4種狗母魚科魚類肌肉脂肪酸分析

莊海旗，劉江琴，崔 燎，羅 輝

( 1.廣東醫(yī)科大學(xué)，廣東天然藥物研究與開發(fā)實(shí)驗(yàn)室，廣東 湛江 524023； 2.廣東醫(yī)科大學(xué)，化學(xué)教研室，廣東 湛江 524023； 3.廣東醫(yī)科大學(xué)，海洋醫(yī)藥研究院，廣東 湛江 524023； 4.廣東醫(yī)科大學(xué)，湛江市環(huán)北部灣海洋微生物資源研究開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 湛江 524023 )

狗母魚科是燈籠魚總目，仙女魚目的一個(gè)科，全世界共有3亞科5屬47種。狗母魚廣泛分布于大西洋、印度洋和太平洋的溫?zé)崴?，大部分屬暖水性近底層魚類，是海洋底層沙地上的肉食性小型魚種。狗母魚科的許多種類是重要經(jīng)濟(jì)魚類資源，最高年產(chǎn)量超過1×104t，在中國的南海和東海均有分布，是南海常見的經(jīng)濟(jì)魚類。其中長(zhǎng)體蛇鯔(Sauridaelongate)和花斑蛇鯔(S.undosquamis)是南海漁場(chǎng)全年底拖網(wǎng)作業(yè)的兼捕對(duì)象之一[1-4]。海洋魚類富含多不飽和脂肪酸，尤其具有含量較高的長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸[5-6]，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，長(zhǎng)體蛇鯔的精制魚油中的二十碳五烯酸+二十二碳六烯酸含量為17.9%[7-8]，證明狗母魚富含多不飽和脂肪酸。廣東湛江海岸線占廣東省海岸線的46%，具有豐富的海洋魚類資源[9]，漁業(yè)中常捕獲大量狗母魚。鑒于海洋魚油含有大量人類所需的ω-3必需脂肪酸以及魚油中的二十二碳六烯酸和二十碳五烯酸在藥品、保健品及食品中的廣泛作用[10-13]，筆者測(cè)定湛江海域4種狗母魚科魚類脂肪酸組成，為海洋漁業(yè)資源的進(jìn)一步開發(fā)利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

分別于秋冬季節(jié)在廣東湛江霞山東風(fēng)市場(chǎng)4批次收集4種野生狗母魚科魚類(來源于湛江南山島附近海域)，經(jīng)鑒定為長(zhǎng)體蛇鯔、花斑蛇鯔、射狗母魚(Synodusjaculum)和準(zhǔn)大頭狗母魚(Trachinocephalusmyops)。將帶皮魚體去體表水分,去鱗皮，切取背部肌肉，置充N2玻璃干燥箱內(nèi)冷凍干燥備用。

21種混合標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯(等質(zhì)量比，美國Sigma公司出品)；其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

島津GC-2010型氣相色譜(配有GC-workstation工作站，日本島津公司)、AL204 電子天平(梅特勒—托利多上海儀器有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 魚體水分和粗脂肪酸的測(cè)定

水分測(cè)定用烘干失水法[14]、脂肪測(cè)定用索氏抽提法[15]。

1.3.2 魚肉脂肪酸甲酯化

將干燥后的4批次4種狗母魚肌肉分別研磨成細(xì)粉，混勻后稱取50 mg，加入2 mL 0.5%硫酸—甲醇溶液，水浴60 ℃加熱1 h，冷卻，分兩次加入2 mL正己烷，充分混和萃取，靜置分層，用吸管取上層清液至離心管內(nèi)加適量無水硫酸鈉吸附水分，得樣品溶液。

1.3.3 氣相色譜條件

DB-WAX色譜柱(30.0 m×0.25 mm×0.25 μm，J&W公司)；FID檢測(cè)器溫度250 ℃；進(jìn)樣口溫度250 ℃；色譜柱升溫程序：120 ℃保持1 min，以15 ℃/min幅度升至210 ℃，保持4 min，以3 ℃/min幅度升至240 ℃，保持10 min；載氣：N2，分流比100∶1；載氣流速為30 mL/min，樣品溶液和混合脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣5 μL。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析

每種脂肪酸的校正面積(Ai′)按下式計(jì)算:

Ai′=fi·Ai

式中，fi為校正因子(以標(biāo)準(zhǔn)棕櫚酸校正因子為1，各脂肪酸甲酯的校正因子分別以棕櫚酸的峰面積除其峰面積)。

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用 Excel 2003和IBM SPSS Statistics 20軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 狗母魚體成分測(cè)定

4種狗母魚體質(zhì)量范圍、體長(zhǎng)、水分及粗脂肪含量見表1。

表1 狗母魚體成分組成

2.2 標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯的保留時(shí)間及校正因子

21種標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯的保留時(shí)間及其峰面積校正因子見表2，準(zhǔn)大頭狗母魚肌肉相應(yīng)的脂肪酸甲酯氣相色譜圖見圖1。

表2 21種標(biāo)準(zhǔn)脂肪酸甲酯的保留時(shí)間及校正因子

圖1 準(zhǔn)大頭狗母魚肌肉脂肪酸甲酯總離子流色譜圖

2.3 4種狗母魚科魚肌肉中脂肪酸含量

將4種狗母魚肌肉中脂肪酸用校正峰面積歸一化法計(jì)算其相對(duì)含量，結(jié)果見表3。4種狗母魚科魚肌肉中可確定的脂肪酸有21種，其余保留時(shí)間7 min以上的物質(zhì)峰為復(fù)雜成分或某些脂肪酸異構(gòu)體，其總面積峰用∑不確定成分表示，其占總脂肪酸百分比為1.81%～4.45%。

由表3可見，飽和脂肪酸總含量為31.14%～42.16%。單不飽和脂肪酸總含量為11.73%～21.73%。多不飽和脂肪酸總含量為31.64%～55.32%。

表3 4種狗母魚肌肉脂肪酸含量(n=4) %

(續(xù)表3)

2.4 4種狗母魚肌肉脂肪酸相關(guān)性分析

對(duì)4種狗母魚肌肉中主要脂肪酸成分(含量>1%)通過IBM SPSS statistics 20軟件處理可得到各脂肪酸組分間的相關(guān)系數(shù)(表4)。

表4 各主要組分間的相關(guān)性分析結(jié)果

4種狗母魚科魚肌肉中肉豆蔻酸與棕櫚油酸(0.985)、肉豆蔻酸與油酸(0.853)、棕櫚酸與二十二碳五烯酸(ω-3)(0.958)、棕櫚油酸與油酸(0.854)、油酸與二十二碳五烯酸(ω-3)(0.909)呈顯著正相關(guān)；肉豆蔻酸與花生四烯酸(ω-6)(-0.877)、棕櫚油酸與花生四烯酸(ω-6)(-0.858)、肉豆蔻酸與二十二碳六烯酸(ω-3)(-0.919)，棕櫚油酸與二十二碳六烯酸(ω-3)(-0.915)、油酸與二十二碳六烯酸(ω-3)(-0.990)、二十二碳五烯酸(ω-3)與二十二碳六烯酸(ω-3)(-0.839)呈顯著負(fù)相關(guān)，其他脂肪酸間均不呈顯著相關(guān)關(guān)系。

2.5 4種狗母魚科魚肌肉脂肪酸的聚類分析

使用平均聯(lián)接(組間)的樹狀圖重新調(diào)整距離聚類合并對(duì)所測(cè)得的脂肪酸數(shù)據(jù)進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，結(jié)果見圖2。樹狀圖在距離5內(nèi)分成三組，第一組為長(zhǎng)體蛇鯔和花斑蛇鯔；第二組為準(zhǔn)大頭狗母魚；第三組為射狗母魚。

圖2 4種狗母魚科魚脂肪酸的聚類分析結(jié)果

3 討 論

狗母魚肌肉中主要飽和脂肪酸含量表現(xiàn)為棕櫚酸>硬脂酸>肉豆蔻酸，棕櫚酸含量在長(zhǎng)體蛇鯔、花斑蛇鯔和準(zhǔn)大頭狗母魚最高，而射狗母魚中棕櫚酸含量次于二十二碳六烯酸(ω-3)含量。狗母魚肌肉主要單不飽和脂肪酸總占比不高，其中油酸>棕櫚油酸，單不飽和脂肪酸可以起到降血糖，調(diào)節(jié)血脂，降膽固醇的功效[16]，油酸降低血清總膽固醇和低密度脂蛋白膽固醇的效果與亞油酸等多不飽和脂肪酸相當(dāng)，適量的攝入，可以防控突然性心血管病[17]。4種狗母魚的多不飽和脂肪酸含量較高，其總多不飽和脂肪酸含量多達(dá)31.64%～55.32%，故其脂肪酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值均較高。

魚油具有調(diào)節(jié)血脂、防止血液凝固、提高免疫力、提高記憶力和預(yù)防老年癡呆癥、治療糖尿病及抗癌等功效，魚油的這些功效來自于其含有的大量ω-3脂肪酸[18-19]。本試驗(yàn)表明，狗母魚科魚肌肉中，ω-3系脂肪酸含量(22.61%～45.55%)遠(yuǎn)高于ω-6系脂肪酸含量(4.49%～9.77%)，其∑ω-3∶∑ω-6為2.1～4.1，是富含多不飽和脂肪酸的食品。

一般魚油主要功效成分是二十二碳六烯酸(ω-3)和二十碳五烯酸(ω-3)，以及脂溶性維生素A和維生素D等[20]。4種狗母魚中多不飽和脂肪酸主要成分集中在二十二碳六烯酸(ω-3)和二十碳五烯酸(ω-3)，總量達(dá)17.45%～42.32%，是較好補(bǔ)充二十碳五烯酸(ω-3)和二十二碳六烯酸(ω-3)的食品來源[19-20]。本試驗(yàn)中，長(zhǎng)體蛇鯔肌肉的二十二碳六烯酸(ω-3)+二十碳五烯酸(ω-3)含量為27.50%，高于文獻(xiàn)[8-9]報(bào)道的長(zhǎng)體蛇鯔魚油中的含量(17.9%)。黃鰭金槍魚(Thunnusalbacares)是世界營(yíng)養(yǎng)學(xué)會(huì)推薦的三大營(yíng)養(yǎng)魚類之一[21-22]，花斑蛇鯔和射狗母魚肌肉中二十碳五烯酸(ω-3)+二十二碳六烯酸(ω-3)含量分別為30.49%和42.32%，其中射狗母魚的二十二碳六烯酸(ω-3)含量為34.84%，高于楊金生等[21-22]測(cè)定的黃鰭金槍魚肌肉二十二碳六烯酸含量(ω-3) (分別為28.84%和25.34%)，但低于羅殷等[23]測(cè)定的黃鰭金槍魚肌肉二十二碳六烯酸含量(ω-3) (39.17%)。但魚體中二十碳五烯酸(ω-3)+二十二碳六烯酸(ω-3)含量隨生活環(huán)境、食物鏈或季節(jié)的變化等因素影響，可能有所波動(dòng)[24-25]。

魚類脂肪酸成分可通過食物鏈和體內(nèi)的脂肪酸轉(zhuǎn)化進(jìn)行補(bǔ)充或增加，魚類具有將中長(zhǎng)鏈脂肪酸轉(zhuǎn)化為同系列更長(zhǎng)鏈的不飽和脂肪酸的能力[26-28]，中長(zhǎng)鏈脂肪酸可通過脫氫酶和延長(zhǎng)鏈酶或ω-3轉(zhuǎn)化酶轉(zhuǎn)化為長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸(圖3)。

圖3 長(zhǎng)鏈不飽和脂肪酸的轉(zhuǎn)化途徑

脂肪酸間呈正顯著相關(guān)性說明某一脂肪酸成分與另一脂肪酸成分有良好的線性關(guān)系，反之脂肪酸間呈負(fù)顯著相關(guān)性則說明兩種脂肪酸間有良好的負(fù)線性關(guān)系。4種狗母魚科魚類肌肉中肉豆蔻酸與棕櫚油酸、肉豆蔻酸與油酸、棕櫚酸與二十二碳五烯酸(ω-3)、棕櫚油酸與油酸、油酸與二十二碳五烯酸(ω-3)呈顯著正相關(guān)，表明它們二者間的含量隨著相同的因素增加而增加或隨著相同的因素減少而減少并達(dá)到平衡。脂肪酸間呈負(fù)顯著相關(guān)性，說明這兩種脂肪酸在魚體中通過代謝可快速互補(bǔ)達(dá)到平衡的關(guān)系，由表4的呈負(fù)顯著相關(guān)的脂肪酸可發(fā)現(xiàn)，油酸與二十二碳六烯酸(ω-3)、二十二碳五烯酸(ω-3)與二十二碳六烯酸(ω-3)之間均呈顯著負(fù)相關(guān)，提示這兩對(duì)脂肪酸間的負(fù)線性關(guān)系較明顯，而二十碳五烯酸(ω-3)與其他脂肪酸均不呈顯著相關(guān)，與文獻(xiàn)[26-30]所述(圖3)魚類中油酸代謝轉(zhuǎn)化至長(zhǎng)鏈脂肪酸二十碳五烯酸(ω-3)(轉(zhuǎn)化途徑較復(fù)雜)、二十二碳五烯酸(ω-3)和二十二碳六烯酸(ω-3)的關(guān)系相似。

4種狗母魚肌肉脂肪酸聚類分析的第一組是長(zhǎng)體蛇鯔和花斑蛇鯔(亦名點(diǎn)鰭蛇鯔[1])，均為蛇鯔屬魚類，其余第二組準(zhǔn)大頭狗母魚為大頭狗母魚屬魚類，第三組射狗母魚為狗母魚屬魚類，與文獻(xiàn)[1]報(bào)道的屬種分類一致。長(zhǎng)體蛇鯔和花斑蛇鯔在脂肪酸聚類圖上的距離很短，說明二者脂肪酸組成相似度較高，由于二者生物形態(tài)特征上較相似[1]，進(jìn)一步說明長(zhǎng)體蛇鯔和花斑蛇鯔的生物遺傳特性十分相似，提示生物形態(tài)相似的魚種其脂肪酸組成也相似。盡管本研究的狗母魚脂肪酸成分對(duì)科內(nèi)魚種可進(jìn)行聚類分析，但試驗(yàn)中僅收集和分析了4種狗母魚肌肉脂肪酸組成，其他種類尚有待進(jìn)一步的聚類研究。

由于本研究中4種狗母魚生長(zhǎng)環(huán)境，食物鏈不同等因素變化無法判斷，其對(duì)魚類體內(nèi)脂肪酸含量的影響無法估計(jì)，因此，本試驗(yàn)僅屬非特定樣本試驗(yàn)數(shù)據(jù)的探索性分析。