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    觀察P16蛋白和TCT及HPV基因分型聯(lián)合檢測在宮頸病變篩查中的應用效果

    2020-08-10 08:58:31趙曉芳王麗麗楊梅
    中國實用醫(yī)藥 2020年21期
    關鍵詞:宮頸病變聯(lián)合檢測篩查

    趙曉芳 王麗麗 楊梅

    【摘要】 目的 觀察P16蛋白和液基薄層細胞學檢測(TCT)及人乳頭瘤病毒(HPV)基因分型或高危型人乳頭瘤病毒(HR-HPV)聯(lián)合檢測在宮頸病變篩查中的應用效果。方法 559例宮頸病變患者, 均應用病毒學聯(lián)合細胞學進行檢查。對比其診斷效果, 選出最有意義的方式。結果 患者經(jīng)檢查后可知, HPV分型陽性+TCT異常、HR-HPV陽性+TCT異常、HPV分型陽性+P16TCT異常、HR-HPV陽性+P16TCT異常為宮頸病變的好發(fā)人群, 應用P16TCT+HPV分型對高度宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)的檢出率更高(48.33%)。結論 宮頸疾病人群中, HPV感染率較高, 且以高危型、單一和二重感染居多;隨著宮頸病變程度的加重, HPV的感染率和P16蛋白陽性表達率逐漸升高。采用P16TCT+HPV分型在宮頸病變篩查中的篩查效果略優(yōu)于其他方式。

    【關鍵詞】 P16蛋白;液基薄層細胞學檢測;人乳頭瘤病毒基因分型;聯(lián)合檢測;宮頸病變;篩查

    DOI:10.14163/j.cnki.11-5547/r.2020.21.090

    宮頸病變是臨床婦科科室中經(jīng)常遇到的疾病, 其中像慢性宮頸炎等都有可能導致宮頸病變的發(fā)生。其中最值得警惕的情況便是宮頸上皮內(nèi)病變, 該癥狀與宮頸癌存在直接聯(lián)系, 即為宮頸癌的癌前病變, 若不盡早對宮頸上皮內(nèi)病變進行確診并治療, 則可能會發(fā)展為宮頸癌, 對患者的生命安全造成重大威脅[1]。有關患者宮頸病變的檢查, 現(xiàn)今主要采用病毒學和細胞學聯(lián)合檢查, 其中病毒學包括HPV分型檢查與HR-HPV檢查, 細胞學則包括普通TCT與P16蛋白表達-TCT(P16TCT)聯(lián)合檢查, 以上診斷方式雖能夠起到較好的檢出作用, 但也存在一定差異[2]。本研究對4種不同的檢測方式進行分析和對比, 以選出最具有價值的檢測方式, 研究流程及結果如下。

    1 資料與方法

    1. 1 一般資料 選取559例本院于2018年1月~2020年1月收治的宮頸病變患者, 為其提供4種聯(lián)合檢測方式, 以上患者中選擇TCT+HPV分型的有331例、TCT+HR-HPV的有156例、P16TCT+HPV分型的有60例、 P16TCT+HR-HPV的有19例, 其中7例患者同時選擇TCT+HPV分型、TCT+HR-HPV檢查?;颊吣挲g25~77歲, 平均年齡(48.31±9.72)歲。納入患者經(jīng)TCT診斷后病癥分級均為意義不明的不典型鱗狀細胞(ASC-US) 及以上。該研究已通過醫(yī)院倫理委員會批準、所有患者均已簽署知情同意書。

    1. 2 方法

    1. 2. 1 儀器及試劑 美國ABI-2720 PCR儀及系統(tǒng)、潮州凱普生物化學有限公司HBHM-9000A組合型分子雜交儀, 廣州江元醫(yī)療科技有限公司全自動細胞免疫標記染色系統(tǒng)(ICC)JY-6000;HPV基因分型試劑由凱普生物提供, P16蛋白試劑、TCT試劑由江元醫(yī)療提供。

    1. 2. 2 TCT檢查 患者入院后立即應用宮頸刷插入其宮頸管中大概1 cm位置處, 繞順時針的方向旋轉大概5~6圈, 對宮頸外口和宮頸管處被刷下來的脫落細胞進行收集, 并將細胞置入保存液當中, 應用TCT制片機制片, 并用濃度為95%酒精進行固定, 完成染色。

    1. 2. 3 P16蛋白表達檢測 采用JY-6000系統(tǒng)制作液基薄片, 95%酒精溫室固定72 h, 晾干。將每張液基薄片劃分為兩半, 一半做P16蛋白表達檢測, 另一半作陰性對照。采用免疫組化 Elivision法檢測P16蛋白的表達, 并按照試劑盒說明書進行相關操作。

    1. 2. 4 HPV基因分型檢測 同1.2.2采集樣本完畢立即放入保存液中, 裂解后提取DNA, 試劑盒購自潮州凱普生物化學有限公司, 采用ABI-2720 PCR儀, 以細胞內(nèi)基準物質β-globin DNA為對照, 在4種熒光檢測通道下, 同步進行聚合酶鏈反應(PCR)擴增與導流雜交基因分型檢測, 根據(jù)系統(tǒng)自帶軟件對結果進行分析。操作及結果判讀參考試劑盒說明書。

    本次研究為其提供4種聯(lián)合檢測方式, 分別為TCT+HPV分型、TCT+HR-HPV、P16TCT+HPV分型、P16TCT+HR-HPV, 患者按照自己意愿自行選擇檢測方式, 并對聯(lián)合檢測方式進行分析。

    1. 3 判定標準 根據(jù)國際癌癥協(xié)會2006年制定的TBS分級系統(tǒng)對TCT異?;颊哌M行分級, 分級標準按照從輕至重的順序分為正常范圍(WNL), ASC-US, 低級別鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL), 不典型鱗狀細胞、不除外高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(ASC-H), 高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)以及宮頸癌(SCC);P16TCT結果判定方式:P16蛋白表達陽性(細胞核或細胞質內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒, 每一玻片隨機觀察10個視野, 陰性細胞(-)未被著色或著色不明顯;陽性細胞(+)著色較深, 多以黃棕色為主)或TCT異常定義為P16TCT異常。

    1. 4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計分析。計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

    2 結果

    2. 1 4種檢測方案CIN敏感度對比 納入患者采用TCT+HPV分型檢測的共有331例, 其中檢測出高度CIN的患者有142例, 占總監(jiān)測患者數(shù)的42.90%;采用TCT+ HR-HPV檢測的共有156例, 其中檢測出高度CIN的患者有63例, 占總監(jiān)測患者數(shù)的40.38%;采用P16TCT+HPV分型檢測的共有60例, 其中檢測出高度CIN的患者有29例, 占總監(jiān)測患者數(shù)的48.33%;采用P16TCT+ HR-HPV檢測的共有19例, 其中檢測出高度CIN的患者有9例, 占總監(jiān)測患者數(shù)的47.37%。4種檢測中P16TCT+HPV分型檢測的高度CIN檢出率最高, 4種檢出率對比, 差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

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