水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥研究概況

吳甘林，鄧玉婷，姜 蘭，譚愛萍，趙 飛，張瑞泉

( 1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院 珠江水產(chǎn)研究所，農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁用藥物創(chuàng)制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東省免疫技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東 廣州 510380； 2.上海海洋大學(xué) 水產(chǎn)與生命學(xué)院，上海 201306； 3.農(nóng)業(yè)部水產(chǎn)品質(zhì)量安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100141 )

喹諾酮類藥物是一種人工合成的抗菌藥物，這類抗菌藥都有喹諾酮環(huán)結(jié)構(gòu)，又稱吡酮酸類或吡啶酮酸類。喹諾酮類藥物能夠穿透細(xì)胞壁進(jìn)入細(xì)胞直接作用于DNA促旋酶(拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ)和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ[1]，通過抑制這兩種酶而阻斷DNA的復(fù)制，從而發(fā)揮抗菌作用[2]。由于這類藥物擁有抗菌譜廣、高效、用藥量低、給藥方便、毒副作用低和與其他抗菌藥物不產(chǎn)生交叉耐藥等優(yōu)點(diǎn)[3]，廣泛應(yīng)用于人醫(yī)臨床、畜牧水產(chǎn)養(yǎng)殖的細(xì)菌病治療中。目前喹諾酮類藥物主要用于治療水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物常見病原如氣單胞菌(Aeromonas)、弧菌(Vibrio)等引起的細(xì)菌性疾病[4]。其中第三代氟喹諾酮類藥物恩諾沙星是我國(guó)水產(chǎn)批準(zhǔn)使用的動(dòng)物專用藥物[5]，由于其在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)的半衰期長(zhǎng)、分布廣、吸收好及廣譜抗菌等特性而被廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物感染性疾病的預(yù)防和治療[6]。另外，諾氟沙星也是水產(chǎn)養(yǎng)殖上廣泛使用的藥物之一[6]，除了單方給藥外，常與鹽酸小檗堿成復(fù)方預(yù)混劑使用[5]。由于氟喹諾酮類藥物在畜牧水產(chǎn)養(yǎng)殖的廣泛應(yīng)用，耐藥性問題也越趨嚴(yán)重，為了減少該類藥物可能對(duì)養(yǎng)殖業(yè)、人體健康造成危害或者潛在風(fēng)險(xiǎn)，農(nóng)業(yè)部自2016年開始禁止將洛美沙星、培氟沙星、氧氟沙星和諾氟沙星4種氟喹諾酮類藥物用于食品動(dòng)物養(yǎng)殖[7]。

近年來，隨著喹諾酮類藥物長(zhǎng)期、大量、廣泛使用，導(dǎo)致人類、動(dòng)物及環(huán)境細(xì)菌喹諾酮類耐藥性不斷增強(qiáng)[8]。細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥機(jī)理主要有基因突變、膜對(duì)藥物的通透性改變、外排泵及質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥[1]。基因突變主要是改變藥物的作用靶位，突變發(fā)生后藥物丟失作用靶位而產(chǎn)生耐藥[9]。膜通透性改變及外排泵的存在可以使細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的藥物含量下降，藥物的抗菌活性便會(huì)降低[10]。在質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥被發(fā)現(xiàn)之前人們一直認(rèn)為細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物耐藥主要由染色體上的靶基因突變和細(xì)胞膜通透性改變所致，而近年來科學(xué)家們陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了各種質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥(PMQR)機(jī)制。由于質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因大多位于可移動(dòng)接合質(zhì)粒上，可通過整合子、轉(zhuǎn)座子、插入序列等耐藥元件進(jìn)行耐藥基因交換，從而加快喹諾酮類耐藥性在細(xì)菌之間的傳播。

隨著水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌喹諾酮類耐藥性的日益嚴(yán)重，因此有必要開展水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌喹諾酮類耐藥性的調(diào)查和加強(qiáng)質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因分子傳播機(jī)制研究，為減少喹諾酮類耐藥菌的產(chǎn)生和傳播提供理論依據(jù)。筆者將從質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥機(jī)制、水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物耐藥狀況及質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因的流行分布等方面進(jìn)行綜述，以期引起人們對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖中細(xì)菌耐藥性的重視，也為科研工作者對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖中細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物耐藥性的產(chǎn)生、流行及其傳播途徑的研究提供一定的研究思路。

1 質(zhì)粒介導(dǎo)喹諾酮類耐藥機(jī)制

質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因一般分為三大類，第一類是qnr基因及其不同的等位基因，包括qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qnrVC基因，第二類是能降低環(huán)丙沙星活性的氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶變異基因aac(6′)-Ib-cr，第三類是外排泵基因qepA和oqxAB[11]。

1.1 qnr基因

qnr基因在1998年由美國(guó)學(xué)者M(jìn)artínez等[12]首次報(bào)道，該基因發(fā)現(xiàn)于肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae)的一個(gè)耐藥質(zhì)粒pMG252上。qnr基因編碼五肽重復(fù)氨基酸序列五肽重復(fù)家族Qnr蛋白，由于后續(xù)發(fā)現(xiàn)新的變體，qnr被重新命名為qnrA和qnrA1，后續(xù)又有qnrB、qnrS、qnrC和qnrD等一系列質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮耐藥基因的報(bào)道。最近，一種新的qnr家族——qnrVC基因也陸續(xù)被報(bào)道，qnrVC基因最早在霍亂弧菌(Vibriocholerae)中檢出[13]，主要在海產(chǎn)品、水環(huán)境及腹瀉病人分離的弧菌中流行[14-16]，Qnr蛋白的作用機(jī)制是通過保護(hù)DNA促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ不受藥物的抑制，避免促旋酶、喹諾酮類藥物和DNA三者形成穩(wěn)定的復(fù)合物，進(jìn)而導(dǎo)致喹諾酮類藥物失效[17-18]。Martínez等[12]發(fā)現(xiàn)，攜帶了qnr基因質(zhì)粒的菌株其染色體自發(fā)突變的頻率增加了100倍，表明攜帶了qnr基因的質(zhì)?？梢源龠M(jìn)菌株染色體突變從而導(dǎo)致高水平喹諾酮類耐藥的產(chǎn)生。

1.2 aac(6′)-Ib-cr基因

2006年，美國(guó)學(xué)者Robicsek等[19]發(fā)現(xiàn)，氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶Aac(6′)-Ib發(fā)生了兩處氨基酸的突變，即Trp102Arg和Asp179Tyr，該突變引起大腸桿菌(Escherichiacoli)對(duì)環(huán)丙沙星的敏感性下降，因此將該突變體命名為Aac(6′)-Ib-cr，其中“-cr”表示環(huán)丙沙星耐藥。aac(6′)-Ib-cr基因編碼的滅活酶其作用位點(diǎn)是哌嗪環(huán)上的氨基氮“NH”，所以只乙?；Z酮類藥物中含有哌嗪環(huán)的環(huán)丙沙星和諾氟沙星，從而降低細(xì)菌對(duì)該藥物的敏感性[20]。據(jù)報(bào)道，aac(6′)-Ib-cr基因多位于多重耐藥質(zhì)粒的整合子上，少量位于染色體上，因此也將其歸為質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥機(jī)制[12]；aac(6′)-Ib-cr單獨(dú)存在時(shí)引起細(xì)菌對(duì)環(huán)丙沙星的最小抑菌濃度增加了3～4倍，比qnr基因介導(dǎo)的低，且對(duì)萘啶酸、左氧氟沙星等哌嗪環(huán)上的氨基已被甲基取代的喹諾酮類藥物不起作用[19]。由于該基因編碼的滅活酶可以同時(shí)介導(dǎo)氨基糖苷類和喹諾酮類耐藥，體現(xiàn)了細(xì)菌在抗菌藥物選擇壓力下的強(qiáng)適應(yīng)能力[11]。

1.3 qepA基因

喹諾酮類外排泵(qepA)是日本學(xué)者Yamane等[21]在2002年自住院病人尿液分離的大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的。qepA由14個(gè)跨膜區(qū)511個(gè)氨基酸組成，是一種質(zhì)子依賴型的外排泵蛋白，類似于環(huán)境放線菌的主要易化超家族(MFS)，可以降低對(duì)親水性氟喹諾酮類藥物如環(huán)丙沙星、諾氟沙星的敏感性。qepA基因檢出的報(bào)道較少，主要見于腸桿菌科，如大腸桿菌，也有在其他革蘭氏陰性菌上發(fā)現(xiàn)[11]。研究表明，IS26和ISCR3C耐藥元件有助于質(zhì)粒上的qepA基因的傳播[11]。

1.4 oqxAB基因

oqxAB作為一種多重藥物外排泵，屬于耐藥結(jié)節(jié)分化超家族(RND)外排泵，最初與用于豬的促生長(zhǎng)劑喹乙醇有關(guān)[22]。oqxAB基因具有廣泛的底物特異性，僅對(duì)氯霉素、甲氧芐啶、環(huán)丙沙星、諾氟沙星及萘啶酸具有敏感性[22]。由于它可以降低細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物的敏感性，且多位于耐藥質(zhì)粒上，后被歸入質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥機(jī)制家族[23]。oqxAB基因也主要在革蘭氏陰性菌檢出，廣泛存在于大腸桿菌中，尤其是動(dòng)物源腸桿菌科細(xì)菌檢出率較高[24]。oqxAB基因兩端通常都含有IS26-like序列，該元件促進(jìn)了oqxAB基因在菌株中的廣泛傳播[24]。

2 我國(guó)水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物耐藥狀況

目前雖然只認(rèn)為質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因只引起低水平耐藥(菌株對(duì)喹諾酮類藥物的敏感性下降，但最小抑菌濃度值未達(dá)到耐藥折點(diǎn))，但質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因的存在可促進(jìn)其他喹諾酮類耐藥機(jī)制如靶位基因突變、外排機(jī)制的發(fā)生，有助于菌株產(chǎn)生喹諾酮類藥物高水平耐藥(其最小抑菌濃度值高于耐藥折點(diǎn))[23]。隨著喹諾酮類藥物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的大量使用，水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌不可避免地產(chǎn)生了喹諾酮類耐藥。喹諾酮類耐藥菌的出現(xiàn)范圍正在擴(kuò)大，世界各地均不同程度地分離到相關(guān)耐藥菌。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者已在各種水產(chǎn)動(dòng)物病原菌如氣單胞菌、弧菌、鏈球菌(Streptococcus)、愛德華氏菌(Edwardsiella)，水產(chǎn)品食源性細(xì)菌如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、沙門氏菌(Salmonella)等中檢測(cè)到喹諾酮類耐藥。

關(guān)于喹諾酮類藥物的耐藥研究顯示，不同科屬細(xì)菌對(duì)各種喹諾酮類藥物的耐藥情況各有差異，不同地域、不同養(yǎng)殖品種對(duì)于喹諾酮藥類物耐藥情況也有不同。研究發(fā)現(xiàn)，在患病水產(chǎn)動(dòng)物上分離的病原菌對(duì)氟喹諾酮類的耐藥率為5%～80%，不同科屬的病原菌耐藥率差異較大。呂小麗等[25]采用紙片擴(kuò)散法對(duì)分離自廣西地區(qū)發(fā)病尼羅羅非魚(Oreochromisniloticus)的30株無乳鏈球菌(S.agalactiae)進(jìn)行藥物敏感性測(cè)定，結(jié)果顯示，分離菌株對(duì)不同喹諾酮類藥物的耐藥率差異較大，對(duì)依諾沙星的耐藥率最高，為80%，對(duì)諾氟沙星的耐藥率也達(dá)到40%，而對(duì)環(huán)丙沙星、氧氟沙星和左氟沙星的耐藥率均低于10%，對(duì)恩諾沙星和鹽酸沙拉沙星完全敏感。丁正峰等[26]于2006—2009年期間收集江蘇省境內(nèi)480株水產(chǎn)病原菌進(jìn)行菌種鑒定及耐藥率統(tǒng)計(jì)，其中弗尼斯弧菌(V.furniss)對(duì)4種氟喹諾酮類藥物(諾氟沙星、氧氟沙星、恩諾沙星和環(huán)丙沙星)的耐藥率為20%～50%，嗜水氣單胞菌(A.hydrophila)為45%～70%，類志賀鄰單胞菌(Plesimonasshigelloides)為65%～85%。林居純等[27]采用紙片擴(kuò)散法對(duì)分離自不同患病水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)的120株嗜水氣單胞菌進(jìn)行藥物敏感性測(cè)定，結(jié)果顯示，對(duì)諾氟沙星、環(huán)丙沙星和氧氟沙星的耐藥率分別為55%、40%和39%。譚愛萍等[28]將分離自廣東地區(qū)患病龜鱉的67株氣單胞菌同樣采用K-B紙片法測(cè)定其藥物敏感性，結(jié)果表明，此67株龜鱉源氣單胞菌對(duì)4種喹諾酮類藥物環(huán)丙沙星、諾氟沙星、恩諾沙星和氧氟沙星的耐藥率分別為19.40%、22.39%、41.79%和52.24%。Deng等[29]對(duì)分離自患病水產(chǎn)動(dòng)物的106株氣單胞菌進(jìn)行藥物敏感性測(cè)定，結(jié)果表明，龜鱉類、觀賞魚源的分離株對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥情況較養(yǎng)殖魚類和蝦類的嚴(yán)重。由此可見，一些經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高、養(yǎng)殖密度較大或工廠化養(yǎng)殖的品種如龜鱉類、特色經(jīng)濟(jì)魚類、觀賞魚等其分離的病原菌對(duì)氟喹諾酮類藥物的耐藥率比大宗淡水養(yǎng)殖魚類、養(yǎng)殖蝦類等的高，其耐藥率可達(dá)60%以上，這可能與在這些品種養(yǎng)殖周期長(zhǎng)、用藥頻繁等有關(guān)。

在喹諾酮類耐藥性研究中還發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)品中分離的食源性細(xì)菌及在無發(fā)病情況下采集的水產(chǎn)動(dòng)物、養(yǎng)殖環(huán)境樣品分離菌對(duì)氟喹諾酮類的耐藥率均偏低(10%以下)。付溥博等[30]采用藥敏紙片擴(kuò)散法對(duì)進(jìn)出口水產(chǎn)品中分離的320株副溶血性弧菌(V.parahaemolyticus)進(jìn)行藥敏測(cè)試，受試菌對(duì)萘啶酸、吡哌酸和諾氟沙星3種喹諾酮藥物的耐藥率均不超過3%。Jiang等[31]采用瓊脂稀釋法測(cè)定了市場(chǎng)采集分離的魚源大腸桿菌的敏感性，結(jié)果顯示，只有4.1%的菌株對(duì)環(huán)丙沙星耐藥。劉穎等[32]對(duì)46株金黃色葡萄球菌水產(chǎn)品分離株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，結(jié)果顯示，受試菌對(duì)環(huán)丙沙星的耐藥率為4.3%。馮永永等[33]在廣東5個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)分離到317株氣單胞菌(均分離自未發(fā)病魚及其養(yǎng)殖環(huán)境)，其對(duì)氟喹諾酮類藥物較敏感，對(duì)環(huán)丙沙星、諾氟沙星和恩諾沙星的耐藥率分別為14%、11%和3%。

目前我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖中細(xì)菌對(duì)不同喹諾酮類藥物的耐藥率各有差異，第一代和第二代的喹諾酮類藥物的耐藥性較高(對(duì)萘啶酸的耐藥率超過60%)，而對(duì)氟喹諾酮類藥物仍較敏感，但是近幾年來氟喹諾酮類耐藥性已呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì)，喹諾酮類藥物的耐藥風(fēng)險(xiǎn)仍不容小覷[34]。在缺乏對(duì)喹諾酮類藥物使用的有效管理措施下，若出現(xiàn)大量不合理使用喹諾酮類藥物的狀況，那勢(shì)必會(huì)出現(xiàn)水產(chǎn)動(dòng)物致病菌對(duì)喹諾酮類藥物產(chǎn)生更加嚴(yán)重的耐藥性，給水產(chǎn)動(dòng)物的細(xì)菌性病害防治帶來難題，同時(shí)也會(huì)嚴(yán)重影響水產(chǎn)品的質(zhì)量安全。

3 水產(chǎn)動(dòng)物源細(xì)菌質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因研究概況

自1998年質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因發(fā)現(xiàn)以來，國(guó)內(nèi)外對(duì)此耐藥基因的研究逐漸增多。各項(xiàng)研究顯示，質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因在世界各地均有發(fā)現(xiàn)，其分布廣泛且種類豐富，已報(bào)道的包括qnrA、qnrB、qnrC、qnrD、qnrS、qnrVC、qepA、aac(6′)-Ib-cr和oqxAB 9種基因，還有一系列基因亞型[12]。關(guān)于水產(chǎn)養(yǎng)殖源質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥的研究正處于起步階段，目前在水產(chǎn)動(dòng)物和水(海)產(chǎn)品上檢出的質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因型主要包括qnrA、qnrB(qnrB1、qnrB17、qnrB20)、qnrD1、qnrS(qnrS1、qnrS2、qnrS5)、qnrVC(qnrVC4、qnrVC6、qnrVC7)、aac(6′)-Ib-cr及oqxAB(表1)。其中，qnrS2和aac(6′)-Ib-cr在氣單胞菌和大腸桿菌中檢出頻率最高，在各類水產(chǎn)動(dòng)物中流行廣泛[28,39,33,35-53]。qnrVC是弧菌特有的質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因型，主要在弧菌中流行[14-16]。據(jù)已報(bào)道文獻(xiàn)，質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因主要在一些特色經(jīng)濟(jì)魚類如羅非魚、虹鱒(Oncorhynchusmykiss)、鰻鱺(Anguillajaponica)等，觀賞魚如錦鯉(Cyprinuscarpiokoi)、熱帶魚及龜鱉動(dòng)物分離的細(xì)菌中檢出。在上述文章中也提到[28-29]，這些水產(chǎn)動(dòng)物源的分離菌株對(duì)喹諾酮類藥物的耐藥率相對(duì)于其他品種高，可能與這些水產(chǎn)動(dòng)物的養(yǎng)殖模式、養(yǎng)殖周期、用藥習(xí)慣等密切相關(guān)。

在喹諾酮類藥物的選擇壓力下，質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因可通過質(zhì)粒、整合子等耐藥元件在不同種細(xì)菌間交換傳遞，對(duì)細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生和擴(kuò)散起著重要的作用。隨著測(cè)序技術(shù)的提高和廣泛應(yīng)用，不少學(xué)者開始從質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥陽(yáng)性質(zhì)粒的序列特征上揭示這些耐藥基因產(chǎn)生及傳播的機(jī)制。2011年，印度學(xué)者M(jìn)ajumdar等[35]首次對(duì)自魚源嗜水氣單胞菌分離的攜帶qnrS2的耐藥質(zhì)粒pBRST7.6進(jìn)行全序列測(cè)序，該質(zhì)粒大小7621 bp，IncQ型，含有6個(gè)開放閱讀框(ORF)、5個(gè)編碼序列(CDS)，qnrS2位于編碼orf6的開放閱讀框中。西班牙學(xué)者M(jìn)arti等[36]對(duì)自水環(huán)境分離菌株中提取的一個(gè)多重耐藥質(zhì)粒pP2G1進(jìn)行全序列分析，發(fā)現(xiàn)其質(zhì)粒同時(shí)攜帶兩個(gè)質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因qnrS2和aac(6′)-Ib-cr，并且aac(6′)-Ib-cr還位于Ⅰ類整合子的基因盒陣列中。另外，馮永永等[33]也發(fā)現(xiàn)，aac(6′)-Ib-cr可單獨(dú)或與利福平耐藥基因arr3位于同一個(gè)Ⅰ類整合子基因盒陣列中。已有報(bào)道顯示，qnrS2多位于IncQ和IncU等可接合質(zhì)粒上[35,43,46,52]，也可位于非接合性ColE型質(zhì)粒上[47]。有報(bào)道表明[15,31,44,48,50-51]，質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因與其他類藥物的耐藥基因如四環(huán)素類耐藥基因、β內(nèi)酰胺類耐藥基因、氨基糖苷類耐藥基因、磺胺類耐藥基因等共同存在同一質(zhì)?；蛘献踊蚝兄?，從而增強(qiáng)細(xì)菌多重耐藥的發(fā)生，這大大提高了臨床對(duì)患病水產(chǎn)動(dòng)物治療難度，而且給水產(chǎn)品的質(zhì)量安全帶來風(fēng)險(xiǎn)，不僅是水產(chǎn)養(yǎng)殖面臨的挑戰(zhàn)，也是關(guān)系到我們每個(gè)人生命健康的重要問題。

4 小結(jié)與展望

從發(fā)現(xiàn)至今，喹諾酮類藥物已廣泛應(yīng)用于水產(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌病的治療[6,54-55]，隨之而來的是水產(chǎn)動(dòng)物病原菌對(duì)喹諾酮類藥物產(chǎn)生的耐藥性問題；而食源性細(xì)菌如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌，雖然不是水產(chǎn)動(dòng)物的病原菌，但也可在水產(chǎn)品中分離到，可能與養(yǎng)殖、加工、流通等環(huán)節(jié)有關(guān)，食源性細(xì)菌的耐藥性問題在近年來已經(jīng)逐漸受到人們的重視。由于耐藥菌和耐藥基因可在不同細(xì)菌不同環(huán)境介質(zhì)中交換傳遞，也可通過食物鏈傳遞給人類，因此水產(chǎn)動(dòng)物中存在的耐藥菌和耐藥基因風(fēng)險(xiǎn)均對(duì)食品安全和人類身體健康產(chǎn)生潛在危害[56]。

由于水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物的種類繁多、個(gè)體差異較大和特殊的生長(zhǎng)環(huán)境等原因致使科研工作者對(duì)于喹諾酮類藥物藥效動(dòng)力學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)的研究很難覆蓋到所有的水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物，這就導(dǎo)致當(dāng)相應(yīng)的病害發(fā)生時(shí)，對(duì)喹諾酮類藥物的使用缺乏全面的科學(xué)用藥指導(dǎo)。世界范圍內(nèi)每年都會(huì)有大量的喹諾酮類藥物用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，當(dāng)喹諾酮藥物在水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)代謝不完全時(shí)，在環(huán)境壓力的選擇下會(huì)促進(jìn)細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生。這便要求科研工作者更加嚴(yán)格地掌握各種疾病的適應(yīng)癥，對(duì)比該藥物的藥效動(dòng)力學(xué)及藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，提供最適合的藥物使用量與使用的間隔時(shí)間，以保證有效治療疾病的同時(shí)減少喹諾酮類藥物的排出和在動(dòng)物體內(nèi)的殘留，從而減少細(xì)菌對(duì)喹諾酮類藥物產(chǎn)生抗藥性的可能。總之，科學(xué)合理地使用抗菌藥物是減少喹諾酮類藥物耐藥性產(chǎn)生的重要措施之一。

質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥是細(xì)菌對(duì)喹諾酮藥物產(chǎn)生耐藥性的重要途徑之一，由于質(zhì)粒擁有特殊的水平轉(zhuǎn)移機(jī)制使其耐藥性的傳播更為便捷，而且一般攜帶質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥基因的菌株初期僅對(duì)喹諾酮類藥物表現(xiàn)為低水平耐藥，因此此類耐藥很難通過表型檢測(cè)；但通過逐步累積或者偶聯(lián)協(xié)同其他耐藥機(jī)制則會(huì)產(chǎn)生高水平的耐藥。因此，有必要建立完善的質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮耐藥機(jī)制的檢測(cè)方法，采用PCR等分子生物學(xué)手段對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)以及養(yǎng)殖場(chǎng)附近環(huán)境進(jìn)行監(jiān)測(cè)。另外，應(yīng)開展質(zhì)粒介導(dǎo)的喹諾酮類耐藥發(fā)生及傳播機(jī)制的研究，給出相應(yīng)避免耐藥的方法，如研發(fā)新型藥物來破壞和消除喹諾酮耐藥類相關(guān)的基因或蛋白等，避免喹諾酮類耐藥的傳播。

總之，要在自身的思想觀念上重視水產(chǎn)養(yǎng)殖細(xì)菌喹諾酮類耐藥現(xiàn)象，科學(xué)、合理地使用喹諾酮類藥物，同時(shí)大力開展喹諾酮類耐藥機(jī)制的研究，減少喹諾酮類耐藥性的傳播，也要加強(qiáng)新型抗菌藥物的研發(fā)，從多方面減少喹諾酮類耐藥性的產(chǎn)生，以降低其對(duì)人類健康及自然環(huán)境的潛在危害。