)的有無來判斷是否存在基因型的感染。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料感染率以%表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究結(jié)果及亞型檢出情況

本研究共檢測(cè)23個(gè)亞型，所有亞型均被檢出。4307例女性中共檢出陽性病例1143例，總感染率為26.54%（1143/4307），其中單一感染833例，多重感染310例。感染以高危型為主，高危亞型陽性數(shù)860例，高危型感染率為19.97%（860/4307），檢出率為75.24%（860/1143）。多重感染中高危+高危陽性數(shù)164例，感染率為3.81%（164/4307）；高危+低危陽性數(shù)141例，感染率為3.27%（141/4307），低危+低危陽性數(shù)5例，感染率為0.12%（5/4307）。23種亞型共檢出1616次，高危型感染頻度前六位依次為：52、16、58、51、53、18，檢出率依次為：17.14%、11.88%、8.66%、7.37%、6.00%、4.33%。低危亞型中6型、42型、11型檢出率較高，分別占5.51%、4.39%、3.59%。見表1。

2.2 本地區(qū)52、16、58、18亞型檢出率與國(guó)內(nèi)其他城市比較

將本地區(qū)52亞型的檢出率與山東[7]、上海[8]、貴州[9]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=9.86、4.99、9.11，P＜0.05 ），與珠海[10]、武漢[11]比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；16亞型的檢出率與山東[7]、上海[8]、貴州[9]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=32.92、3.96、155.67，P＜0.05 ），與珠海[10]、武漢[11]比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。58亞型的檢出率與貴州[9]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.99，P＜0.05 ），與山東[7]、上海[8]、珠海[10]、武漢[11]比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。18亞型的檢出率與山東[7]比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.89，P＜0.05 ），與另外四個(gè)地區(qū)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 各亞型的檢出情況

3 討論

宮頸癌是威脅女性健康最常見的惡性腫瘤之一[12]，其發(fā)病率在女性惡性腫瘤中位居第二[13]，發(fā)病率僅次于乳腺癌，每年約有25萬人死于宮頸癌[14]。大量流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，持續(xù)性高危型HPV感染是宮頸癌及宮頸病變發(fā)生、發(fā)展的重要致病因素[2-3]。研究認(rèn)為，HPV檢測(cè)可明顯降低后續(xù)宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生率，可作為宮頸癌主要篩查方法[15]，同時(shí)，我院就診的人群中有一部分有生育需求，對(duì)孕前婦女進(jìn)行檢測(cè)有利于保障母嬰健康和安全，因此及時(shí)了解本地區(qū)人群中人乳頭瘤病毒的感染狀況、感染分布特征具有重要流行病學(xué)意義。

表2 52、16、58、18亞型檢出率與其他城市比較結(jié)果[n（%）]

本研究回顧性分析了4307例婦女宮頸HPV感染狀況，結(jié)果顯示南寧市婦女HPV感染率為26.54% ，與國(guó)內(nèi)報(bào)道[16-17]的感染率基本一致，比袁艷等[11]報(bào)道的感染率略低，但也有研究顯示部分地區(qū)感染率低于本研究[18-19]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，本地區(qū)HPV感染以高危型為主，高危型感染率為19.97%（860/4307），高于魏菁菁[20]等報(bào)道的高危型感染率。所有檢出的亞型中，檢出率最高的亞型是HPV52型（17.14%），其他常見亞型分別為16、58、51、53、6、42、18，與李霓等[13]報(bào)道的亞洲地區(qū)HPV16 、18 型的感染率顯著高于 58、33、52 型不一致。有文獻(xiàn)報(bào)道，HPV感染的高危型別在不同的地理區(qū)域存在一定差異[5-6]，我國(guó)長(zhǎng)江以南常見型別依次為 16、18、58、52，長(zhǎng)江以北地區(qū)以 16、58、53 亞型為主[21]，將本研究結(jié)果與同為長(zhǎng)江以南的楊丹球等[22]報(bào)道的廣西沿海地區(qū)常見高危亞型基本一致。將本市高危52、16、58、18亞型的檢出率與山東[7]、上海[8]、貴州[9]、珠海[10]、武漢[11]比較，結(jié)果顯示，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本市低危亞型以6型、42型、11型常見，也與裴蘊(yùn)鋒等[23]報(bào)道不一致。上述結(jié)果顯示，本地區(qū)HPV亞型分布有明顯地域性差異。這種差異可能與標(biāo)本量、檢測(cè)方法、地域、種族、葉酸攝入[24]、人口遷移等有關(guān)。

有研究顯示，16、18、52、58 亞型是引起女性宮頸癌的重要優(yōu)勢(shì)型別[25]，對(duì)中國(guó)女性有特異性致癌作用[13]，本研究中門診患者的HPV感染的優(yōu)勢(shì)亞型覆蓋了宮頸癌的重要優(yōu)勢(shì)型別，進(jìn)一步提示其為主要防控對(duì)象。

綜上所述，南寧市婦女HPV感染率與國(guó)內(nèi)報(bào)道基本一致，以高危型感染為主。與國(guó)內(nèi)其他城市地區(qū)比較，HPV亞型分布具有明顯地域差異。高危型感染以 52、16、58、51、53、18 亞型為主，在本地區(qū)宮頸癌篩查中，對(duì)上述亞型陽性的高風(fēng)險(xiǎn)婦女應(yīng)給予持續(xù)跟蹤關(guān)注，必要時(shí)早期采取阻斷性治療。結(jié)合本研究結(jié)果，將為指導(dǎo)南寧市HPV感染的監(jiān)測(cè)、治療與宮頸癌的防控提供重要科學(xué)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。