番茄果實(shí)成熟過程中色素合成相關(guān)基因的表達(dá)分析

陳遠(yuǎn)志，孫楊瑩，葉必順，賴童飛

(杭州師范大學(xué)生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，植物RNA信號(hào)傳導(dǎo)中心，浙江 杭州 311121)

番茄(Solanumlycopersicum)屬于雙子葉植物綱，茄屬，番茄亞屬，其果實(shí)味道鮮美，色澤鮮艷，富含維生素A和C、蘋果酸、檸檬酸、蘆丁以及番茄紅素等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有較高的食用和藥用價(jià)值.番茄果實(shí)成熟的過程伴隨著生理、生化指標(biāo)的劇烈改變[1]，根據(jù)番茄果實(shí)顏色變化主要分為綠熟期、破色期、粉紅期和紅熟期.綠熟期果實(shí)體積不再增大，果肉堅(jiān)硬，果皮呈現(xiàn)綠色；破色期果實(shí)堅(jiān)硬，果頂開始變紅，種子基本成熟；粉紅期果實(shí)果皮大部分轉(zhuǎn)紅，果肉尚未軟化，種子完全成熟；紅熟期果實(shí)完全變紅，果肉開始軟化，含糖量較高[2].番茄果實(shí)顏色主要與果皮與果肉中葉綠素、類胡蘿卜素及類黃酮等色素物質(zhì)的積累及相對(duì)比例有關(guān)，不但具有較高的觀賞價(jià)值，還是評(píng)估果實(shí)營(yíng)養(yǎng)及醫(yī)用價(jià)值的重要標(biāo)志.例如，成熟期番茄果實(shí)中的主要色素物質(zhì)番茄紅素具有抗氧化、增強(qiáng)免疫力、降低心血管疾病等作用，而富含的β-胡蘿卜素進(jìn)入人體后可成為維生素A的重要來源[3-4].

番茄果實(shí)中類胡蘿卜素在葉綠體和色素母細(xì)胞中合成，主要通過MEP(Methyl-D-erythritol 4-phosphate)途徑合成IPP(Isopentenyl pyrophosphate)，在經(jīng)過一系列酶促反應(yīng)依次生成八氫番茄紅素、番茄紅素以及β-胡蘿卜素等[5].番茄果實(shí)中類黃酮物質(zhì)的合成均起始于查爾酮合成酶的催化，通過不同代謝途徑形成黃烷酮、黃酮醇以及花青素等色素物質(zhì)[6].Shinozaki等通過高分辨率轉(zhuǎn)錄組分析表明，查爾酮合成酶基因SlCHS-2在番茄表皮細(xì)胞中大量表達(dá)并引起黃酮類色素的積累，與其共表達(dá)的還包括類黃酮合成途徑中6個(gè)重要催化酶的編碼基因和1個(gè)MYB家族轉(zhuǎn)錄因子基因[1].

番茄果實(shí)色素合成受到種植條件、環(huán)境因素、激素以及發(fā)育階段等多方面影響.例如，紅光(波長(zhǎng)600 nm)及遠(yuǎn)紅光(波長(zhǎng)730 nm)能夠通過光敏色素介導(dǎo)番茄果實(shí)中番茄紅素的合成[7]；乙烯能夠通過受體ETRs調(diào)控番茄紅素合成酶的表達(dá)[8]；外源赤霉素(ABA)處理能夠提高類胡蘿卜素的合成并引起葉綠素的降解[9-10]；生長(zhǎng)素(IAA)能夠延緩番茄果實(shí)從綠色到紅色的轉(zhuǎn)變[11]；濃度為50 μM的褪黑素處理能夠引起8個(gè)花青素合成相關(guān)蛋白表達(dá)改變，并提高成熟番茄果實(shí)中花青素的含量[12].在果實(shí)內(nèi)部，大量的microRNAs在番茄類胡蘿卜素合成過程中發(fā)揮著調(diào)節(jié)作用[13]，同時(shí)許多轉(zhuǎn)錄因子(如RIN、TAGL1、CNR等)不但能夠通過激素介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑間接調(diào)控番茄果實(shí)色素的合成[14-16]，還可以直接參與色素合成相關(guān)基因的調(diào)控.例如LeMADS-RIN、LeTDR4、STAY-GREEN以及SlBBX20均可以與SlPSY1的啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合并限制其活性[17-20]；8個(gè)WRKY轉(zhuǎn)錄因子家族的成員能夠與4個(gè)番茄果實(shí)顏色改變相關(guān)基因(SlPPH、SlPAO、SlPSY1和SlPDS)的啟動(dòng)子區(qū)域互作[21]；MYB轉(zhuǎn)錄因子家族的SlAFT與highpigment-1基因有密切的相關(guān)性[22].此外，近年來還有很多果實(shí)色素物質(zhì)合成調(diào)控機(jī)制研究的報(bào)道，Gupta等(2014)發(fā)現(xiàn)光敏色素PHYA、PHYB1以及PHYB2能夠抑制番茄紅素以及β-胡蘿卜素的積累[23]；過表達(dá)AtORANGE、AtPDS或者SlAN2能夠促進(jìn)番茄果實(shí)類胡蘿卜素的積累[24-26].由此可見，加深對(duì)番茄色素合成途徑及相關(guān)調(diào)控基因的了解是研究番茄果實(shí)品質(zhì)性狀的重要內(nèi)容和方向.

本研究擬通過相關(guān)生理、生化及分子指標(biāo)檢測(cè)，對(duì)番茄果實(shí)成熟過程中色澤及主要色素物質(zhì)含量變化進(jìn)行分析，評(píng)估調(diào)控色素合成的轉(zhuǎn)錄因子基因、類胡蘿卜素及類黃酮合成途徑中關(guān)鍵基因的表達(dá)規(guī)律，加深對(duì)番茄果實(shí)色素合成及其調(diào)控機(jī)制的理解，為利用分子遺傳手段定向調(diào)控番茄果實(shí)色素含量，提高番茄果實(shí)品質(zhì)性狀及商品屬性提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

番茄(Solanumlycopersicumcv. Ailsa Craig)培養(yǎng)在無蟲害、病害的溫室中，保持溫度25 ℃及濕度80%，每日光照16 h，定期補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)液，記錄開花時(shí)間及果實(shí)破色日期.

主要試劑包括植物總RNA提取試劑盒(Cat.74904，Qiagen，Germany)，F(xiàn)ast Quant cDNA第一鏈合成試劑盒(KR106，Tiangen，China)，Ultra SYBR mixture(CW0956，CW Bio，China)，蘇丹Ⅰ、槲皮素、六水氯化鋁及其他常規(guī)試劑購(gòu)自生工生物工程(上海)有限公司.

主要儀器包括WSC-S測(cè)色色差計(jì)(上海精科)，核酸蛋白分析儀(SmartSprec Plus，Bio-Rad，USA)，CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad，USA).

1.2 番茄色素相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)

分別收集開花后30 d、破色期、破色后5 d以及破色后10 d的果實(shí)，使用數(shù)碼相機(jī)(EOS600D，Canon，Japan)記錄果實(shí)表型.利用WSC-S測(cè)色色差計(jì)檢測(cè)果實(shí)表皮色差，光源為標(biāo)準(zhǔn)光源D65，色溫為6500 K，檢測(cè)嚴(yán)格按照儀器使用說明進(jìn)行.每個(gè)時(shí)期選擇15個(gè)果實(shí)，在每個(gè)果實(shí)赤道部位選擇3個(gè)點(diǎn)進(jìn)行測(cè)量，每個(gè)檢測(cè)點(diǎn)間隔120°，檢測(cè)結(jié)果利用國(guó)際照明委員會(huì)CIE-L*a*b*表色系統(tǒng)表示.

參考Wang等[27]方法檢測(cè)葉綠素含量，準(zhǔn)確稱取10 g果肉，在液氮中研磨至粉狀后轉(zhuǎn)移至80%的丙酮溶液中，充分?jǐn)嚢韬蠖ㄈ葜?0 mL，將混合液離心并保留上清，在645 nm(葉綠素a)和663 nm(葉綠素b)波長(zhǎng)處檢測(cè)上清液的吸光度，總?cè)~綠素含量=8.33×(8.02×OD663+20.20×OD645)μg/g(以鮮質(zhì)量計(jì)).

配制0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的蘇丹Ⅰ代替番茄紅素標(biāo)準(zhǔn)品，在485 nm波長(zhǎng)下測(cè)定溶液吸光度，一元線性回歸方程為y=0.2764x+0.0013，相關(guān)系數(shù)R2=0.9954.準(zhǔn)確稱取10 g果肉，在液氮中研磨至粉狀后加入適量甲醇，充分?jǐn)嚢韬箅x心棄上清，沉淀利用甲醇重復(fù)漂洗至上清無色，利用50 mL三氯甲烷充分提取沉淀中的番茄紅素，檢測(cè)提取液在485 nm波長(zhǎng)下的吸光度并計(jì)算番茄紅素濃度.

利用氯化鋁比色法檢測(cè)果實(shí)樣品中總類黃酮含量[28]，準(zhǔn)確稱取1 g果肉，在液氮中研磨至粉狀轉(zhuǎn)移至1 mL去離子水中.取0.5 mL加入1.5 mL 95%乙醇、0.1 mL 10%的六水三氯化鋁溶液、0.1 mL濃度為1 mol/L的醋酸鉀溶液以及2.8 mL去離子水，室溫反應(yīng)40 min，檢測(cè)溶液在415 nm波長(zhǎng)處的吸光度.利用0～50 mg/L濃度范圍的槲皮素(Queretin)標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，一元線性回歸方程為y=0.0043x+0.0095，相關(guān)系數(shù)R2=0.979.總類黃酮含量以每千克鮮質(zhì)量的槲皮素當(dāng)量(mg)表示.

參考Zhang等[29]方法檢測(cè)果實(shí)樣品中花青素含量，準(zhǔn)確稱取10 g果肉，在液氮中研磨至粉狀后轉(zhuǎn)移至含有0.1 mol/L鹽酸的甲醇溶液中，充分?jǐn)嚢韬蠖ㄈ葜?0 mL，將混合液密封并在避光條件下靜置24 h，隨后將混合液離心并保留上清，檢測(cè)上清液在525 nm波長(zhǎng)處的吸光度，利用吸光度值表示花青素在果肉中的相對(duì)含量.

1.3 色素合成相關(guān)基因表達(dá)分析

分別收集開花后30 d、破色期、破色后5 d以及破色后10 d的果實(shí)，在液氮中充分研磨后，利用植物總RNA提取試劑盒提取果實(shí)樣品的總RNA，F(xiàn)ast Quant cDNA第一鏈合成試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng).利用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)色素合成相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量，調(diào)控色素合成轉(zhuǎn)錄因子基因的定量引物序列參考Wang等(2018)[30]，類胡蘿卜素合成相關(guān)基因的定量引物序列參考Su等(2015)[11]，類黃酮合成相關(guān)基因的定量引物序列參考Pandey等(2015)[31].反應(yīng)體系為20 μL：10 μL 2×Ultra SYBR mixture，1 μL cDNA，0.5 μL正向引物，0.5 μL反向引物，8 μL H2O.實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀運(yùn)行條件為：95 ℃預(yù)熱10 min，95 ℃變性15 s，58 ℃退火15 s，72 ℃延伸20 s，共運(yùn)行40個(gè)循環(huán).CFX96 Real-Time PCR Detection System記錄SYBR Green的熒光變化及threshold cycle(Ct)值.內(nèi)參基因選擇18srRNA，目標(biāo)基因的相對(duì)表達(dá)量用2-△Ct表示.

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

每個(gè)實(shí)驗(yàn)至少進(jìn)行3次生物學(xué)重復(fù).數(shù)據(jù)分析使用SPSS(Statistical Product and Service Solutions)軟件，采用單因素方差分析，多重比較采用One-way ANOVA以及Duncan’s multiple range檢驗(yàn)，P<0.05時(shí)表示差異顯著.

2 結(jié)果與分析

2.1 番茄果實(shí)成熟過程中相關(guān)色素含量變化

番茄在開花后30 d左右進(jìn)入綠熟期，果皮由青綠色逐漸泛白；開花后35～40 d左右進(jìn)入破色期，此時(shí)15%～20%的果皮變?yōu)闇\黃或淺紅色；破色后5 d，除果肩外至少3/4的果皮轉(zhuǎn)變成黃色或紅色；破色后10 d，果皮完全轉(zhuǎn)紅(圖1).表1利用CIE-L*a*b*表色系統(tǒng)對(duì)果皮顏色的變化進(jìn)行了定量描述，隨著果實(shí)從綠熟期向紅熟期轉(zhuǎn)化，果皮顏色從綠色色度向紅色色度轉(zhuǎn)變，黃色色度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì).

A：開花后30 d的果實(shí)；B：破色期果實(shí)；C：破色后5 d的果實(shí)；D：破色后10 d的果實(shí).

表1 番茄果實(shí)成熟過程中的顏色變化Tab.1 The color changes during tomato fruit ripening

番茄果實(shí)成熟過程中番茄紅素及類黃酮含量逐漸升高，破色5 d后含量顯著增加；同時(shí)，葉綠素的含量逐漸降低，破色5 d后葉綠素含量保持在較低的水平；花青素在果實(shí)中含量較低，在果實(shí)成熟過程中變化不顯著.相關(guān)色素的含量變化與果實(shí)表型的變化基本一致(圖2).

30 DPA：開花后30 d的果實(shí)；Breaker：破色期果實(shí)；5 DPB：代表破色后5 d的果實(shí)；10 DPB：破色后10 d的果實(shí)，誤差棒代表標(biāo)準(zhǔn)偏差.

2.2 調(diào)控色素合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)變化

轉(zhuǎn)錄因子能夠通過直接或者間接的方式調(diào)控番茄果實(shí)色素物質(zhì)的合成.在番茄果實(shí)成熟過程中，SlAP2a、LeMADS-RIN、LeNAC-NOR、LeSPL-CNR和LeTDR4呈現(xiàn)先上升后下降的表達(dá)趨勢(shì)，且峰值多集中于破色后5 d；SlMADS1、SlTAGL1以及LeHB1在綠熟至破色期之間呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，隨后表達(dá)量上升，破色后5 d后逐漸下降；而SlMYB12的表達(dá)則隨著番茄果實(shí)的成熟逐漸下降(圖3).

圖3 番茄果實(shí)成熟過程中調(diào)控色素合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)變化Fig.3 Expression changes of transcription factor genes involved in egulating pigment biosynthesis during tomato fruit ripening

2.3 類胡蘿卜素合成途徑相關(guān)基因的表達(dá)變化

番茄成熟過程中類胡蘿卜素含量變化非常明顯，通過相關(guān)基因表達(dá)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PSY1、PDS、ZDS、ZISO以及NCED在綠熟至破色后5 d期間表達(dá)量呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，隨后開始逐漸下降；PSY2、β-LCY、ZEP、β-CRTR以及ABA4的表達(dá)從綠熟期開始下降，果實(shí)破色后逐漸上升，破色后5 d達(dá)到頂點(diǎn)，隨后逐漸下降；而ε-LCY及NXD在綠熟期表達(dá)量最高，隨后逐漸下降，果實(shí)破色后則保持在一個(gè)較低的表達(dá)水平，且表達(dá)差異不顯著(圖4).

PSY：番茄紅素合成酶；PDS：番茄紅素去飽和酶；ZDS：ζ-胡蘿卜素去飽和酶；ZISO：ζ-胡蘿卜素異構(gòu)酶；β-LCY：β-番茄紅素環(huán)化酶：ε-LCY：ε-番茄紅素環(huán)化酶；ZEP：玉米黃質(zhì)環(huán)氧酶；β-CRTR：β-番茄紅素羥化酶；ABA：脫落酸；NXD：新黃質(zhì)合成酶；NCED：9-順式-環(huán)氧類胡蘿卜素雙加氧酶.

2.4 類黃酮合成途徑相關(guān)基因的表達(dá)變化

番茄中含有大量類黃酮物質(zhì)，它們是一類多酚化合物，作為天然色素，對(duì)番茄果實(shí)的顏色具有重要意義.通過對(duì)類黃酮合成途徑相關(guān)基因表達(dá)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，PAL、4CL、C3H、HQT、CHS、F3’5’H、F3’H、F3H、FLS以及DRF在果實(shí)成熟過程中呈現(xiàn)先上升后下降的表達(dá)趨勢(shì)，其中大部分基因在破色期表達(dá)量最高，而4CL、HQT以及DRF在破色后5 d表達(dá)量最高；C4H、HCT、CHI、GT以及RT在番茄成熟過程中呈現(xiàn)逐漸下降的表達(dá)趨勢(shì)，其中C4H在成熟前期變化不顯著，破色5 d后才逐漸下降；ANS在綠熟期表達(dá)逐漸下降，破色期后逐漸上升，在破色5 d后達(dá)到頂點(diǎn)，隨后逐漸下降(圖5).

PAL：苯丙氨酸解氨酶；4CL：4-苯并呋喃-輔酶-連接酶；C4H：4-肉桂酸羥化酶；HCT：羥基苯丙烯轉(zhuǎn)移酶；C3H：p-香豆酸-3-羥化酶；HQT：羥基苯丙烯-輔酶-奎尼酸-羥基苯丙烯轉(zhuǎn)移酶；CHS：查耳酮合成酶；CHI：查爾酮異構(gòu)酶；F3’5’H：類黃酮-3’5’-羥化酶；F3’H：類黃酮-3’-羥化酶；F3H：黃烷酮-3-羥化酶；FLS：黃酮醇合成酶；DFR：二氫黃酮醇-4-還原酶；GT：葡糖基轉(zhuǎn)移酶；RT：鼠李糖基轉(zhuǎn)移酶；ANS：花青素合成酶.

3 討論

作為呼吸躍變型模式植物，番茄果實(shí)色素含量的變化規(guī)律及其相關(guān)代謝途徑的研究備受關(guān)注.已有研究表明，LeMADS-RIN能夠直接正向調(diào)控PSY1、PSY2、ZISO、ZDS的表達(dá)，間接負(fù)向調(diào)控ε-LCY及β-CRTR的表達(dá)，本研究中LeMADS-RIN正向調(diào)節(jié)基因和負(fù)向調(diào)節(jié)基因具有不同表達(dá)趨勢(shì)，這與前人的研究結(jié)果是一致的[17].同屬M(fèi)ADS家族的SlMADS1是果實(shí)成熟的負(fù)調(diào)控因子，對(duì)PSY1的表達(dá)具有抑制作用[32]，因此SlMADS1在果實(shí)成熟過程中呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，并維持較低的表達(dá)豐度.此外，SlTAGL1、LeSPL-CNR、LeNAC-NOR以及LeHB1均位于LeMADS-RIN調(diào)控網(wǎng)絡(luò)下游，對(duì)果實(shí)顏色的形成具有間接的調(diào)控作用[15,18,33]，通過表達(dá)分析比較發(fā)現(xiàn)，這些轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)趨勢(shì)與LeMADS-RIN相似.SlAP2A屬于AP2/ERF家族，能夠以負(fù)反饋機(jī)制調(diào)控果實(shí)色質(zhì)體分化、類黃酮及類胡蘿卜素的合成[34]，本研究檢測(cè)結(jié)果表明SlAP2A在紅熟期維持較高的水平.番茄中R2R3MYB家族的轉(zhuǎn)錄因子SlMYB12主要控制柚皮苷查爾酮的合成，降低SlMYB12的表達(dá)，能夠使番茄果實(shí)產(chǎn)生粉色表型[35]，本實(shí)驗(yàn)中SlMYB12表現(xiàn)出逐漸下降的趨勢(shì)，推測(cè)相關(guān)代謝產(chǎn)物的合成相對(duì)于基因表達(dá)具有一定滯后性.

類胡蘿卜素是萜類化合物衍生物，番茄成熟過程中能夠積累大量類胡蘿卜素，主要發(fā)生在葉綠體中的類囊體膜破壞、質(zhì)體變成有色體時(shí).番茄中至少含有12種類胡蘿卜素，其合成途徑已經(jīng)較為清晰，通過47個(gè)酶基因表達(dá)的24種不同的酶，使異戊烯焦磷酸(IPP)和二甲基丙烯基焦磷酸(DMAPP)通過共價(jià)縮合及分別環(huán)化生成β-胡蘿卜素和α-胡蘿卜素，再經(jīng)過連續(xù)羥基化及氫化反應(yīng)生成葉黃素和玉米黃素，最終通過環(huán)氧化作用生成新黃質(zhì)[36-37].PSY是類胡蘿卜素合成途徑的關(guān)鍵限速酶，已知的3個(gè)PSY基因中，PSY1對(duì)于類胡蘿卜素的合成起主要作用[38].ZDS能夠催化ζ-胡蘿卜素生成番茄紅素，是類胡蘿卜素含量增加的關(guān)鍵酶[39]；ZISO是ζ-胡蘿卜素異構(gòu)酶，主要作用是將番茄紅素順式構(gòu)象轉(zhuǎn)變?yōu)槿词綐?gòu)象，是整個(gè)途徑中表達(dá)量最高的基因之一[40].本研究中，這3個(gè)酶的基因均呈現(xiàn)先上升后下降的表達(dá)趨勢(shì)，對(duì)番茄從綠轉(zhuǎn)紅起決定作用.β-LCY和ε-LCY是番茄紅素環(huán)化酶，是催化番茄紅素生成β-胡蘿卜素和δ-胡蘿卜素的重要酶，與番茄紅素的含量呈負(fù)相關(guān)，因此在成熟過程中表達(dá)量較低.NCED是9-順式-環(huán)氧-類胡蘿卜素雙加氧酶，主要作用是修飾新黃素和紫黃質(zhì)形成重要的植物激素ABA，定量分析發(fā)現(xiàn)其表達(dá)情況與該途徑的主要限速酶基因表達(dá)趨勢(shì)相一致.

番茄果實(shí)成色物質(zhì)中還包含大量類黃酮物質(zhì)，它們具有三環(huán)苯基苯并吡喃結(jié)構(gòu)，根據(jù)雜環(huán)上取代基不同而呈現(xiàn)不同顏色.同時(shí)，類黃酮還是一種天然抗氧化劑，在醫(yī)藥和食品領(lǐng)域被廣泛使用[41].番茄類黃酮次生代謝途徑的主要結(jié)構(gòu)基因已經(jīng)被大量發(fā)掘，首先苯丙氨酸在PAL、4CL以及C4H的催化下形成類黃酮物質(zhì)的前體4-Coumaroyl CoA，隨后一方面通過HCT、C3H、HCT、HQT的催化作用與Quinic acid和Caffeoyl CoA形成Tricaffeoyl quinic acid，另一方面在CHS的作用下與3個(gè)Malonyl CoA合成Naringenin-chalcone，進(jìn)而通過CHI形成Naringenin，通過F3’H和F3H催化的酶促反應(yīng)形成Aglycone骨架.在此基礎(chǔ)上，通過FLS、GT和RT的催化作用形成Rutin，或者通過FLS、DRF、ANS的催化作用形成花青素[6,31].其中CHS是主要的限速酶[42]，本實(shí)驗(yàn)中，CHS在果實(shí)破色期表達(dá)量最高，隨后逐漸下降，大部分下游相關(guān)基因與CHS具有相同的表達(dá)趨勢(shì).

番茄果實(shí)中的色素物質(zhì)不僅為果實(shí)提供了美麗的顏色，還是重要的營(yíng)養(yǎng)成分，隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的發(fā)展以及相關(guān)基礎(chǔ)研究的深入，定向改變番茄果實(shí)色澤以及色素相關(guān)物質(zhì)含量是現(xiàn)代番茄育種的方向之一.本研究結(jié)合生理、生化及相關(guān)分子指標(biāo)檢測(cè)，對(duì)番茄果實(shí)成熟過程中主要成色物質(zhì)類胡蘿卜素和類黃酮物質(zhì)的含量變化進(jìn)行了評(píng)估，較為全面地描述了調(diào)控番茄果實(shí)色素合成相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因的表達(dá)動(dòng)態(tài)，揭示了番茄果實(shí)色素合成途徑中關(guān)鍵基因的時(shí)序性表達(dá)規(guī)律，研究結(jié)果為通過利用分子遺傳途徑提高番茄果實(shí)中功能性成分含量，培育優(yōu)質(zhì)品種提供了理論基礎(chǔ).