血清Hcy、ET-1聯(lián)合UACR檢測對(duì)子癇前期患者早期腎損傷的診斷價(jià)值*

趙 嵩，崔瑩瑩△，閆金菊，黎秀娥

(湖北省十堰市婦幼保健院：1.檢驗(yàn)科；2.婦科；3.產(chǎn)科，湖北十堰 442000)

子癇是一種妊娠特異性綜合征，是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦和胎兒病死率升高的主要原因，子癇前期的特征是妊娠20周后出現(xiàn)高血壓和蛋白尿[1-3]。近期的數(shù)據(jù)表明，同型半胱氨酸(Hcy)在先兆子癇發(fā)病中起到了關(guān)鍵作用。Hcy通過結(jié)合血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和胎盤生長因子而發(fā)揮作用，并抑制脈管系統(tǒng)中的VEGF/胎盤生長因子信號(hào)傳導(dǎo)[4]。Hcy還可以與VEGF形成無活性的異二聚體。妊娠大鼠Hcy的過度表達(dá)導(dǎo)致其出現(xiàn)血壓升高、蛋白尿和類似人類子癇前期的腎組織病變(腎小球內(nèi)皮增生癥)[5-6]。內(nèi)皮素-1(ET-1)作用于血管內(nèi)皮以調(diào)節(jié)血管張力，并通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡、白細(xì)胞黏附而發(fā)揮血管損害作用。ET-1以氨基酸形式被有效分泌[7-8]。有研究發(fā)現(xiàn)，大鼠腎小球足細(xì)胞中過度表達(dá)的ET-1誘導(dǎo)了高血壓和蛋白尿[9]。尿微量清蛋白/肌酐比值(UACR)是研究腎損傷的常規(guī)指標(biāo)[9-10]。目前較缺乏關(guān)于Hcy、ET-1聯(lián)合UACR檢測在子癇前期患者早期腎損傷診斷方面的研究，本研究擬探討血清Hcy、ET-1聯(lián)合UACR檢測對(duì)子癇前期患者早期腎損傷的診斷價(jià)值，為子癇前期患者早期腎損傷的診斷及治療提供臨床依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年3月至2019年3月于本院產(chǎn)科生產(chǎn)并有完整檔案的孕婦265例為研究對(duì)象，分為子癇前期組(86例)、妊娠高血壓組(92例)、健康對(duì)照組(87例)。子癇前期組[妊娠20周后，出現(xiàn)血壓升高和蛋白尿，并可出現(xiàn)頭痛、眼花、惡心、嘔吐、上腹不適等癥狀；妊娠20周后首次出現(xiàn)收縮壓≥140 mm Hg和(或)舒張壓≥90 mm Hg，尿蛋白≥0.3 g/24 h]孕婦的平均年齡為(28.23±4.93)歲，入組時(shí)孕周為(27.36±3.93)周；妊娠高血壓組[妊娠期首次出現(xiàn)高血壓，收縮壓≥140 mm Hg和(或)舒張壓≥90 mm Hg，于產(chǎn)后12周內(nèi)恢復(fù)正常，尿蛋白陰性，產(chǎn)后方可確診]孕婦的平均年齡為(28.78±4.81)歲，入組時(shí)孕周為(26.39±4.53)周；健康對(duì)照組(妊娠超過20周的單胎妊娠且沒有子癇、糖尿病、慢性高血壓或心血管疾病)孕婦的平均年齡為(28.84±4.47)歲，入組時(shí)孕周為(27.93±3.81)周。3組的年齡、孕周比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究通過本院倫理委員會(huì)審批，所有研究對(duì)象及家屬均簽署知情同意書。

1.2儀器與試劑 AU-480全自動(dòng)生化儀購自日本奧林巴斯公司；三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、肌酐(Scr)、磷(P)、鈣(Ca)、尿素氮(BUN)試劑盒購自中生北控生物科技有限公司；Tecan Infinite Pro全波長多功能酶標(biāo)儀購自瑞士帝肯公司；Hcy、ET-1、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)試劑盒購自美國R&D Systems公司。

1.3方法 各組研究對(duì)象于入院后第2天清晨空腹靜脈抽取5 mL血液置于普通采血管中，5 000 r/min，離心5 min，分離血清。采用AU-480全自動(dòng)生化儀測定TG、HDL-C、LDL-C、Scr、P、Ca、BUN水平。同時(shí)收集各組研究對(duì)象清晨中段尿10 mL，5 000 r/min，離心10 min，收集上清液，采用AU-480全自動(dòng)生化儀檢測尿微量清蛋白(U-mAlb)水平。Tecan Infinite Pro全波長多功能酶標(biāo)儀測定血清Hcy、ET-1、hs-CRP水平。收集各組研究對(duì)象入組時(shí)的身高、體質(zhì)量、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、收縮壓和舒張壓值。計(jì)算預(yù)估腎小球?yàn)V過率(eGFR)。

1.4腎損傷的判定 eGFR≥60 mL/(min·1.73m2)表示無腎損傷，eGFR<60 mL/(min·1.73m2)表示存在腎損傷。eGFR的計(jì)算公式：eGFR=Ccr×0.84×1.73/BSA，其中Ccr為肌酐清除率，Ccr(mL/min)=[(140-年齡)×體質(zhì)量(kg)×(0.85女性)]/(72×Scr)；BSA(m2)=0.007 184×體質(zhì)量(kg)×0.425×身高(cm)×0.725。

2 結(jié) 果

2.13組一般資料及血脂水平比較 妊娠高血壓組、子癇前期組的收縮壓、舒張壓高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，而3組體質(zhì)量、身高、BMI、TG、HDL-C、LDL-C水平比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 3組一般資料及血脂水平比較

2.23組Hcy、ET-1、UACR水平比較 子癇前期組Hcy、ET-1、UACR水平高于妊娠高血壓組、健康對(duì)照組(P<0.05)，妊娠高血壓組Hcy、ET-1、UACR水平高于健康對(duì)照組(P<0.05)。見表2。

表2 3組Hcy、ET-1、UACR水平比較

2.33組Scr、P、Ca水平比較 子癇前期組Scr、P、Ca水平高于妊娠高血壓組、健康對(duì)照組(P<0.05)，妊娠高血壓組Scr、P、Ca水平高于健康對(duì)照組(P<0.05)。見表3。

表3 3組Scr、P、Ca水平比較

2.43組BUN、eGFR、hs-CRP水平比較 子癇前期組BUN、hs-CRP水平高于妊娠高血壓組、健康對(duì)照組，eGFR低于妊娠高血壓組、健康對(duì)照組(P<0.05)。妊娠高血壓組BUN、hs-CRP水平高于健康對(duì)照組，eGFR低于健康對(duì)照組(P<0.05)。見表4。

表4 3組BUN、eGFR、hs-CRP水平比較

2.5Hcy、ET-1、UACR與各變量的相關(guān)性分析 Hcy、ET-1、UACR與Scr、P、Ca、BUN、hs-CRP呈正相關(guān)(P<0.05)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。見表5。

表5 Hcy、ET-1、UACR與各變量的相關(guān)性分析

2.6子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的多因素Logistic逐步回歸分析 以子癇前期患者是否發(fā)生早期腎損傷為因變量(是=1，否=0)，將單因素分析有意義的指標(biāo)作為自變量進(jìn)行多因素Logistic逐步回歸分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)高水平的Hcy、ET-1、UACR均為子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的危險(xiǎn)因素(OR=2.43、2.20、5.02，P<0.05)。見表6。

表6 子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的多因素Logistic逐步回歸分析

2.7ROC曲線分析 ET-1、Hcy、UACR三者的AUC相近，皆小于Hcy+ET-1+UACR(P<0.05)；ET-1、Hcy、UACR診斷子癇前期患者早期腎損傷的靈敏度、特異度相近(P>0.05)，皆小于Hcy+ET-1+UACR(P<0.05)。見表7。

表7 ROC曲線及靈敏度、特異度分析

3 討 論

Hcy是一種含硫氨基酸，是甲硫氨酸代謝轉(zhuǎn)化為半胱氨酸期間形成的甲基轉(zhuǎn)移產(chǎn)物，以S-腺苷甲硫氨酸和S-腺苷同型半胱氨酸為中間體。Hcy還可以重新甲基化為甲硫氨酸或代謝為胱氨酸[11]。在人體中，血漿Hcy水平約為10 μmol/L。血漿Hcy水平升高(>15 μmol/L)被稱為高同型半胱氨酸血癥，該病是由遺傳酶缺陷和(或)甲硫氨酸正常代謝被干擾引起的。酶或營養(yǎng)因子(包括葉酸、維生素B6和維生素B12)缺乏會(huì)影響Hcy代謝。血漿Hcy水平升高在慢性腎臟病患者中普遍存在，并且與較低的eGFR相關(guān)[12]。大量證據(jù)表明，Hcy與腎損傷進(jìn)展有關(guān)。有研究表明，局部氧化應(yīng)激、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)應(yīng)激與Hcy共同參與了子癇前期大鼠早期腎損傷機(jī)制[13]。Hcy是一種相對(duì)分子質(zhì)量較小的化合物，通過對(duì)子癇前期大鼠Hcy水平分析可知，Hcy可在腎小球中自由濾過并穿透腎小管細(xì)胞。一旦進(jìn)入腎小管細(xì)胞，Hcy將被代謝活化以形成谷胱甘肽綴合物，其被代謝為半胱氨酰-甘氨酸聚合物、半胱氨酸聚合物，最后代謝為反應(yīng)性硫醇。有研究報(bào)道，Hcy與半胱氨酰-甘氨酸N-乙酰半胱氨酸形成二硫化物，這種二硫化物的形成增加了Hcy的毒性[14]。

ET-1由內(nèi)皮細(xì)胞分泌，是一種有效的血管收縮劑。腎臟中的ET-1通過收縮血管的作用誘導(dǎo)腎血流量和eGFR的降低[15]。大鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明，ET-1在腎缺血期上調(diào)[16-17]，使用選擇性受體阻滯劑阻斷內(nèi)皮素可明顯減輕ET-1對(duì)腎臟的損害。近期研究發(fā)現(xiàn)，子癇前期腎損傷產(chǎn)生過量的活性氧(ROS)可被ET-1阻滯劑波生坦抑制[18]。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)表明，抑制腎小球內(nèi)皮細(xì)胞中ET-1的生成可降低ROS水平[19]。

UACR是評(píng)價(jià)腎損傷的重要指標(biāo)，已在眾多研究中被證實(shí)。本研究結(jié)果表明:子癇前期組Hcy、ET-1、UACR水平高于妊娠高血壓組、健康對(duì)照組，妊娠高血壓組Hcy、ET-1、UACR水平高于健康對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Hcy、ET-1、UACR與Scr、P、Ca、BUN、hs-CRP呈正相關(guān)，與eGFR呈負(fù)相關(guān)。這提示子癇前期早期腎損傷患者Hcy、ET-1、UACR水平升高，其升高程度與腎損傷程度密切相關(guān)。

子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的多因素Logistic逐步回歸分析顯示，高水平的Hcy、ET-1、UACR均為子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的危險(xiǎn)因素。ROC曲線分析顯示:ET-1、Hcy、UACR三者的AUC相近，皆小于Hcy+ET-1+UACR；ET-1、Hcy、UACR診斷子癇前期患者早期腎損傷的靈敏度、特異度相近，皆小于Hcy+ET-1+UACR。這說明高水平的Hcy、ET-1、UACR均為子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的危險(xiǎn)因素；血清Hcy、ET-1聯(lián)合UACR診斷子癇前期患者早期腎損傷具有較高的靈敏度、特異度，適宜在臨床上推廣應(yīng)用。

4 結(jié) 論

本研究探討了Hcy、ET-1聯(lián)合UACR檢測對(duì)子癇前期患者早期腎損傷的診斷價(jià)值。子癇前期早期腎損傷患者Hcy、ET-1、UACR水平升高，且與腎損傷程度密切相關(guān)；高水平的Hcy、ET-1、UACR均為子癇前期患者發(fā)生早期腎損傷的危險(xiǎn)因素。