復發(fā)性流產(chǎn)患者抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體、抗核抗體表達及意義

何媛

（江西省九江學院附屬醫(yī)院檢驗科，九江 332000）

復發(fā)性流產(chǎn)是婦產(chǎn)科常見的一種疾病,按照我國2016年最新診斷標準定義為婦女與同一伴侶妊娠后3次或以上妊娠28周前胎兒丟失[1]。由于其預后較差,嚴重影響患者心理健康和加重家庭負擔。復發(fā)性流產(chǎn)的病因包括免疫、遺傳疾病、內分泌、感染、子宮解剖及男性配偶、血栓前狀態(tài)等因素，其中最主要影響因素是免疫方面[2]?；颊呙庖弋惓３０殡S一些自身抗體的檢出，如ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA等。本研究通過檢測復發(fā)性流產(chǎn)患者體內 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA 表達水平，探討三者與復發(fā)性流產(chǎn)的關系，為臨床提供指導。

1 資料與方法

1.1 研究對象 選擇2015年1月-2019年10月在我院婦科、產(chǎn)科門診及住院的復發(fā)性流產(chǎn)患者146例，年齡 22-39 歲，平均年齡（29±3.2）歲，均符合2016年我國《復發(fā)性流產(chǎn)診治的專家共識》中定義標準[1]，且排除生殖解剖異常、生殖道感染、內分泌激素異常和遺傳因素引起的流產(chǎn)，夫婦外周血染色體正常。健康對照組為我院同期正常孕婦，年齡20-37 歲，平均年齡（28±2.9）歲，檢查排除心、腎、肺、肝等器質性疾病和糖尿病、高血壓病、各種腫瘤、炎癥和自身免疫性疾病等。各組年齡、性別等一般資料差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有待測者清晨空腹抽靜脈血5ml，血液凝固后以轉速3000r/min離心5min，分離出血清。

1.2.2 檢測方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測IgGACA、β2-GPΙ-Ab，試劑使用德國human公司生產(chǎn)，嚴格按照操作說明書操作，并繪制標準曲線，計算出濃度。其中IgG-ACA>48 U/ml為陽性，β2-GP Ι-Ab>5 U/ml為陽性。采用間接免疫熒光法檢測ANA，使用德國歐蒙公司生產(chǎn)的試劑，嚴格按照操作說明書進行操作。 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA第一次檢測結果為陽性者，2周后再次采樣復檢，仍為陽性者則確診 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA為陽性。

1.3 統(tǒng)計學處理 采用SPSS18.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計數(shù)資料以[n（%）]表示，組間比較采用卡方檢驗；計量資料采用均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 各組中 IgG-ACA、β2-GP Ι-Ab、ANA 陽性表達 復發(fā)性流產(chǎn)組ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA陽性率分別為33.6%、26.0%、39.0%，均高于健康對照組，且差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 各組中IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA陽性數(shù)(陽性率)n(%)

2.2 不同流產(chǎn)次數(shù)患者中IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab含量和ANA陽性表達 復發(fā)性流產(chǎn)患者中，流產(chǎn)數(shù)＞3次組患者 IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab血清含量水平均比流產(chǎn)3次組患者要高，差異均具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。但兩組患者ANA陽性率相比，差異不具有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表2。

表2 不同流產(chǎn)次數(shù)患者與IgG-ACA、β2-GPΙ-Ab含量和ANA陽性表達

3 討論

復發(fā)性流產(chǎn)為臨床上育齡婦女常見的妊娠并發(fā)癥之一，在我國，其發(fā)生率約為3%[3]。在其眾多發(fā)病病因中，主要是免疫因素，而免疫因素包括自身免疫因素和同種免疫因素，其中以自身免疫因素更為常見[4]。亦有學者認為，自身免疫異常與生殖失敗密切相關，推測復發(fā)性流產(chǎn)患者體內可能存在某些潛在因素，導致自身免疫失調，稱為“亞臨床自身免疫疾病”或“生殖關聯(lián)自身免疫異常綜合癥”[5]。自身抗體包括抗磷脂抗體、抗核抗體等?？沽字贵w是抗磷脂綜合征標志性抗體，它和血栓形成、反復流產(chǎn)等相關，主要包括ACA、β2-GPΙ-Ab、狼瘡抗凝物。其中在復發(fā)性流產(chǎn)中研究最多的是ACA，其次為β2-GPΙ-Ab。本研究主要分析ACA、β2-GPΙ-Ab、ANA 三種自身抗體與復發(fā)性流產(chǎn)的關系。

ACA是一種具有抗原性的磷脂，其主要靶抗原有β2-GPΙ、凝血酶原、蛋白C、膜聯(lián)蛋白V及高分子量激肽原等。除了報道表明ACA與女性不孕癥密切相關外[6]，近年來研究表明ACA是引起反復流產(chǎn)、死胎等不良妊娠結局最主要的自身抗體。ACA包括IgA、IgG、IgM型或該三型免疫球蛋白的混合物。其中IgG型ACA半衰期長，免疫調理作用強，在免疫應答中發(fā)揮主要作用，故本研究中主要是檢測IgG型ACA。本研究中，復發(fā)性流產(chǎn)組ACA陽性率為33.6%，顯著高于健康對照組陽性率，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。陳玉閣[7]報道在發(fā)復自然流產(chǎn)患者中ACA陽性率為37.97%，而對照組陽性率為3.84%。而王筱[8]檢測復發(fā)性流產(chǎn)患者ACA陽性率為12.5%，和對照組相比，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。可見ACA陽性率在復發(fā)性流產(chǎn)患者中有一定差異。此外，本研究還發(fā)現(xiàn)復發(fā)性流產(chǎn)患者流產(chǎn)次數(shù)>3次組ACA水平含量高于流產(chǎn)三次組，這和何全利[9]等報道相符。故推測ACA與復發(fā)性流產(chǎn)相關。關于ACA導致流產(chǎn)的機制，可能為ACA可誘導血小板聚集和粘附，形成微血栓和血管收縮，引起胎盤血流量減少和胎兒缺氧，最終導致流產(chǎn)；還可能為ACA作用于滋養(yǎng)層表面的磷脂依賴抗原，導致合體滋養(yǎng)層細胞形成不足，從而使子宮難于接受胚胎，減少維持妊娠的胎盤激素如人絨毛膜促性腺激素、胎盤生乳素分泌。

β2-GPΙ-Ab是一種糖蛋白，由細胞產(chǎn)生。其作為抗心磷脂抗體和磷脂結合的輔助因子在抗磷脂綜合征中起重要作用[10]。有研究認為，β2-GPΙ-Ab比ACA更具有特異性，是抗磷脂綜合征患者復發(fā)性流產(chǎn)的獨立危險因素[11]。Betts NA[12]等實驗證明β2-GPΙ-Ab能抑制內源性凝集通路和血小板凝血酶原酶活性，導致血栓，引發(fā)流產(chǎn)。還有研究認為β2-GPΙ-Ab可通過損傷滋養(yǎng)細胞，形成血栓，干擾受精卵著床，導致流產(chǎn)[13]。陳華干[14]等研究發(fā)現(xiàn)復發(fā)性流產(chǎn)人群β2-GPΙ-Ab陽性率高于正常人群。本研究亦發(fā)現(xiàn)復發(fā)性流產(chǎn)組β2-GPΙ-Ab陽性率為26.0%，高于健康對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。同時，本研究中復發(fā)性流產(chǎn)患者流產(chǎn)次數(shù)>3次組β2-GPΙ-Ab水平含量高于流產(chǎn)三次組差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。進一步說明β2-GPΙ-Ab可幫助預測復發(fā)性流產(chǎn)事件發(fā)生。

ANA廣義定義是一組以真核細胞的細胞內所有成分（包括細胞核、細胞漿、細胞骨架、細胞分裂周期蛋白等）為靶抗原所檢測的自身抗體的總稱。是臨床自身抗體疾病最常見的篩查指標。本研究中復發(fā)性流產(chǎn)組ANA陽性率為39.0%，高于健康對照組的2.7%，差異具有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。但發(fā)現(xiàn)其陽性率與復發(fā)性流產(chǎn)患者的流產(chǎn)次數(shù)不相關，這兩研究結果和王筱[8]的結果相符。亦有研究報道ANA的出現(xiàn)與下次妊娠中妊娠丟失風險相關[15]。關于ANA導致復發(fā)性流產(chǎn)機制，目前認為因復發(fā)性流產(chǎn)女性自身免疫功能失調，導致自身抗體的抗原抗體復合物增多，但尚未能診斷為自身免疫性疾病。ANA陽性提示可能發(fā)生自身免疫激活，促進免疫復合物沉著于蛻膜血管表面，損傷蛻膜血管，導致早期胎盤發(fā)育障礙，引發(fā)流產(chǎn)[16]。

綜上所述，抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體、抗核抗體與對于復發(fā)性流產(chǎn)密切相關。復發(fā)性流產(chǎn)患者流產(chǎn)次數(shù)越多，抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體含量越高。臨床工作中可聯(lián)合檢測抗心磷脂抗體、抗β2糖蛋白Ι抗體和抗核抗體對復發(fā)性流產(chǎn)患者進行篩查，幫助醫(yī)生及早進行干預治療，提高患者妊娠成功率。