白術(shù)多指標(biāo)成分含量測定方法優(yōu)化

王麗敏 周燕紅 楊瑩 杜偉鋒 葛衛(wèi)紅 李昌煜

1.杭州市中醫(yī)院 杭州 310007 2.浙江中醫(yī)藥大學(xué) 3.浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片有限公司

白術(shù)為菊科植物白術(shù)（Atractylodes macrocephala Koidz.）的干燥根莖，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具有健脾益氣、燥濕利水、止汗、安胎之功效，主治脾虛食少、腹脹泄瀉等病癥，應(yīng)用十分廣泛，主產(chǎn)于浙江、安徽、河北、湖南、湖北等地[1]。白術(shù)自古具有“北參南術(shù)”“十方九術(shù)”等美譽(yù)，是常規(guī)的大宗藥材之一，年需求量在萬噸以上。但是作為如此常規(guī)的藥材，2015版《中國藥典》一部中白術(shù)項(xiàng)下卻無含量測定項(xiàng)，無法突顯白術(shù)的內(nèi)在質(zhì)量，因此難以保障其相關(guān)制劑的質(zhì)量[2]。目前關(guān)于白術(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)最完善的是《香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)》[3]，其中有白術(shù)的含量檢測項(xiàng)，但是沒有形成統(tǒng)一規(guī)范。雖然現(xiàn)在也已經(jīng)有很多以多個(gè)成分同步測定或利用液相指紋圖譜來控制白術(shù)質(zhì)量的相關(guān)報(bào)道[4-7]，但方法不統(tǒng)一，也未能建立統(tǒng)一可行的標(biāo)準(zhǔn)，而且現(xiàn)有的含量測定方法只能測定白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ或蒼術(shù)酮單個(gè)指標(biāo)或兩三個(gè)指標(biāo)，不能同時(shí)簡單有效地測定4個(gè)指標(biāo)成分。因此本研究對白術(shù)含量測定方法進(jìn)行優(yōu)化，以期建立一種簡單、高效、準(zhǔn)確可行的白術(shù)多指標(biāo)含量檢測方法，為后續(xù)白術(shù)含量標(biāo)準(zhǔn)的建立及其質(zhì)量控制研究提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 儀器 U3000高效液相色譜儀購于日本Dionex公司，配置包括四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動進(jìn)樣器、恒溫柱溫箱、二極管陣列檢測器（diode array detection，DAD）、變色龍色譜數(shù)據(jù)工作站；NT-xs105電子分析天平 （精度：0.01mg）、ME-204E電子分析天平（精度：0.01g）均購于瑞士Mettler Toledo公司；BWS-1-SN電子天平（精度：±0.1g）購于廈門佰倫斯電子科技有限公司；DFD-700電熱恒溫水浴鍋為天津泰斯特儀器有限公司產(chǎn)品；KQ-500DB數(shù)控超聲波清洗器購于昆山超聲儀器有限公司。

1.2 藥物和試劑 白術(shù)藥材產(chǎn)自浙江磐安新渥鎮(zhèn)，經(jīng)杭州市中醫(yī)院主管中藥師周燕紅鑒定為白術(shù)（A-tractylodes macrocephala Koidz.）的干燥根莖。白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ（純度99.9%）、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ（純度99.9%）、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ（純度99.9%）均購于中國食品藥品檢定研究院（批號：111975-201501、111975-201501、111975-201501）；蒼術(shù)酮（純度98%）購自成都瑞芬思生物科技有限公司（批號：C-084-20）；甲醇、無水乙醇、乙酸乙酯、正己烷、磷酸均為分析純，均購于廣東廣華科技股份有限公司（批號：20190605、20190320、20190511、20190613、20190710）；液相用甲醇、乙腈為色譜純，均購于美國Tedia試劑有限公司 （批號：19065701、19055061）；水為娃哈哈純凈水。

1.3 供試品溶液制備方法考察

1.3.1 不同提取方法考察 （1）超聲提取離心法：精密稱取白術(shù)粉末1.0g，過標(biāo)準(zhǔn)3號篩，置于50mL離心管中，加70%乙醇10mL，密塞后稱重，超聲處理20min，冷卻后以70%乙醇補(bǔ)足失重，4 000r/min離心5min，過濾后取上清液，剩余殘?jiān)勰┰偌?0%乙醇10mL，按上述過程離心2次，合并兩次濾液，搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。（2）超聲提取濃縮法：精密稱取白術(shù)粉末1.0g，過標(biāo)準(zhǔn)3號篩，置于150mL錐形瓶中，加70%乙醇50mL，密塞后稱重，超聲處理20min，冷卻后以70%乙醇補(bǔ)足失重，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25mL，置于蒸發(fā)皿中，濃縮至小體積，以70%乙醇轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，定容后搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。（3）回流提取法：精密稱取白術(shù)粉末1.0g，過標(biāo)準(zhǔn)3號篩，置150mL錐形瓶中，加70%乙醇50mL，密塞后靜置30min，稱重，85℃水浴回流2h，冷卻后以70%乙醇補(bǔ)足失重，搖勻，用干燥濾器濾過，精密量取濾液25mL，置于蒸發(fā)皿中，濃縮至小體積，以70%乙醇轉(zhuǎn)移至5mL容量瓶中，定容后搖勻，0.45μm微孔濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。3種提取方法分別重復(fù)6次，比較3種不同提取方法的誤差。

1.3.2 提取溶劑考察 （1）不同有機(jī)溶劑：以1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備供試品溶液，70%乙醇分別換成甲醇、無水乙醇、乙酸乙酯、正己烷4種不同有機(jī)溶劑，比較4種不同有機(jī)溶劑的提取效果。（2）乙醇濃度考察：以1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備供試品溶液，70%乙醇溶劑分別換成80%乙醇、95%乙醇和無水乙醇3種不同濃度，比較4種不同濃度乙醇的提取效果。（3）溶劑用量考察：以1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備供試品溶液，以無水乙醇為提取溶劑，溶劑量分別為5、10、20、30mL，比較不同溶劑量對提取效果的影響。

1.3.3 超聲時(shí)間和次數(shù)考察 以1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備供試品溶液，70%乙醇溶劑換成無水乙醇，超聲時(shí)間分別為10、20、30min，超聲次數(shù)分別為1、2、3次，比較9種不同參數(shù)下超聲提取的效果。

1.4 高效液相色譜-二極管陣列檢測器（high-performance liquid chromatography-diode array detection，HPLC-DAD）測定4種指標(biāo)成分含量

1.4.1 水分測定 參照《中國藥典》通則中水分測定方法中第二法測定[8]。

1.4.2 對照品溶液配制 精密稱取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對照品5.20mg置于5mL容量瓶中，加無水乙醇至刻度，溶解搖勻，得白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對照品儲備液；精密稱取白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ?qū)φ掌?.93mg置于5mL容量瓶中，加無水乙醇至刻度，溶解搖勻，得白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ?qū)φ掌穬湟?；精密稱取白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品4.94mg置于5mL容量瓶中，加無水乙醇至刻度，溶解搖勻，得白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ對照品儲備液；精密稱取蒼術(shù)酮對照品4.50mg置于10mL容量瓶中，加無水乙醇至刻度，溶解搖勻，得蒼術(shù)酮對照品儲備液。分別取0.1mL的白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、Ⅲ，蒼術(shù)酮對照品儲備液和0.2mL白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ對照品儲備液混勻，得白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ溶液濃度為0.4160mg·mL-1、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ溶液濃度為0.1972mg·mL-1、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ溶液濃度為0.1976mg·mL-1、蒼術(shù)酮溶液濃度為0.0900mg·mL-1的混合對照品溶液。

1.4.3 色譜條件 采用HPLC-DAD測定白術(shù)中白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和蒼術(shù)酮四個(gè)指標(biāo)成分。色譜條件：流動相為0.1%磷酸（A）和乙腈（B）；流速：1.0mL·min-1；進(jìn)樣量為10μL；色譜柱采用ZORBAX Eclipse XDB-C18 Analytical 4.6mm×250mm 5-Micron；柱溫25℃。梯度洗脫程序：0～8min，60% B；8～16min，60% B～75% B；16～20min，75% B～100% B；20～30min，100% B；白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ檢測波長（λ=276nm），白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)酮檢測波長（λ=220nm），理論板數(shù)不低于2 000。

1.4.4 HPLC方法學(xué)考察

1.4.4.1 精密度考察 精密稱取同一批次白術(shù)樣品，按照1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備，以無水乙醇作為溶劑，按照1.4.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄各峰面積（mAU×min），計(jì)算6次進(jìn)樣峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative standard deviation，RSD）值。

1.4.4.2 穩(wěn)定性考察 精密稱取同一批次白術(shù)樣品，按照1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備，以無水乙醇作為溶劑，按照1.4.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，分別在0、2、4、8、12、24h各進(jìn)樣一次，記錄各峰面積（mAU×min），計(jì)算6次進(jìn)樣峰面積的RSD值。

1.4.4.3 重復(fù)性考察 精密稱取同一批次白術(shù)樣品6份，按照1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備，以無水乙醇作為溶劑，按照1.4.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄各峰面積（mAU×min），計(jì)算含量及其RSD值。

1.4.4.4 線性方程考察 精密移取白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ對照品儲備液，以乙醇逐級稀釋成不同濃度梯度的混合對照品溶液，按照上述色譜條件進(jìn)樣，以濃度為橫坐標(biāo)（x，單位mg·mL-1），以峰面積為縱坐標(biāo)（y，單位mAU×min），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程。

1.4.4.5 加樣回收考察 精密稱取同一批次白術(shù)樣品6份，按照1.3.1項(xiàng)下超聲提取離心法制備，以無水乙醇作為溶劑，取1mL供試品，進(jìn)樣測定后，加入一定量的白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和蒼術(shù)酮對照品儲備液，按照1.4.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣，記錄各峰面積（mAU×min），分別計(jì)算樣品和加樣后含量，以及加樣回收率和RSD值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 白術(shù)藥材水分含量測定結(jié)果 該批白術(shù)藥材的水分含量測定結(jié)果為9.97%。

2.2 供試品溶液制備方法考察結(jié)果

2.2.1 不同提取方法考察結(jié)果 《香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)》中白術(shù)含量測定以70%乙醇作為提取溶劑[3]，因此本研究不同提取方法考察均以70%乙醇為溶劑。按照1.4.3項(xiàng)下色譜條件，3種不同提取方法對4個(gè)指標(biāo)成分測定結(jié)果比較可知，超聲提取離心法的測定結(jié)果最好，各成分的測定含量最高，且RSD最小，最為穩(wěn)定；回流提取法測定結(jié)果最差，各成分的測定含量最低，回流提取效果欠佳，且RSD均大于5.00%，穩(wěn)定性不佳。見表1。說明超聲提取離心法提取效果最好，且穩(wěn)定性好，因此選用該方法作為白術(shù)供試樣品制備方法。

2.2.2 提取溶劑考察結(jié)果

2.2.2.1 不同溶劑考察結(jié)果 甲醇、無水乙醇、乙酸乙酯、正己烷4種不同極性的有機(jī)溶劑液相色譜圖見圖1。從圖1中可以看出，乙酸乙酯的溶劑峰最大，其他化合物回應(yīng)值不明顯；甲醇的圖譜溶劑峰較高，而且甲醇、無水乙醇、正己烷3種溶劑圖譜分離的化合物數(shù)都差不多，保留時(shí)間也相對一致；無水乙醇和正己烷的圖譜效果最好，其中正己烷的溶劑峰最小，但是在20min后無水乙醇分離的小分子化合物較正己烷多，且分離度較好，而且無水乙醇更不易揮發(fā)，更為穩(wěn)定，因此選用無水乙醇作為溶劑最佳。4種溶劑的極性大小為甲醇＞無水乙醇＞乙酸乙酯＞正己烷，上述分離效果說明溶劑的極性對白術(shù)化學(xué)成分的分離效果無顯著影響。

表1 三種方法4個(gè)指標(biāo)成分測定結(jié)果（n=6）Tab.1 Determination results of 4 index components by three methods(n=6)

圖1 不同溶劑選擇結(jié)果Fig.1 Results of different solvents selection

2.2.2.2 不同乙醇濃度考察結(jié)果 依據(jù)《香港中藥材標(biāo)準(zhǔn)》[3]，白術(shù)含量檢測以70%乙醇為溶劑，因此本研究選擇乙醇為溶劑，進(jìn)一步考察不同的乙醇濃度對白術(shù)化學(xué)成分的提取分離效果。70%乙醇的溶劑峰響應(yīng)峰高為830mAU，80%乙醇為550mAU，95%乙醇為175mAU，無水乙醇為60mAU。不同濃度乙醇對色譜圖的溶劑峰影響十分顯著，以無水乙醇的溶劑峰最小，70%乙醇溶劑峰最大；而且除溶劑峰外，其他各峰的分離和回應(yīng)值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），因此選擇無水乙醇為最佳溶劑。見圖2。

2.2.2.3 不同溶劑用量考察結(jié)果 不同溶劑用量條件下各指標(biāo)成分的峰面積和含量結(jié)果見表2。單因素方差分析發(fā)現(xiàn)，相同加樣量、不同溶劑量組間各指標(biāo)的含量差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明不同溶劑量對提取效果無明顯影響。但是溶劑量越大，成分稀釋比例增大，峰面積回應(yīng)值越小，因此綜合峰面積回應(yīng)值和后續(xù)超聲次數(shù)，選擇加樣量1.0g、溶劑量10mL為含量測定的物料比。

圖2 不同乙醇濃度選擇結(jié)果Fig.2 Results of different ethanol concentrations selection

表2 不同溶劑量對白術(shù)指標(biāo)成分含量的影響（n=3）Tab.2 Effect of different solvents on the index components content of Atractylodes Macrocephala Rhizoma(n=3)

2.2.3 不同超聲時(shí)間和次數(shù)考察結(jié)果 不同超聲時(shí)間和次數(shù)對白術(shù)4個(gè)指標(biāo)成分峰面積和含量影響的結(jié)果如表3所示。結(jié)果顯示，超聲1次的情況下，20min和30min超聲提取時(shí)間各指標(biāo)含量均高于10min，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明在超聲1次的情況下，超聲時(shí)間越長，提取的效果越好。超聲時(shí)間選擇10min和20min時(shí)，超聲次數(shù)越多，提取效果越好，超聲3次的各指標(biāo)含量均高于1次和2次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。但是當(dāng)超聲時(shí)間過長和超聲次數(shù)過多時(shí)，超聲時(shí)間和超聲次數(shù)對各指標(biāo)成分含量無明顯影響，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），甚至有超聲次數(shù)過多，其提取效果越差的現(xiàn)象。因此采用短時(shí)多次超聲的方法，能夠在確保白術(shù)內(nèi)在成分穩(wěn)定的同時(shí)，將其提取效果最大化，綜合比較以超聲3次，每次10min提取效果最佳，峰面積回應(yīng)值也高。

2.3 HPLC-DAD方法學(xué)考察結(jié)果

2.3.1 白術(shù)樣品和對照品HPLC結(jié)果 白術(shù)樣品和對照品色譜圖見圖3，A1、B1分別為白術(shù)藥材和白術(shù)對照品220nm吸收波長下吸收光譜，A2、B2分別為白術(shù)藥材和白術(shù)對照品在276nm吸收波長下吸收光譜。

表3 不同超聲時(shí)間和次數(shù)對白術(shù)指標(biāo)成分含量的影響（n=3）Tab.3 Effect of different ultrasound time and frequency on the content of Atractylodes macrocephala Rhizoma(n=3)

2.3.2 精密度考察結(jié)果 計(jì)算得出，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和蒼術(shù)酮RSD值分別為1.45%、1.30%、1.32%、2.10%，均小于2.50%，4個(gè)成分的峰面積及RSD見表4。說明該測定方法的精密度良好。

2.3.3 穩(wěn)定性考察結(jié)果 計(jì)算得出，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和蒼術(shù)酮RSD值分別為1.72%、1.50%、1.67%、2.31%，均小于2.50%，4個(gè)成分的峰面積及RSD見表5。說明該測定方法的穩(wěn)定性良好。

2.3.4 重復(fù)性考察結(jié)果 計(jì)算得出，白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和蒼術(shù)酮RSD值分別為1.66%、2.36%、1.94%、2.34%，均小于2.50%。見表6。說明該測定方法的穩(wěn)定性良好。

2.3.5 線性方程考察結(jié)果 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ在0.0015～0.1915mg·mL-1的濃度范圍內(nèi)線性擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=563.02x-0.2152（r2=0.9999），白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ在0.0085～0.1350mg·mL-1的濃度范圍內(nèi)線性擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=502.87x+0.2092（r2=0.9999），白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ在0.0015～0.3565mg·mL-1的濃度范圍內(nèi)線性擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=299.79x-0.08（r2=0.9998），蒼術(shù)酮在0.0145～0.9005mg·mL-1的濃度范圍內(nèi)線性擬合的標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程為y=46.568x-0.1396（r2=0.9999）。見表7。說明該測定方法線性關(guān)系良好。

圖3 白術(shù)藥材樣品和對照品HPLC色譜圖Fig.3 HPLC chromatogram of Atractylodes macrocephala Rhizoma samples and reference substance

2.3.6 加樣回收率考察結(jié)果 各成分回收率RSD值分別為2.26%、3.29%、3.69%、2.14%，加樣回收率均在95%～105%區(qū)間內(nèi)，且RSD均小于4.00%，說明該方法的加樣回收率符合要求。見表8。

2.4 方法驗(yàn)證 綜合上述結(jié)果，以HPLC-DAD法檢測白術(shù)4個(gè)指標(biāo)成分準(zhǔn)確穩(wěn)定可行，同時(shí)通過對不同提取方法考察，選擇超聲離心法制備供試樣品；考察不同溶劑、超聲時(shí)間和超聲次數(shù)等因素對提取效果的影響，選擇白術(shù)粉末1.0g，無水乙醇10mL，超聲3次、每次10min，為白術(shù)最佳樣品制備條件。取白術(shù)樣品6份，經(jīng)優(yōu)化方法提取后，按照1.4.3項(xiàng)下色譜條件測定進(jìn)行方法的驗(yàn)證，得到的結(jié)果見表9。

3 討論

現(xiàn)今HPLC已成為測定中藥內(nèi)在化學(xué)成分的最常規(guī)和最重要的方法，但是影響其準(zhǔn)確性和精度的因素諸多，從供試樣品的制備到色譜條件的每個(gè)環(huán)節(jié)都將影響其測定結(jié)果。本研究主要側(cè)重于白術(shù)含量測定方法中樣品制備這一過程，結(jié)合前期進(jìn)行的色譜條件考察，在水-甲醇、水-乙腈、0.1%磷酸水-甲醇和0.1%磷酸-乙腈4種流動相下，選擇0.1%磷酸水-乙腈作為流動相，峰形和分離度相對最佳；4種不同流速0.5、0.8、1.0和1.5mL·min-1中，以1.0mL·min-1流速最佳；進(jìn)樣量選擇10μL；色譜柱選擇ZORBAX Eclipse XDB-C18 Analytical 4.6mm×250mm 5-Micron。梯度洗脫程序?yàn)?～8min，60% B；8～16min，60% B ～75% B；16～20min，75% B～100% B；20～30min，100% B。比較20、25、30和40℃不同柱溫，確定以25℃最佳，基線平穩(wěn)。通過全波長掃描，確定白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ在276nm吸收波長處有最大吸收峰，白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ、蒼術(shù)酮在220nm吸收波長處有最大吸收峰，該液相方法經(jīng)方法學(xué)考察驗(yàn)證準(zhǔn)確、穩(wěn)定可行。

表4 HPLC方法精密度考察結(jié)果Tab.4 Results of precision investigation of HPLC method

表5 HPLC方法穩(wěn)定性考察結(jié)果Tab.5 Results of stability investigation of HPLC method

表6 HPLC方法重復(fù)性考察結(jié)果Tab.6 Results of repeatability investigation of HPLC method

表7 HPLC方法線性考察結(jié)果Tab.7 Results of linear investigation of HPLC method

表8 HPLC方法加樣回收考察結(jié)果Tab.8 Results of sample recovery of HPLC method

表9 白術(shù)提取方法驗(yàn)證結(jié)果Tab.9 Verification results of Atractylodes macrocephala Rhizoma extraction method

在供試樣品制備的提取過程中發(fā)現(xiàn)，超聲時(shí)間超過30min，蒼術(shù)酮的含量隨超聲次數(shù)增多反而降低。同時(shí)也有研究報(bào)道超聲時(shí)間越長，產(chǎn)熱量高，提取溶劑溫度上升明顯，高溫將影響白術(shù)內(nèi)在化學(xué)成分的穩(wěn)定性[9-10]。說明蒼術(shù)酮的溫度敏感性高，在長時(shí)間超聲的高溫狀態(tài)下蒼術(shù)酮分解轉(zhuǎn)化成別的成分，所以導(dǎo)致超聲時(shí)間超過30min后，其含量反而降低。

因?yàn)榘仔g(shù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)缺少含量測定項(xiàng)，這將影響白術(shù)的內(nèi)在質(zhì)量，因此本研究從白術(shù)供試樣品的制備方法考察，結(jié)合HPLC-DAD確定白術(shù)多指標(biāo)成分測定的方法，同時(shí)測定白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ、白術(shù)內(nèi)酯Ⅲ和蒼術(shù)酮4種成分，為白術(shù)的含量測定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立奠定前期研究基礎(chǔ)，從而進(jìn)一步完善白術(shù)藥典質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，提升白術(shù)藥材的質(zhì)量。