杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能及養(yǎng)分消化利用的影響

黃 林，丁浩軒，馮 杰

（浙江大學(xué)飼料科學(xué)研究所，浙江省動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，浙江杭州 310058）

飼料中長(zhǎng)期添加抗生素對(duì)動(dòng)物生產(chǎn)及對(duì)人類健康所帶來(lái)的危害越來(lái)越引起人們的關(guān)注，發(fā)展環(huán)保友好型的抗生素替代品是畜禽養(yǎng)殖業(yè)走向可持續(xù)化發(fā)展的源泉[1]。植物提取物是近年來(lái)科研與實(shí)際生產(chǎn)所關(guān)注的焦點(diǎn)之一。研究表明植物提取物（如植物精油、黃芪和姜黃素等）可以改善畜禽的生長(zhǎng)性能[2]。杜仲（E.ulmoides）是我國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)中一種常見(jiàn)藥材，常以干燥的杜仲葉入藥，具有強(qiáng)壯筋骨、補(bǔ)益肝腎等功效[3]。杜仲提取物是從杜仲葉中萃取的一類物質(zhì)，富含多種生物活性成分，具有促生長(zhǎng)、抗菌、抗氧化和提高免疫力的功能[4-5]。研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞飼糧中補(bǔ)充適量杜仲提取物增加其平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG），降低耗料增重比（F/G），并改善免疫功能[6]。李金寶等[7]研究發(fā)現(xiàn)，日糧中補(bǔ)充250 mg/kg 杜仲提取物可以降低仔豬的F/G 并提高ADG。然而，目前關(guān)于杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞養(yǎng)分消化率、腸道形態(tài)和消化酶活性研究較少。本試驗(yàn)旨在探討杜仲提取物對(duì)嶺南黃肉雞的生長(zhǎng)性能、養(yǎng)分消化率、腸道形態(tài)和消化酶活性的影響，并對(duì)杜仲提取物取代抗生素的替代效果進(jìn)行評(píng)估。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)杜仲提取物購(gòu)自山東龍昌動(dòng)物保健品有限公司，其主要功能成分為綠原酸（≥5%）、黃酮類（≥8%）、多糖（≥20%）等。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 挑選900 羽1 日齡嶺南黃公雞，隨機(jī)分成6 個(gè)處理，每個(gè)處理6 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)25 羽，飼養(yǎng)試驗(yàn)分為前期（1～21 日齡）和后期（22～50 日齡），試驗(yàn)期50 d。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，抗生素組在基礎(chǔ)日糧中添加40 mg/kg 吉他霉素+10 mg/kg 那西肽，其他4 組分別在基礎(chǔ)日糧中添加100、200、300 mg/kg 杜仲提取物及抗生素+100 mg/kg 杜仲提取物。依據(jù)NRC（1994）肉雞營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)和中國(guó)飼料營(yíng)養(yǎng)成分表制定基礎(chǔ)日糧?；A(chǔ)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)分見(jiàn)表1。

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)雞在控溫雞舍內(nèi)采用雙層籠養(yǎng)，自由采食和飲水，各組飼喂對(duì)應(yīng)試驗(yàn)日糧，全天連續(xù)光照。雞舍溫度按照常規(guī)養(yǎng)殖操作。提供清潔和充足的水源，每天清糞及刷洗水槽并定時(shí)通風(fēng)換氣，保證衛(wèi)生良好。依據(jù)管理要求給肉雞采取免疫程序。

1.4 樣品采集與測(cè)定

1.4.1 生長(zhǎng)性能 按照重復(fù)對(duì)各組肉雞于1 日齡時(shí)進(jìn)行全部稱重，作為試驗(yàn)初始體重，前期試驗(yàn)和后期試驗(yàn)結(jié)束前12 h 停止飼喂飼料，在肉雞22、51 日齡早晨禁飼后，按重復(fù)稱重，作為試驗(yàn)?zāi)┢隗w重，記錄整個(gè)試驗(yàn)期的采食量并對(duì)ADFI、ADG 和F/G 進(jìn)行計(jì)算。

1.4.2 養(yǎng)分消化率 試驗(yàn)期間進(jìn)行2 次代謝試驗(yàn)，分別是試驗(yàn)前期（19～21 日齡）和試驗(yàn)后期（48～50 日齡），代謝試驗(yàn)實(shí)行全收糞法，3 d 預(yù)試期后開(kāi)展3 d 正式代謝試驗(yàn)。預(yù)試期前控制體重差異給雞群分組，每個(gè)處理組選擇體重接近的12 只肉雞放入代謝籠飼養(yǎng)，各組的雞平均體重接近。預(yù)試期開(kāi)始預(yù)飼試驗(yàn)日糧，空腹24 h后進(jìn)入正試期。正試期飼喂試驗(yàn)日糧并記錄2 d 采食量，每日收集糞便，共收集72 h 糞便。收集排泄物時(shí)，以1個(gè)重復(fù)為單位，吹風(fēng)機(jī)仔細(xì)清理積糞盤(pán)內(nèi)的飼料、毛發(fā)和雜物，收集期間多次噴灑10%鹽酸對(duì)糞樣起到固氮作用，試驗(yàn)期間收集的糞樣用塑封袋裝好后放入-20℃冰箱，收集完糞樣后解凍，在65℃烘箱中烘干48 h 至恒重，25℃回潮后稱量質(zhì)量。粉碎后過(guò)篩除去部分雜質(zhì)，用塑封袋保存，并進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分

表觀代謝能飼糧=[（試驗(yàn)飼糧采食量×飼料熱能）-（糞便排出風(fēng)干量×糞便熱能）]/總的采食量

養(yǎng)分的表觀消化率=（食入養(yǎng)分-排泄養(yǎng)分）/食入養(yǎng)分×100 %

1.4.3 腸道樣品與測(cè)定 在22、51 日齡，選擇基礎(chǔ)日糧組、抗生素組、添加杜仲提取物組中ADG 最高組和抗生素+100 mg/kg 杜仲提取物組各重復(fù)體重形態(tài)相近的2 只肉雞取樣。禁飼期間自由飲水，12 h 后屠宰采樣。收集一段長(zhǎng)度1 cm 的十二指腸，生理鹽水清洗徹底，在濾紙上吸干后，泡入固定液中，用來(lái)制作普通光鏡觀察切片。HE 染色后，光鏡檢測(cè)十二指腸腸道形態(tài)，記錄隱窩深度、絨毛高度和絨隱比。收集十二指腸食糜于離心管，并冷藏于液氮中后續(xù)待測(cè)，隨后依據(jù)南京建成生物工程研究所試劑盒測(cè)定十二指腸內(nèi)容物胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 使用SPSS 22.0 軟件中GLM 法進(jìn)行分析，單因子完全隨機(jī)設(shè)計(jì)選擇方差分析，LSD 法進(jìn)行平均數(shù)的差異顯著性檢驗(yàn)，各項(xiàng)結(jié)果的差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響 如表2 所示，試驗(yàn)前期，300 mg/kg 杜仲提取物組ADG 顯著高于對(duì)照組、抗生素組及100、200 mg/kg 杜仲提取物組，300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組的F/G 顯著低于對(duì)照組和抗生素組。試驗(yàn)后期，300 mg/kg 杜仲提取物組的ADFI 和ADG 顯著高于除抗生素+提取物組外的其他組；300 mg/kg 杜仲提取物組的F/G 顯著低于對(duì)照組。在整個(gè)試驗(yàn)期，300 mg/kg 杜仲提取物組的ADFI和ADG 顯著高于對(duì)照組、抗生素組及100、200 mg/kg杜仲提取物組。

2.2 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞養(yǎng)分消化率的影響 如表3所示，試驗(yàn)前期，相比于對(duì)照組，抗生素組、300 mg/kg杜仲提取物組和抗生素+提取物組的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的消化率顯著提高。在試驗(yàn)后期，300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的表觀消化率分別提高了10.61%、10.62%、17.52%和15.12%、13.98%、17.29%（P＜0.05）。

2.3 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞腸道形態(tài)的影響 如圖1 所示，基礎(chǔ)飼糧組十二指腸絨毛出現(xiàn)斷裂；300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組絨毛完整性較好，排列較整齊緊密。

如表4 所示，與對(duì)照組相比，21 日齡時(shí)300 mg/kg杜仲提取物組黃羽肉雞十二指腸絨毛高度提高了13.56%（P＜0.05）。50 日齡時(shí)，抗生素組、300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組十二指腸絨毛高度較對(duì)照組分別提高了21.36%、26.76%和28.28%（P＜0.05）。相比于對(duì)照組，300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組絨隱比顯著提高（P＜0.05）。

2.4 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞腸道消化酶活性的影響 由表5 可知，21 日齡時(shí)，抗生素+提取物組胰蛋白酶活性最佳。相比于對(duì)照組，抗生素組和抗生素+提取物組十二指腸內(nèi)容物胰蛋白酶活性顯著升高（P＜0.05）。在50 日齡時(shí)，相比于對(duì)照組，抗生素組、300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組顯著改善了十二指腸內(nèi)容物中胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活力，300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組胰蛋白酶以及淀粉酶活性顯著高于抗生素組，另外300 mg/kg 杜仲提取物組和抗生素+提取物組的胰蛋白酶、淀粉酶以及脂肪酶無(wú)顯著差異。

表2 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞生產(chǎn)性能的影響

表3 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞飼料養(yǎng)分消化率的影響 %

3 討 論

3.1 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞生長(zhǎng)性能的影響 植物提取物富含生物活性物質(zhì)，具有抗菌功能，在動(dòng)物生產(chǎn)中被認(rèn)為是有潛力的抗生素替代物[8]。本試驗(yàn)表明，杜仲提取物能改善黃羽肉雞生長(zhǎng)性能，提高ADG，降低F/G，而采用低劑量杜仲提取物與抗生素的配伍在提高黃羽肉雞生長(zhǎng)性能方面存在一定互補(bǔ)效應(yīng)。飲水中補(bǔ)充含杜仲葉水煎液5 g/L 同樣會(huì)減少肉雞的飼料消耗量，改善飼料轉(zhuǎn)化率[9]。杜仲葉提取物減少肉雞的飼料消耗量的原因可能是杜仲具有一定安神功效，減弱了神經(jīng)系統(tǒng)功能，減少了肉雞活動(dòng)的能量代謝消耗。對(duì)于杜仲提取物提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能的可能原因，普遍認(rèn)為與其所含的綠原酸、黃酮、多糖等活性成分密切相關(guān)。李金寶等[7]認(rèn)為，杜仲提取物中的綠原酸類成分具有抗應(yīng)激、抑菌等功效，可以提升機(jī)體免疫水平。研究發(fā)現(xiàn)，綠原酸對(duì)腸道中的大腸桿菌、枯草芽孢桿菌和金黃色葡萄球菌的增殖活性均有較強(qiáng)抑制作用，其抑制機(jī)理是因?yàn)樗梢苑歉?jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合芳基胺乙酰轉(zhuǎn)移酶，破壞細(xì)菌細(xì)胞膜，降低細(xì)菌細(xì)胞壁的剛度，協(xié)同殺菌限制細(xì)菌增殖[10]。黃酮類化合物同樣對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌等具有抑制作用。此外，黃酮類物質(zhì)還具有抗氧化、調(diào)節(jié)血栓消融、舒張血管、降血脂、提高機(jī)體免疫力等功能，可預(yù)防疾病，促進(jìn)肉雞健康生長(zhǎng)[11]。多糖類可以調(diào)節(jié)腸道菌群，其可作為腸道中有益菌群（如雙歧桿菌、乳酸桿菌）的食糧，促進(jìn)有益菌其增殖[12]。腸道菌群和杜仲提取物的相互作用，一方面腸道菌群是杜仲提取物中的活性成分的調(diào)節(jié)靶點(diǎn)，另一方面腸道菌群反作用于杜仲提取物修飾其功能活性成分，協(xié)同促進(jìn)肉雞健康生長(zhǎng)。

3.2 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞養(yǎng)分消化率的影響 本試驗(yàn)結(jié)果表明，黃羽肉雞在不同年齡階段對(duì)養(yǎng)分的消化吸收率存在差異，隨著日齡的增長(zhǎng)，飼料中的養(yǎng)分消化率均有提高，消化系統(tǒng)發(fā)育逐漸成熟，且添加適宜濃度的杜仲提取物可以改善肉雞對(duì)日糧中干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪的表觀消化率。綠原酸對(duì)于家禽養(yǎng)分消化率的影響未見(jiàn)報(bào)道。綠原酸提高家禽養(yǎng)分消化率的原因可能是綠原酸具有保肝利膽的功能，促進(jìn)胃液的分泌，并加強(qiáng)了消化酶的活性。此外，杜仲提取物所含活性成分多糖類可以作為肉雞有益菌的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，能夠改善腸道健康[13]。在黃羽肉雞日糧中加入杜仲可顯著減弱腸道中金黃色葡萄球菌等有害菌的生長(zhǎng)繁殖速度，加強(qiáng)養(yǎng)分消化吸收[14]。杜仲提取物提高肉雞養(yǎng)分消化率也可能是因?yàn)槎胖倏梢杂行Ц纳颇c道菌群的分布，進(jìn)而增強(qiáng)腸道攝取養(yǎng)分的效率。

3.3 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞腸道形態(tài)和消化酶活性的影響 十二指腸絨毛高度和隱窩深度是評(píng)價(jià)腸道形態(tài)的關(guān)鍵參數(shù)，腸絨毛高度與腸道對(duì)養(yǎng)分?jǐn)z取的效率正相關(guān)。隱窩較淺，則表明腸道細(xì)胞成熟率增加，腸道分泌加快。研究表明在基礎(chǔ)日糧中補(bǔ)充杜仲黃酮可以改善腸道的絨毛長(zhǎng)度和隱窩深度[15]。本研究表明，300 mg/kg 杜仲提取物組十二指腸的絨毛較長(zhǎng)、隱窩較淺，表明上皮細(xì)胞的表面積增加，更利于吸收營(yíng)養(yǎng)素。十二指腸絨毛高度增加可能是綠原酸和黃酮對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的緩解。脂質(zhì)過(guò)氧化會(huì)影響豬腸道絨毛形態(tài)，進(jìn)而降低對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收[16]。杜仲提取物中的綠原酸和黃酮是天然抗氧化劑，能夠消除自由基[17]。杜仲提取物對(duì)脂質(zhì)過(guò)氧化的緩解作用可能保護(hù)了肉雞腸道的完整性，改善了腸道形態(tài)，促進(jìn)腸道絨毛的生長(zhǎng)發(fā)育，有利于肉雞腸道健康。飼料中的營(yíng)養(yǎng)成分經(jīng)過(guò)胃腸道消化酶的分解降解成小分子物質(zhì)后被機(jī)體吸收，參與到生命活動(dòng)進(jìn)程中，消化酶活性強(qiáng)弱對(duì)畜禽養(yǎng)殖具有重要意義。本試驗(yàn)中，日糧中添加杜仲提取物可顯著加強(qiáng)試驗(yàn)后期肉雞十二指腸胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性。杜仲提取物提高消化酶的活性原因可能是其成分綠原酸可以促進(jìn)肝胰腺的生長(zhǎng)，加強(qiáng)消化酶的分泌。研究發(fā)現(xiàn)，基礎(chǔ)日糧中補(bǔ)充0.15%杜仲提取物可改善異育銀鯽對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化率并提高小腸內(nèi)消化酶活性，這是因?yàn)槎胖僦械木G原酸具有促進(jìn)胃腸道括約肌收縮，可以加強(qiáng)腸道消化酶對(duì)飼料的分解消化[18]。此外，這也可能是因?yàn)橹胁菟幹懈缓喾N生物活性因子，可以刺激腸道消化腺的分泌，改善消化酶功能[19]。

表4 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞十二指腸腸道形態(tài)的影響

表5 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞十二指腸內(nèi)容物酶活性的影響 U/mg prot

4 結(jié) 論

本研究發(fā)現(xiàn)，日糧中補(bǔ)充杜仲提取物可增強(qiáng)肉雞生長(zhǎng)性能；日糧中補(bǔ)充300 mg/kg 杜仲提取物對(duì)黃羽肉雞的飼料消化率、十二指腸腸道形態(tài)和消化酶活性的改善效果最佳；日糧中補(bǔ)充100 mg/kg 杜仲提取物并配伍抗生素在促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育上具有較好功效。在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中，日糧中補(bǔ)充杜仲提取物能夠部分替代抗生素。