裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧生長性能、形體指標(biāo)及肌肉營養(yǎng)組成的影響

曾 娟 ， 高啟平 *， 任秀芳

（1.通威股份有限公司，四川成都 610041；2.水產(chǎn)健康養(yǎng)殖四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都 610041）

裂殖壺菌，又名裂殖壺藻，是一類富含n-3不飽和脂肪酸（DHA）且易于規(guī)模化培養(yǎng)的海洋真菌。因其富含多不飽和脂肪酸、色素、角鯊烯等多種生物活性成分，而被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖中（曾娟等，2015）。由于裂殖壺菌最早大規(guī)模應(yīng)用是作為魚油替代產(chǎn)品用于食品中，如嬰幼兒奶粉、保健品等（陳殊賢等，2013），從而導(dǎo)致目前其在國內(nèi)外水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究也主要聚集在裂殖壺菌油脂替代魚油方面 （潘瑜等，2016；Ganuza等，2008；Matthew 等，2007），而對其作為蛋白原料替代魚粉方面的研究鮮有報(bào)道。

雜交鱧是以烏鱧為父本，斑鱧為母本獲得的雜交子一代，與親本相比，具有肉質(zhì)好、無肌間刺、生長速度快、產(chǎn)量高、能攝食人工配合飼料等優(yōu)點(diǎn)，是目前餐桌上熱門的淡水魚類食品（王國霞，2019；鄒禮根等，2011）。因其飼料中魚粉用量較多，而近年魚粉價(jià)格居高不下，致使大量植物蛋白應(yīng)用其中，導(dǎo)致飼料適口性差，最終影響雜交鱧生長（林仕梅等，2018）。為此，本試驗(yàn)以雜交鱧為研究對象，研究膨化飼料中以裂殖壺菌替代魚粉對其生長性能、形體指標(biāo)和肌肉營養(yǎng)組成的影響，為裂殖壺菌在水產(chǎn)飼料中的規(guī)?；瘧?yīng)用和新型蛋白源的開發(fā)提供新思路和理論數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料 本試驗(yàn)所選用裂殖壺菌粉、魚粉的營養(yǎng)成分及含量見表1，其中裂殖壺菌粉由通威股份生產(chǎn)所得。試驗(yàn)以含24%魚粉的飼料為基礎(chǔ)飼料，分別在其基礎(chǔ)上添加0.0%、2.5%、5.0%、10.0%裂殖壺菌粉，以替代基礎(chǔ)飼料中0.0%、1.0%、2.0%、4.0%的魚粉，配制成4種等氮、等脂、等蛋氨酸、等賴氨酸的試驗(yàn)飼料，并分別記為S1（0.0%）、S2（2.5%）、S3（5.0%）、S4（10.0%）組，試驗(yàn)飼料的組成及營養(yǎng)水平見表2。所有飼料原料均過80目篩，用5.0 mm粒徑模板制成膨化飼料，烘干后備用。

表1 裂殖壺菌粉與魚粉的常規(guī)營養(yǎng)成分及氨基酸組成%

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選擇同一批體格健康、規(guī)格整齊的一冬齡雜交鱧720尾，初始均重約為567 g，隨機(jī)分為4組，分別投喂試驗(yàn)飼料S1（0.0%）、S2（2.5%）、S3（5.0%）、S4（10.0%），每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)45尾魚，飼養(yǎng)在室外池塘網(wǎng)箱（2 m×2 m×2 m）中。飼養(yǎng)周期為 8周。試驗(yàn)期間每日投喂2次（9:00和 17：00），日投喂量為其體重的1%～4%。試驗(yàn)期間平均水溫為26°C左右，溶氧濃度為5.0 mg/L以上，pH為8.0左右，氨氮濃度≤0.2 mg/L。

1.3 樣品制備與分析計(jì)算公式 飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束后，禁食24 h，以網(wǎng)箱為單位計(jì)雜交鱧尾數(shù)并稱總重，然后每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取3尾雄魚和3尾雌魚分別測定體重、體長，解剖取出內(nèi)臟，分離肝胰臟并稱重。雄魚去皮后，取大身中段肌肉混樣，測定肌肉營養(yǎng)組成。主要指標(biāo)計(jì)算與測定方法如下：

初始均重/（g/尾）=初始魚總重/初始魚尾數(shù)；

終末均重/g=終末魚總重/終末魚尾數(shù)；

表2 試驗(yàn)飼料組成及營養(yǎng)水平%

成活率/%=試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚尾數(shù)/試驗(yàn)開始時(shí)魚尾數(shù)×100；

增重率/%=（終末魚重+死亡魚重量－初始魚重量）/初始魚重量×100；

特定生長率/%=（ln終末均重量－ln初始均重量）/飼喂天數(shù)×100；

蛋白質(zhì)效率=試驗(yàn)魚增重/（試驗(yàn)魚飼料攝食量×飼料蛋白含量）；

飼料系數(shù)=投飼量/增重量；

肥滿度/%=（試驗(yàn)魚體重/試驗(yàn)魚體長3）×100；

臟體比/%=試驗(yàn)魚內(nèi)臟重/試驗(yàn)魚體重×100；

空腔比/%=空腔重（g）/體重（g）×100；

肝體比/%=試驗(yàn)魚肝臟重/試驗(yàn)魚體重×100。

肌肉的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分、氨基酸組成和脂肪酸組成按照國標(biāo)GB 5009.3-2016、GB 5009.5-2016、GB 5009.6-2016（第一法）、GB 5009.4-2016（第一法）、GB 5009.124-2016和 GB 5009.168-2016（第三法）方法測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 23.0對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），采用 Duncan’s進(jìn)行多重比較，檢驗(yàn)均值的差異顯著性，用P＜0.05表示，結(jié)果數(shù)據(jù)用“平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧生長性能的影響 由表3可知，經(jīng)過56 d的養(yǎng)殖試驗(yàn)，各組間的飼料系數(shù)、特定生長率、蛋白質(zhì)效率、增重率和存活率無顯著差異 （P＞0.05）。隨著裂殖壺菌用量的增加，飼料系數(shù)呈先下降后上升的趨勢，蛋白質(zhì)效率和增重率呈先上升后下降的趨勢，裂殖壺菌用量為5.0%時(shí)，生長性能開始低于對照組。

表3 試驗(yàn)飼料對雜交鱧生長性能及飼料蛋白質(zhì)效率的影響

2.2 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧形體指標(biāo)的影響 由表4可知，隨著裂殖壺菌用量的增加，在雄魚中，肥滿度先下降后上升，裂殖壺菌用量為5.0%時(shí)，肥滿度顯著低于其他各組（P＜0.05），其他各組間差異不顯著（P＞0.05）；臟體比和肝體比逐漸降低，空腔比逐漸升高，裂殖壺菌用量為10.0%時(shí)，臟體比顯著低于對照組，空腔比顯著高于對照組 （P＜0.05），各組間肝體比差異不顯著（P＞0.05）。在雌魚中，裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧肥滿度、臟體比、肝體比無顯著影響（P＞0.05）。

2.3 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧肌肉營養(yǎng)組成的影響 由表5可知，使用裂殖壺菌替代部分魚粉后，對雜交鱧肌肉水分、粗蛋白質(zhì)、粗灰分沒有明顯影響。其中，隨著裂殖壺菌用量的增加，粗脂肪含量呈先上升后下降再上升趨勢，當(dāng)裂殖壺菌用量為2.5%、10.0%時(shí)明顯高于對照組，用量為5.0%時(shí)含量最低。

表4 試驗(yàn)飼料對雜交鱧形體指標(biāo)的影響%

表5試驗(yàn)飼料對雜交鱧肌肉中常規(guī)營養(yǎng)成分的影響g/100 g

2.4 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧肌肉氨基酸和脂肪酸的影響 由表6可知，使用裂殖壺菌替代部分魚粉后，雜交鱧肌肉中賴氨酸、精氨酸、鮮味氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸、總氨基酸及必需氨基酸在總氨基酸中的占比含量均有略微提高。

由表7可知，隨著裂殖壺菌用量的增加，雜交鱧肌肉中總脂肪酸、飽和脂肪酸、單不飽和脂肪酸、多不飽和脂肪酸的含量均呈先上升后下降再上升趨勢，當(dāng)裂殖壺菌用量為5.0%時(shí)含量最低，使用裂殖壺菌組DHA含量均高于對照組。

3 討論

3.1 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧生長性能的影響 快速增長和低飼料系數(shù)是水產(chǎn)養(yǎng)殖的終極目標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，飼料中使用裂殖壺菌替代部分魚粉，對雜交鱧的生長性能無顯著影響，但當(dāng)替代用量超過5.0%時(shí)對生長性能有負(fù)面影響，說明一冬齡雜交鱧飼料中可以使用裂殖壺藻粉替代部分魚粉，但高水平替代具有局限性。裂殖壺菌富含DHA，而DHA是水產(chǎn)動(dòng)物生長必需但又無法自身合成的脂肪酸。已有研究表明，添加一定量的裂殖壺菌可提高斑點(diǎn)叉尾鮰、刺參、對蝦、鯉魚等的生長性能，可過量添加則會(huì)影響動(dòng)物的生長（劉宏超等，2016； 黃亮華等，2014； 焦建剛等，2014；Li等，2009）。本試驗(yàn)結(jié)果趨勢與上述研究成果一致。但因飼料配方、裂殖壺菌營養(yǎng)成分、魚種及規(guī)格等不同，則適宜替代用量不同。由表1可知，裂殖壺菌的粗蛋白質(zhì)、氨基酸、鈣、磷含量明顯低于魚粉，雖然平衡了粗蛋白質(zhì)、蛋氨酸、賴氨酸等主要營養(yǎng)指標(biāo)，但其他氨基酸、鈣、磷以及魚粉中的未知生長因子含量因魚粉的替代而下降，可能是影響生長的主要原因，潘瑜（2016）在海鱸上用裂殖壺菌替代魚油及李賢（2012）在泥鰍上用蠅蛆粉替代魚粉的研究結(jié)果也證明如此。

表6 試驗(yàn)飼料對雜交鱧肌肉中氨基酸的影響

3.2 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧形體指標(biāo)的影響 魚體的肥滿度是衡量魚體肥瘦程度和生長情況的一個(gè)指標(biāo)，同時(shí)也影響魚體的商品價(jià)值。肝體比則是評(píng)價(jià)魚體健康程度的重要指標(biāo)（王國霞等，2019）。雜交鱧性別不同，形體指標(biāo)差異較大。本研究結(jié)果顯示，飼料中使用裂殖壺菌替代部分魚粉，對雜交鱧雄魚的形體指標(biāo)有一定影響，對雌魚的影響不顯著。在雄魚中，除裂殖壺菌替代魚粉用量5.0%組外，其他各組肥滿度差異不顯著，并隨著裂殖壺菌替代用量的增加，臟體比和肝體比呈下降趨勢，其中10.0%組的臟體比、肝體比明顯低于其他各組，說明飼料中使用一定量的裂殖壺菌替代部分魚粉，對雜交鱧的形體指標(biāo)無顯著影響，甚至還有一定積極作用。裂殖壺菌富含n-3多不飽和脂肪酸，其能抑制脂類合成，促進(jìn)脂類分解，降低肝脂和血脂。馬晶晶（2009）、朱慶國（2012）等研究結(jié)果均表明飼料中高水平的n-3 PUFA可抑制魚體內(nèi)臟中脂肪的沉積，從而使肝體、臟體指數(shù)下降，與本研究結(jié)果一致。

表7 試驗(yàn)飼料對雜交鱧肌肉中脂肪酸的影響

3.3 裂殖壺菌替代魚粉對雜交鱧肌肉營養(yǎng)組成的影響 已有研究表明，飼料的營養(yǎng)組成密切影響魚體的營養(yǎng)組成，蛋白質(zhì)量、氨基酸及脂肪酸組成等均對脂肪在魚體內(nèi)的吸收和沉積有影響 （李賢等，2012）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著裂殖壺菌用量的增加，對雜交鱧肌肉中的水分、粗蛋白質(zhì)、粗灰分均沒有負(fù)面影響，粗脂肪、SFA、MUFA及PUFA的含量均呈先上升后下降再上升趨勢。當(dāng)裂殖壺菌用量為5.0%時(shí)，除DHA外，其余脂肪酸含量均低于對照組。說明在雜交鱧飼料中使用一定量的裂殖壺菌替代部分魚粉，對肌肉脂肪及其組成有一定影響，其中對PUFA尤其是DHA的沉積有一定積極作用。不飽和脂肪酸具有降血糖、調(diào)節(jié)血脂和降低膽固醇等作用，PUFA中的DHA更具有提高腦細(xì)胞的活性、增強(qiáng)記憶力和思維能力的作用（陳秀麗等，2016）。劉興旺（2007）研究結(jié)果表明，飼料中不同水平n-3 PUFA對軍曹魚肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分含量無顯著影響，但可促進(jìn)n-3 PUFA的積累。鐘國防（2016）研究結(jié)果也顯示，隨著對蝦飼料中添加裂殖壺菌的增加，肌肉中常規(guī)營養(yǎng)成分含量無顯著差異，就數(shù)值而言，粗脂肪含量趨勢與本試驗(yàn)結(jié)果一致，并且在脂肪酸組成中，PUFA含量也呈先上升后下降趨勢。這都與朱慶國（2012）的研究結(jié)論相符，n-3 PUFA可促進(jìn)魚體肌肉中脂肪的沉積，但可抑制內(nèi)臟中脂肪的沉積。與肝體指數(shù)變化也相對應(yīng)。

蛋白質(zhì)是肌肉的主要組成成分，而蛋白質(zhì)又是由氨基酸組成的，因此氨基酸的含量及組成決定了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)，從而決定了肌肉的品質(zhì)。試驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示，使用裂殖壺菌替代部分魚粉后，雜交鱧肌肉中粗蛋白質(zhì)、賴氨酸、精氨酸、鮮味氨基酸、必需氨基酸、非必需氨基酸及總氨基酸含量均高于對照組，而必需氨基酸在總氨基酸中的占比與對照組無差異，說明飼料中添加裂殖壺菌可以一定程度提高生魚肌肉中的營養(yǎng)指標(biāo)及其風(fēng)味，從而改善魚肉品質(zhì)，其原因可能與裂殖壺菌中的有關(guān)成分能促進(jìn)蛋白質(zhì)代謝有關(guān)，具體原因有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

在飼料中使用裂殖壺菌等氮、等脂、等蛋氨酸、等賴氨酸替代部分魚粉，對雜交鱧的生長性能無顯著影響，但能一定程度改善其肝體指數(shù)及肌肉品質(zhì)。綜合考慮各項(xiàng)指標(biāo)，建議替代魚粉用量不宜超過5.0%。