羅湖區(qū)社區(qū)獲得性肺炎患兒誘導(dǎo)痰培養(yǎng)及血培養(yǎng)病原學(xué)調(diào)查研究

韋艷紅　丁燕婷

【摘要】 目的：調(diào)查羅湖區(qū)社區(qū)獲得性肺炎患兒誘導(dǎo)痰培養(yǎng)及血培養(yǎng)病原學(xué)情況。方法：回顧性分析2018年3-12月本院收治的109例羅湖區(qū)社區(qū)獲得性肺炎患兒的臨床資料，所有患兒均進(jìn)行誘導(dǎo)痰培養(yǎng)、血培養(yǎng)及藥敏檢測(cè)，分析羅湖區(qū)社區(qū)獲得性肺炎患兒病原學(xué)特征。結(jié)果：109例患兒共檢出180株菌，其中革蘭陽性菌45株（25.00%），革蘭陰性菌132株（73.33%），真菌3株（1.67%）。革蘭陽性菌主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及肺炎鏈球菌為主;革蘭陰性菌主要以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及流感嗜血桿菌為主;真菌主要以白色假絲酵母菌為主。新生兒及1～3個(gè)月嬰兒易感染金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌，4～12個(gè)月嬰兒易感染大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，1～3歲兒童易感染肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌，4～12歲兒童易感染肺炎鏈球菌。金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素、氨芐西林、頭孢噻肟、克林霉素及阿奇霉素耐藥率較高;表皮葡萄球菌對(duì)氨芐西林、青霉素、頭孢噻肟、阿莫西林、四環(huán)素、慶大霉素及環(huán)丙沙星耐藥率較高;肺炎鏈球菌對(duì)阿莫西林、青霉素、四環(huán)素及阿奇霉素的耐藥率較高;大腸埃希菌對(duì)氨芐西林、慶大霉素、甲氧芐啶、頭孢唑林及頭孢噻肟的耐藥率較高;肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林、頭孢他啶耐藥率較高;流感嗜血桿菌對(duì)氨芐西林、甲氧芐啶耐藥率較高。結(jié)論：羅湖區(qū)社區(qū)獲得性肺炎患兒病原菌以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肺炎鏈球菌、大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌為主，臨床應(yīng)根據(jù)不同年齡患兒易患病原菌選擇針對(duì)性的抗生素治療，并加強(qiáng)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)與控制，以防止耐藥菌產(chǎn)生。

【關(guān)鍵詞】 社區(qū)獲得性肺炎 痰培養(yǎng) 血培養(yǎng) 病原學(xué)

[Abstract] Objective： To investigate the etiology of induced sputum culture and blood culture in children with community acquired pneumonia in Luohu District. Method： The clinical data of 109 children with community acquired pneumonia in Luohu District admitted to our hospital from March to December 2018 were retrospectively analyzed. All the children were subjected to induced sputum culture， blood culture and drug sensitivity test， and the etiological characteristics of the children with community acquired pneumonia in Luohu District were analyzed. Result： A total of 180 strains of bacteria were detected in 109 children， including 45 strains （25.00%） of Gram-positive bacteria， 132 strains （73.33%） of Gram-negative bacteria and 3 strains （1.67%） of fungi. The main Gram-positive bacteria were Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis and Streptococcus pneumoniae. The main Gram-negative bacteria were Escherichia coli， Klebsiella pneumoniae and Haemophilus influenzae. The main fungi was Candida albicans. Newborns and 1-3 months infants were susceptible to Staphylococcus aureus， Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae， 4-12 months infants were susceptible to Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae. Children 1 to 3 years old were susceptible to Streptococcus pneumoniae and Haemophilus influenzae， and children 4 to 12 years old were susceptible to Streptococcus pneumoniae. Staphylococcus aureus was highly resistant to Penicillin， Ampicillin， Cefotaxime， Clindamycin and Azithromycin. Staphylococcus epidermidis was highly resistant to Ampicillin， Penicillin， Cefotaxime， Amoxicillin， Tetracycline， Gentamicin and Ciprofloxacin. The resistance rate of Streptococcus pneumoniae to Amoxicillin， Penicillin， Tetracycline and Azithromycin were higher. The resistance rate of Escherichia coli to Ampicillin， Gentamycin， Trimethoprim， Cefazolin and Cefotaxime were higher. The resistance rate of Klebsiella pneumoniae to Ampicillin and Ceftazidime were higher. The resistance rate of Haemophilus influenzae to ampicillin and methoxyphen was higher. Conclusion： Staphylococcus aureus， Staphylococcus epidermidis， Streptococcus pneumoniae， Escherichia coli and Klebsiella pneumoniae are the main pathogens of community acquired pneumonia in Luohu District. Clinical should be based on the different age of children susceptible to pathogenic bacteria to choose targeted antibiotic treatment， and monitoring and control of bacterial resistance should be strengthened to prevent the emergence of drug-resistant bacteria.

[Key words] Community acquired pneumonia Sputum culture Blood culture Etiology

First-authors address： Luohu District Maternal and Child Health Hospital， Shenzhen 518000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.17.020

社區(qū)獲得性肺炎是在院外由多種微生物所引起的炎癥。臨床主要表現(xiàn)為咳嗽、發(fā)熱等癥狀[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，社區(qū)獲得性肺炎是5歲兒童死亡主要原因[2]。臨床常采用抗生素治療，但近年來由于抗生素的不規(guī)范使用及濫用，導(dǎo)致細(xì)菌變異產(chǎn)生新的耐藥菌株，故對(duì)診斷明確的社區(qū)獲得性肺炎患兒需行痰、血培養(yǎng)，并根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果指導(dǎo)用藥，以減少新的耐藥菌株產(chǎn)生[3-4]。鑒于地區(qū)社區(qū)對(duì)獲得性肺炎患兒誘導(dǎo)痰培養(yǎng)及血培養(yǎng)病原學(xué)的相關(guān)報(bào)道較少，因此本研究對(duì)本院收治的109例羅湖區(qū)社區(qū)獲得性肺炎患兒的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析本院2018年3-12月收治的109例社區(qū)獲得性肺炎患兒的臨床資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡0～12歲;（2）均符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)呼吸病學(xué)分會(huì)制定的《社區(qū)獲得性肺炎診斷和指南值指南》中診斷準(zhǔn)[5];（3）臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并實(shí)質(zhì)性臟器嚴(yán)重功能不全者;（2）活動(dòng)性肺結(jié)核者;（3）最近2周有住院治療史;（4）住院前抗微生物治療>2周。其中男64例，女45例;年齡0～12歲，平均（4.47±2.03）歲。本研究已經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法 所有患兒在無菌0.9%氯化鈉溶液清洗口腔后采用電動(dòng)吸痰進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)及抗菌藥物敏感試驗(yàn)。痰培養(yǎng)：將痰液標(biāo)本接種于血平板和巧克力平板，35 ℃，5%～7% CO2孵箱培養(yǎng)24 h，在巧克力平板挑取可疑菌落，按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作。采用K-B法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)：（1）從瓊脂平板挑取形態(tài)相似的純培養(yǎng)菌落接種肉湯培養(yǎng)基，并于35 ℃培養(yǎng)至濁度，取出調(diào)節(jié)菌液濃度至0.5麥?zhǔn)蠁挝?。?）采用無菌棉拭子浸入調(diào)好的菌懸液中，將多于菌懸液在管壁擠出，在M-H瓊脂平皿上劃線，旋轉(zhuǎn)平皿60°后用拭子涂抹瓊脂邊緣。置室溫3～5 min。（3）取藥敏紙片貼于平板表面并輕壓，每張紙片間距≥24 mm，中心距平板邊緣≥15 mm，90 mm直徑的平板適宜貼6張藥敏紙片。（4）將貼好紙片的平板置35℃孵育18～24 h后用游標(biāo)卡尺量取抑菌圈直徑。結(jié)果判斷：根據(jù)抑菌圈的大小（不同抗生素其抑菌圈大小的標(biāo)準(zhǔn)不一致），判斷為敏感（S），耐藥（R）。血培養(yǎng)：采取患兒血液5 mL，提取血清2 mL分裝于凍存管各1 mL置于-20 ℃，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)各病原體。血清抗體檢測(cè)陽性標(biāo)準(zhǔn)：間隔2～4周采集的2次標(biāo)本的血清抗體滴度呈4倍或4倍以上增高或降低。

1.3 觀察指標(biāo) （1）病原菌分布情況。（2）不同年齡段兒童對(duì)主要病原菌的易感性。（3）主要革蘭陽性菌對(duì)抗生素的耐藥率。（4）主要革蘭陰性菌對(duì)抗生素的耐藥率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 20.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原菌分布情況 109例患兒共檢出180株菌，其中革蘭陽性菌45株（25.00%），革蘭陰性菌132株（73.33%），真菌3株（1.67%）。革蘭陽性菌主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及肺炎鏈球菌為主;革蘭陰性菌主要以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及流感嗜血桿菌為主;真菌主要以白色假絲酵母菌為主。見表1。

2.2 不同年齡段兒童對(duì)病原菌的易感性 新生兒及1～3個(gè)月嬰兒易感染金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌，4～12個(gè)月嬰兒易感染大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，1～3歲兒童易感染肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌，4～12歲兒童易感染肺炎鏈球菌，見表2。

2.3 主要革蘭陽性菌對(duì)抗生素的耐藥率 金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素、氨芐西林、頭孢噻肟、克林霉素及阿奇霉素耐藥率較高;表皮葡萄球菌對(duì)氨芐西林、青霉素、頭孢噻肟、阿莫西林、四環(huán)素、慶大霉素及環(huán)丙沙星耐藥率較高;肺炎鏈球菌對(duì)阿莫西林、青霉素、四環(huán)素及阿奇霉素的耐藥率較高，見表3。

2.4 主要革蘭陰性菌對(duì)抗生素的耐藥率 大腸埃希菌對(duì)氨芐西林、慶大霉素、甲氧芐啶、頭孢唑林及頭孢噻肟的耐藥率較高;肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林、頭孢他啶耐藥率較高;流感嗜血桿菌對(duì)氨芐西林、甲氧芐啶耐藥率較高，見表4。

3 討論

社區(qū)獲得性肺炎是兒科常見疾病，近年來由于兒童呼吸系統(tǒng)解剖生理特點(diǎn)及兒童免疫功能低下和呼吸器官功能發(fā)育尚未成熟，同時(shí)由于大氣環(huán)境污染，致使社區(qū)獲得性肺炎發(fā)病率及死亡率呈上升趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅患兒生命安全[6-7]。因病原菌復(fù)雜多樣，臨床不規(guī)范使用抗生素可導(dǎo)致病原菌耐藥率增加和多重耐藥的產(chǎn)生，故調(diào)查研究社區(qū)獲得性肺炎患兒病原學(xué)對(duì)治療和降低病死率具有重要意義[8-9]。

本研究結(jié)果顯示，痰培養(yǎng)陽性患兒109例，共檢出180株菌，其中革蘭陽性菌45株（25.00%），革蘭陰性菌132株（73.33%），真菌3株（1.67%）。提示革蘭陰性菌成為下呼吸道感染的主要病原菌，其中革蘭陽性菌主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及肺炎鏈球菌為主，革蘭陰性菌主要以大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌及流感嗜血桿菌為主，真菌主要以白色假絲酵母菌為主，與國(guó)內(nèi)報(bào)道相近[10]。但國(guó)外報(bào)道顯示，社區(qū)獲得性肺炎病原菌以病毒為主，細(xì)菌譜以肺炎球菌和肺炎克雷伯菌為主[11]?？紤]其主要原因?yàn)槲覈?guó)痰、血培養(yǎng)技術(shù)條件欠佳，消耗時(shí)間較長(zhǎng)，從而導(dǎo)致陽性率較低[12]。同時(shí)本研究發(fā)現(xiàn)，新生兒及1～3個(gè)月嬰兒易感染金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌，這與新生兒及嬰兒分泌型IgA、IgM及IgG水平低下有關(guān)，因IgA在黏膜免疫中發(fā)揮抗感染作用，且IgM及IgG水平較低使機(jī)體對(duì)革蘭陰性菌抵抗力較差，因此容易發(fā)生感染[13]。4～12個(gè)月嬰兒易感染大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌，1～3歲兒童易感染肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌，4～12歲兒童易感染肺炎鏈球菌，這與1歲后患兒免疫系統(tǒng)發(fā)育成熟有關(guān)，隨著機(jī)體免疫功能的不斷增強(qiáng)，病毒感染逐漸下降，同時(shí)說明隨著年齡的增長(zhǎng)肺炎鏈球菌感染呈增加趨勢(shì)，因此臨床應(yīng)根據(jù)不同年齡易患病原菌針對(duì)性地選擇抗生素治療[14]。且本研究藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌均對(duì)利福平、萬古霉素、左氧氟沙星、加替沙星、替考拉寧及阿米卡星敏感性較高，可作為革蘭陽性菌感染的社區(qū)獲得性肺炎早期選擇藥物，同時(shí)應(yīng)注意氨基糖苷類藥物對(duì)肝腎耳等不良反應(yīng)。近年來國(guó)內(nèi)外肺炎鏈球菌對(duì)青霉素、紅霉素、阿奇霉素及克林霉素耐藥率不斷上升。且不同地區(qū)耐藥特點(diǎn)不同[15]。本研究顯示，肺炎鏈球菌對(duì)阿莫西林、青霉素、四環(huán)素及阿奇霉素的耐藥率較高，由此可見，單獨(dú)使用大環(huán)內(nèi)脂類藥物對(duì)肺炎鏈球菌患者無明顯效果，臨床應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)制定治療方案。同時(shí)本研究結(jié)果顯示，大腸埃希菌對(duì)氨芐西林、慶大霉素、甲氧芐啶、頭孢唑林及頭孢噻肟的耐藥率較高，肺炎克雷伯菌對(duì)氨芐西林、頭孢他啶耐藥率較高，流感嗜血桿菌對(duì)氨芐西林、甲氧芐啶耐藥率較高，與Kumar等[16]報(bào)道相近，且未發(fā)現(xiàn)對(duì)阿莫西林、阿米卡星及哌拉西林的耐藥性，可能與本院對(duì)抗生素的使用進(jìn)行嚴(yán)格控制有關(guān)。但由于本研究為回顧性研究，樣本量較為局限，且缺乏對(duì)病毒和團(tuán)菌等病原體檢測(cè)，研究結(jié)果代表性不夠全面，期待前瞻性及多中心的研究[17-18]。

綜上所示，社區(qū)獲得性肺炎病情發(fā)展迅速，臨床應(yīng)考慮病原菌變遷和抗生素耐藥等問題，且為減少抗生素濫用，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)制定治療方案。

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（收稿日期：2020-03-13）（本文編輯：田婧）