前列腺特異抗原、增殖細胞核抗原與前列腺癌臨床特征相關(guān)性分析

郭苒

（河南科技大學第一附屬醫(yī)院檢驗科，洛陽 471000）

前列腺癌一種男性常見惡性腫瘤[1]，占據(jù)男性泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤第2位，且發(fā)病趨勢具有明顯的地域特點，即農(nóng)村高于城市。目前關(guān)于前列腺癌發(fā)生機制尚未完全明確，可能與遺傳、慢性炎癥反應、致癌基因等密切相關(guān)[2]。血清前列腺特異抗原（PSA）是診斷前列腺癌重要參考指標，但敏感度及特異度較低，容易造成假陽性。增殖細胞核抗原（PCNA）僅存在于正常的增殖細胞及腫瘤細胞中，是一種特異性的核酸蛋白，能較好地反映細胞增殖狀態(tài)。已有文獻證實PCNA在診斷惡性腫瘤上有重要價值[4]。本研究通過檢測其血清PSA、PCNA水平，探討兩者與良性前列腺癌患者臨床癥狀的關(guān)系。現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取我院2017年1月-2018年12月收治的前列腺癌患者100例，年齡55-81歲，平均年齡（62.8±3.14）歲，病程 1-4 年，平均病程（2.51±0.25）年；分化程度：低分化 38 例、中分化49例、高分化13例。臨床Jewett-Whitmore-Prout分期：A期51例、B期30例、C期19例，將其納入觀察組。另選同期確診的100例良性前列腺增生患者，年齡 55-80 歲，平均年齡（62.84±3.17）歲，病程1-5年，平均病程（2.58±0.27）年，將其納入對照組。兩組患者的年齡及病程差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。診斷標準:符合WHO制定的前列腺癌或良性前列腺增生癥相關(guān)診斷標準[6]。納入標準：⑴知情同意；⑵自愿參加；⑶病理確診。排除標準：⑴合并其他惡性腫瘤患者；⑵認知功能障礙患者；⑶嚴重感染患者；⑷免疫功能紊亂患者。

1.2 方法 于入院次日抽取患者空腹肘靜脈血3ml，離心處理后留下血清。采用微粒子免疫分析法檢測患者血清PSA水平。PSA正常參考值≤5.0ng/mL。將所得數(shù)據(jù)按照≤10ng/mL為1級；10-20 ng/mL（含 20 ng/mL）為 2 級；20-50 ng/mL（含 50 ng/mL）為3級；50 ng/mL以上為4級進行統(tǒng)計。

采用免疫組化染色法檢測患者血清PCNA表達情況。方法是采用細針抽取病變組織，10%甲醛固定標本，常規(guī)切片后采用石蠟包埋，采用PCNA鼠抗人單克隆抗體處理標本。PCNA表達判定：PCNA陽性表達著色主要分布在胞質(zhì)，顯示為棕黃色顆粒。每片標本需連續(xù)隨機觀察10個高倍視野，每個視野連續(xù)讀取500-10000個細胞，獲取表達平均值。所得結(jié)果參考陽性細胞所占總細胞數(shù)量的比重進行解讀。陰性（-）：陽性細胞比重低于20%；弱陽性 （+）：陽性細胞比重在20%-50%；陽性（++）：陽性細胞比重在 51%-70%；強陽性（+++）：陽性細胞比重大于70%。

1.3 統(tǒng)計學方法 所有數(shù)據(jù)資料使用SPSS28.00軟件分析，計量資料以（±s）形式表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以百分比（%）表示，組間比較采用χ2檢驗；等級資料的組間比較采用秩和檢驗；采用Spearman相關(guān)進行關(guān)聯(lián)分析。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義，

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血清PSA、PCNA表達情況比較 觀察組與對照組的血清PSA、PCNA表達差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表1 。

表1 兩組患者血清PSA、PCNA表達情況比較（n）

2.2 血清PSA分級與前列腺癌臨床特征分析 結(jié)果顯示，PSA分級與年齡及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān) （P>0.05），與組織分化程度、臨床分期有關(guān)（P<0.05），見表2。

表2 血清PSA分級與前列腺癌患者臨床特征的關(guān)系分析（n）

2.3 PCNA表達與前列腺癌臨床特征分析 結(jié)果顯示，PCNA表達與前列腺癌患者年齡無關(guān) （P>0.05），與組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)（P<0.05），見表3。

表3 PCNA表達與前列腺癌患者臨床特征的關(guān)系分析（n）

2.4 血清PSA、PCNA在前列腺癌患者中的相關(guān)性分析 結(jié)果顯示，血清PSA分級與PCNA表達呈正相關(guān)（P<0.05），見表4。

3 討論

表4 前列腺癌患者血清PSA和PCNA的相關(guān)性分析

前列腺癌發(fā)病率較高[7],臨床表現(xiàn)為下腹疼痛、尿不盡等，嚴重影響患者生活質(zhì)量及生命健康。血清PSA是前列腺上皮特異性標記物，與前列腺癌分化程度呈正相關(guān)。血清PSA相對分子質(zhì)量為35000[8]，含有343個氨基酸的糖蛋白，主要由前列腺上皮細胞產(chǎn)生。正常情況下富含PSA的前列腺體的腺泡與淋巴系統(tǒng)間存在內(nèi)皮構(gòu)成的屏障，很少會通過淋巴系統(tǒng)進入血液循環(huán)。所以正常機體的外周血中PSA濃度很低。PCNA是一種酸性核蛋白，與細胞增殖關(guān)系密切。PCNA是細胞核內(nèi)DNA所必需的一種核蛋白，在靜止期的細胞中含量較少，可對DNA復制起到調(diào)節(jié)作用，是反映細胞增殖的重要生物學指標。馬玉姍等[9]發(fā)現(xiàn)，PCNA在前列腺癌組織中陽性表達少于正常組織，血清PSA水平則高于正常組織。PCNA作為細胞增生活性研究的生物標記物可用于常規(guī)病理組織研究，且臨床價值較大。PCNA染色陽性部位在細胞核，其含量多少克反應細胞DNA復制的活躍程度。梅傲冰等[10]將血清PSA水平進行分級后發(fā)現(xiàn)，血清PSA分級與PCNA陽性表達呈正相關(guān)。PCNA用于泌尿系腫瘤時間不長，與腫瘤分級、分期的關(guān)系有待進一步研究。

本研究分別采用微粒子免疫分析法檢測患者血清PSA水平及免疫組化染色法檢測患者血清PCNA表達后發(fā)現(xiàn)，前列腺癌患者的血清PSA分級、PCNA表達與良性前列腺增生患者不同，差異比較有統(tǒng)計學意義。隨著前列腺癌病理分級增高，癌細胞分泌PSA能力明顯下降。其中PSA分級大，PCNA高表達，提示前列腺癌患者PSA水平較高，但PCNA含量少。PCNA單克隆抗體檢測方法及設(shè)備較簡單，陽性結(jié)果值得肯定[11,12]，可用于細胞形態(tài)學評價。進一步分析發(fā)現(xiàn)，血清PSA分級與前列腺癌組織分化程度、臨床分期有關(guān)，其中高分化、高分期患者的血清PSA水平高。而PCNA陽性表達除與前列腺癌組織分化程度、臨床分期有關(guān)外還與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，其中高分化、高分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的PCNA強陽表達少，弱陽及陽性表達較多。從發(fā)生角度上講，前列腺癌源于前列腺的分泌上皮，癌變的腺體基地細胞缺失是其重要特征[13,14]。前列腺癌發(fā)生后前列腺組織結(jié)構(gòu)及原有生理屏障完整性遭到破壞，導致基底膜細胞層缺失或不完整，使得血清PCNA濃度增加。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)前列腺癌患者血清PSA分級與PCNA陽性表達呈正相關(guān)（P<0.05）。Venclovas Z等認為[15]PCNA指數(shù)超過5%，則預示預后不良。自血清PSA及PCNA用于臨床以來，許多前列腺癌患者得以早期確診，但血清PSA水平在4~10ng/ml時很難與前列腺增生癥鑒別，因此需要同時檢測PCNA。

綜上所述，聯(lián)合檢測血清PSA及PCNA表達能反映前列腺癌分期、分化及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，有利于臨床診斷病情，制定個性化治療方案。