不同包裝結(jié)合低溫貯藏對(duì)‘保研-7號(hào)’紅毛丹品質(zhì)的影響

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(1.海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工設(shè)計(jì)研究所,海南省熱帶果蔬冷鏈研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,海南?？?571100;2.海南大學(xué)化學(xué)工程與技術(shù)學(xué)院,海南?？?570228;3.海南大學(xué)理學(xué)院,海南海口 570228)

‘保研-7號(hào)’紅毛丹是中國(guó)紅毛丹果的品種之一,其年產(chǎn)量較高,每年可結(jié)兩次果,果大果甜果圓具有較高的穩(wěn)產(chǎn)性、耐寒性、耐旱性等特點(diǎn)[1]。紅毛丹在高溫高濕季節(jié)成熟,采后快速褐變,貨架期短是影響紅毛丹運(yùn)輸和銷售的主要原因。以往的研究認(rèn)為果實(shí)采后褐變的發(fā)生與衰老、失水、冷害,病原菌侵染等因素有關(guān)[2]。大多數(shù)紅毛丹果皮褐變?nèi)砸员砥な稍餅橹?。果?shí)表皮失水干燥從柔刺狀突起(果毛)顏色開始逐漸變黑,并向其基底部發(fā)展,然后向果皮延伸[3]。柔刺狀突起(果毛)與果皮高度發(fā)達(dá)的微管組織相連,此外,果毛氣孔密度遠(yuǎn)大于果皮,其特殊的果皮結(jié)構(gòu)決定果毛與環(huán)境有更大的接觸面,蒸騰速度更快,同時(shí)果毛及果皮水勢(shì)的下降也是水分快速流失的主要因素[4-6]。高濕度(相對(duì)濕度90%～95%)貯藏可能延緩果實(shí)的干燥[7-8]。僅依靠高濕度貯藏是無法控制紅毛丹失水褐變的,包裝材料與冷藏相結(jié)合能降低果實(shí)呼吸速率、改善水分保持和抑制生理惡化來延長(zhǎng)農(nóng)產(chǎn)品的貯藏壽命已被廣泛推廣[9-10]。Varit等[11]報(bào)道無孔低密度聚乙烯包裝能延緩紅毛丹褐變指數(shù)和失水率增大,降低果實(shí)呼吸速率和乙烯產(chǎn)量,保鮮時(shí)間延長(zhǎng)至16 d。然而,包裝材料的透性不足會(huì)引起無氧呼吸,導(dǎo)致乙醇、乙醛和異味的形成[12]。為防止果實(shí)采后因包裝膜的低滲透性導(dǎo)致無氧呼吸,一些研究在聚乙烯薄膜基礎(chǔ)上嵌加一定面積的具有高度滲透性的有機(jī)硅膜即硅窗膜(SW),薄膜與周圍大氣之間通過硅膠薄膜窗口進(jìn)行氣體交換,誘導(dǎo)出包裝最佳氣氛,防止無氧呼吸并能保持相對(duì)低的呼吸率和乙烯濃度,減少抗壞血酸的損失,有效抑制葉綠素降解[13]。SW已廣泛運(yùn)用于一些農(nóng)場(chǎng)品保鮮,如綠蘆筍[13]、茶樹菇[14]、雙孢蘑菇[12,15]等。復(fù)命袋(FM)是一種新型的物理保鮮材料,其設(shè)計(jì)理論原理是基于不同種類果蔬的活性數(shù)據(jù)(呼吸速率、呼吸熵和/或酶活性)和各保鮮因素(溫度、濕度、氧氣濃度、氮?dú)鉂舛取⒍趸紳舛群?或乙烯濃度)之間建立保鮮因子方程如下:

這種物理果蔬保鮮材料是根據(jù)保鮮因子方程,獲得的最優(yōu)保鮮因素和保鮮參數(shù)制得,該材料是采用熱力學(xué)透析理論,基于如下熱力學(xué)方程:F2=f(T,P1,P2,P3…H2O);F3=f(M1,M2,M3,M4,…)制備的具有自發(fā)氣調(diào)性,能較好維持杭白菜、草莓品質(zhì)[16]。

紅毛丹果皮的特殊結(jié)構(gòu)加快果實(shí)蒸騰速度,如何減少紅毛丹果水分流失,延緩果皮褐變是維持果實(shí)外觀品質(zhì)亟待解決的問題。PE是常用的果蔬保鮮包裝材料,但果實(shí)在貯藏后期可能因持續(xù)低O2高CO2環(huán)境導(dǎo)致無氧呼吸,SW的有機(jī)硅膜的高滲透性可避免果實(shí)發(fā)生無氧呼吸,FM是上海復(fù)命新材料科技有限公司研發(fā)的一種新型自發(fā)氣調(diào)保鮮材料,在新鮮紅毛丹包裝中具有很大的應(yīng)用潛力。根據(jù)本實(shí)驗(yàn)室研究成果,最佳貯藏溫度為5～8 ℃。為避免4 ℃以下的冷害干擾,在(6±1) ℃下用PE、SW和FM包裝,通過對(duì)紅毛丹品質(zhì)、生理及酶活性的評(píng)價(jià),以確定最佳包裝材料,為紅毛丹的采后冷鏈及貯藏保鮮技術(shù)的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

‘保研-7號(hào)’紅毛丹 采自海南省保亭紅毛丹生產(chǎn)基地,采摘后放入筐中,5 h內(nèi)送到?？陬A(yù)冷,挑揀淺紅色果皮和綠色的果毛,大小、形狀均勻、無機(jī)械損傷、無昆蟲或病原感染的果實(shí)進(jìn)行研究;牛血清蛋白、馬斯亮藍(lán)G250、鹽酸、甲醇 國(guó)產(chǎn)分析純?cè)噭?多酚氧化酶試劑盒 蘇州科銘檢測(cè)試劑盒;過氧化物酶試劑盒 南京建成檢測(cè)試劑盒;托盤(180 mm×130 mm)、普通低密度聚乙烯薄膜(400 mm×300 mm,0.05 mm) 購(gòu)買自當(dāng)?shù)爻?硅窗薄膜(400 mm×300 mm,0.015 mm)、硅窗(50 mm×50 mm) 濟(jì)南果品研究所;復(fù)命保鮮薄膜(400 mm×300 mm,0.09 mm) 上海復(fù)命新材料科技有限公司。

PAL-1手持糖度計(jì) 日本愛拓公司;NS800分光測(cè)色儀 深圳三恩馳科技有限公司;COM-100電導(dǎo)率儀 韓國(guó)HM品牌;i3型紫外可見分光光度計(jì) 濟(jì)南海能儀器股份有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 紅毛丹包裝試驗(yàn)設(shè)計(jì) 隨機(jī)挑選紅毛丹果,分為4組:a.CK組:將紅毛丹直接放置在4個(gè)托盤上,每個(gè)托盤有1.5 kg紅毛丹果;b.用PE薄膜包裝,分裝4袋,每袋1.5 kg;c.采用SW薄膜包裝,分裝4袋,每袋1.5 kg;d.用FM薄膜包裝,分裝4袋,每袋1.5 kg。包裝后所有的水果都儲(chǔ)存在(6±1) ℃和在第0、4、8、12、16 d每組取一袋紅毛丹果,此外,每個(gè)處理和取樣日期保持一致,對(duì)紅毛丹果實(shí)品質(zhì)評(píng)估(果皮褐變指數(shù),果肉可溶性固形物,可滴定酸,可溶性蛋白質(zhì)),生理參數(shù)(相對(duì)電導(dǎo)率,丙二醛,可溶性總酚,花青素)及相關(guān)酶(PPO,POD)活性進(jìn)行評(píng)價(jià),重復(fù)三次。

1.2.2 果皮褐變指數(shù)和好果率測(cè)定 按照Shao等[17]方法根據(jù)紅毛丹果皮褐變面積進(jìn)行分級(jí):依據(jù)果皮褐變面積進(jìn)行分級(jí)評(píng)價(jià),使用以下等級(jí):褐變階段0級(jí):無褐變;1級(jí):≤1/4面積褐變;2級(jí):1/4～1/2面積褐變;3級(jí):1/2～3/4面積褐變;4級(jí):3/4～完全褐變,按照公式計(jì)算:

褐變指數(shù)=(∑褐變級(jí)數(shù)×相應(yīng)級(jí)數(shù)果實(shí)個(gè)數(shù))/(4×果實(shí)總數(shù))

好果率(%)=(0級(jí)果實(shí)個(gè)數(shù)+1級(jí)果實(shí)個(gè)數(shù)+2級(jí)果實(shí)個(gè)數(shù))/果實(shí)總數(shù)×100

1.2.3 果肉品質(zhì)評(píng)估可溶性固形物、可滴定酸、可溶性蛋白質(zhì)測(cè)定 參照Hafiz等[18]有所修改。從每組中隨機(jī)選取5個(gè)紅毛丹果,稱取3 g紅毛丹果肉,用勻漿機(jī)磨成勻漿后紗布過濾取汁液,用手持糖度計(jì)測(cè)量可溶性固形物；按照儀器操作要求,稀釋50倍后測(cè)定可滴定酸。可溶性蛋白質(zhì)測(cè)定:參照曹建康等[19]的考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定。

1.2.4 果皮生理參數(shù)評(píng)估 相對(duì)電導(dǎo)率測(cè)定:按照Shao等[17]方法用便攜式電導(dǎo)率儀測(cè)定。丙二醛(MDA)測(cè)定:采用硫代巴比妥酸反應(yīng)法[17,20],用紫外-可見分光光度計(jì)在最大吸收波長(zhǎng)532 nm測(cè)定其吸光度并可計(jì)算出丙二醛的含量。

可溶性總酚、花青素測(cè)定:按照Nurhuda等[21]方法,并稍作修改。將10 g紅毛丹果皮加入100 mL 1% HCl-CH3OH溶液,在4 ℃的搖床中避光振蕩提取20 min。提取完畢后再避光過濾,收集紅毛丹皮提取液。以1% HCl-CH3OH溶液作空白參比調(diào)零,用紫外-可見分光光度計(jì)在最大吸收波長(zhǎng)280 nm吸光度值表示總酚含量OD280·g-1;在波長(zhǎng)530 nm處和波長(zhǎng)600 nm處波長(zhǎng)吸光度值之差表示花青素含量(U),即U=OD530-OD600。此方法僅作為比較樣品間總酚、花青素的相對(duì)含量。

1.2.5 酶活性測(cè)定 將每組不同包裝的果皮剪成小塊,放入液氮中,再放入-50 ℃的低溫冰箱中保存,測(cè)定單位鮮重中多酚氧化酶、過氧化物酶。測(cè)定多酚氧化酶用多酚氧化酶試劑盒;過氧化物酶活性用過氧化物酶試劑盒。

1.3 數(shù)據(jù)處理

每組測(cè)試都設(shè)置三次平行,取平均值。采用Excel軟件處理數(shù)據(jù),Origin 9.0軟件繪圖,SPSS 19.0軟件進(jìn)行鄧肯氏多重比較法(P<0.05)差異顯著性分析,符號(hào)*表示每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的獨(dú)立樣本鄧肯氏多重范圍檢驗(yàn)的顯著性差異(P<0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同包裝下紅毛丹果皮褐變指數(shù)及好果率的變化

紅毛丹采后貯藏過程中果皮褐變逐漸加劇,是果實(shí)衰老的特征標(biāo)志之一,果皮褐變同荔枝、龍眼一樣,是果實(shí)產(chǎn)業(yè)采后最嚴(yán)重的問題[22]。如圖1A所示,紅毛丹果皮褐變指數(shù)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增大。相同的低溫條件下,貯藏第16 d,FM、SW及PE包裝的果實(shí)褐變指數(shù)顯著低于CK(P<0.05),這表明3種包裝均能顯著延緩果皮褐變上升,原因可能是薄膜充當(dāng)了環(huán)境和水果之間的屏障,氧含量的降低減緩了紅毛丹的衰老[18]。圖1A顯示,在整個(gè)儲(chǔ)藏期間FM包裝的紅毛丹果皮褐變指數(shù)最小,這表明同SW及PE包裝比較,FM包裝更能明顯抑制紅毛丹果皮的褐變,原因可能是FM的自發(fā)氣調(diào)性調(diào)節(jié)了薄膜內(nèi)O2和CO2含量,適宜的氛圍更能降低紅毛丹呼吸代謝,減少褐變發(fā)生。

紅毛丹的好果率是指具有商品價(jià)值的果個(gè)數(shù)占總果實(shí)數(shù)的比值。圖1B中,紅毛丹好果率在整個(gè)貯藏期間受貯藏溫度及呼吸代謝影響持續(xù)下降。貯藏第16 d,FM薄膜包裝的紅毛丹好果率(67.78%)顯著(P<0.05)高于CK好果率(5.56%),此外SW薄膜的紅毛丹好果率也高達(dá)53.33%,PE薄膜包裝的紅毛丹好果率45.56%同樣高于CK,FM薄膜包裝的紅毛丹好果率最高,其次是SW和PE薄膜。結(jié)果顯示3種包裝薄膜均能提高紅毛丹好果率,FM薄膜包裝的紅毛丹好果率提高效果最為顯著。

圖1 包裝材料對(duì)紅毛丹果皮褐變及好果率的影響Fig.1 The effect of packing materials on the pericarp browning index and intact fruit of rambutan注:“*”表示同一貯藏天數(shù)FM、SW、PE三種包裝分別與CK相比有顯著差異(P<0.05)；圖2～圖4同。

2.2 不同包裝下紅毛丹果肉可溶性固形物、可滴定酸、可溶性蛋白質(zhì)的變化

為了更好地觀察包裝對(duì)紅毛丹果肉品質(zhì)的影響,分析了可溶性固形物(TSS)、可滴定酸(TA)及可溶性蛋白質(zhì)。由圖2A看出,紅毛丹果肉可溶性固形物含量先增加后減少,Latifah等[23]也認(rèn)為紅毛丹在包裝中的TSS值隨整個(gè)貯藏時(shí)間逐漸上升后下降。相同低溫條件下,FM薄膜包裝的紅毛丹TSS含量顯著高于SW、PE膜(P<0.05),這表明與CK及SW、PE包裝相比,FM包裝更能延緩紅毛丹果肉TSS的減少,其次是SW。

圖2B中,紅毛丹果肉可滴定酸含量在整個(gè)貯藏期間持續(xù)下降,其中CK紅毛丹果肉TA在第12～16 d快速下降,3種包裝均延緩了紅毛丹果肉TA的減少,FM包裝的紅毛丹果肉TA含量最高,其次是SW薄膜,這表明FM薄膜包裝能保持紅毛丹果肉TA含量,維持紅毛丹果肉風(fēng)味,其次是SW薄膜。

圖2C中,紅毛丹果可溶性蛋白質(zhì)含量先減少后增大。貯藏第16 d,3種包裝的紅毛丹果可溶性蛋白質(zhì)含量均高于CK,其中FM包裝的紅毛丹果肉可溶性蛋白含量最高,SW薄膜包裝的紅毛丹果可溶性蛋白質(zhì)與PE包裝組無明顯差異。從果肉TSS、TA、可溶性蛋白質(zhì)的變化結(jié)果可得FM薄膜包裝延緩了果肉TSS和TA的減少,保持果肉可溶性蛋白質(zhì)含量,維持紅毛丹果肉風(fēng)味效果最好。

圖2 包裝材料對(duì)紅毛丹果肉可溶性固形物、可滴定酸及可溶性蛋白質(zhì)的影響Fig.2 The effect of packing materials on total soluble solids,titratable acidity,soluble protein of rambutan

2.3 不同包裝下紅毛丹果皮相對(duì)電導(dǎo)率、丙二醛、可溶性總酚、花青素含量的變化

以紅毛丹果皮相對(duì)電導(dǎo)率表示紅毛丹果皮細(xì)胞膜滲透率,電導(dǎo)率越高也代表細(xì)胞膜完整性越差[24]。圖3A顯示,紅毛丹果皮相對(duì)電導(dǎo)率隨貯藏時(shí)間的增加呈上升趨勢(shì),表明紅毛丹果皮細(xì)胞膜完整結(jié)構(gòu)逐漸被破壞。貯藏12～16 d,包裝處理后的紅毛丹相對(duì)電導(dǎo)率低于CK,說明3種薄膜包裝能延緩紅毛丹相對(duì)電導(dǎo)率的上升,其中FM包裝的紅毛丹果皮相對(duì)電導(dǎo)率最小,結(jié)果表明FM能維持果實(shí)細(xì)胞膜完整性。

丙二醛是細(xì)胞膜上多不飽和脂肪酸的氧化降解產(chǎn)物之一,被廣泛認(rèn)為是脂質(zhì)過氧化的生物標(biāo)志物[25]。如圖3B所示,CK紅毛丹果皮MDA在貯藏后期12～16 d急劇上升,紅毛丹果皮細(xì)胞膜不飽和脂肪酸過氧化損傷較為嚴(yán)重,3種包裝處理的紅毛丹果皮MDA在貯藏后期均有輕微上升且MDA含量低于CK,在整個(gè)貯藏期間FM包裝的紅毛丹果皮積累的MDA含量最少,結(jié)果表明FM延緩紅毛丹果皮MDA的增長(zhǎng),降低了紅毛丹果皮脂質(zhì)過氧化損傷。

酚類物質(zhì)具有較強(qiáng)的抗氧化能力,可以通過抑制氧化鏈反應(yīng)的起始或增殖來延緩脂質(zhì)過氧化,同時(shí)酚類物質(zhì)是酶促反應(yīng)的底物,能被促氧化系列酶氧化[25-26]。從圖3C可以看出,隨著貯藏時(shí)間的增加,紅毛丹果實(shí)果皮總酚含量呈先上升后下降趨勢(shì)。Supapvanich[27]也報(bào)道了蒸餾水和溫水處理紅毛丹果在貯藏末期果皮總酚含量也呈逐漸減少趨勢(shì),同時(shí)Yingsanga等[28]對(duì)比不同品種的紅毛丹總酚含量中也觀察到類似趨勢(shì)。CK組紅毛丹總酚含量在貯藏4～16 d持續(xù)下降;PE包裝紅毛丹總酚含量在貯藏第8～16 d也逐漸減少;SW和FM膜包裝的果實(shí)總酚含量在第12～16 d先增加后減少,整個(gè)貯藏期間呈“M”型。圖3C中,3種包裝的紅毛丹總酚含量在貯藏12～16 d顯著(P<0.05)高于CK,其中FM薄膜包裝的紅毛丹總酚含量遠(yuǎn)比SW及PE薄膜組高。

花青素也是一種天然抗氧化劑,是果實(shí)保持鮮紅色的原因之一,花青素的降解也可能導(dǎo)致果實(shí)采后褐變[29-30]。圖3D中,紅毛丹果實(shí)花青素在貯藏0～8 d快速下降,CK和PE薄膜的果皮花青素在貯藏8～16 d先略微上升后下降;SW包裝的紅毛丹花青素在貯藏12～16 d又略微上升;FM包裝的紅毛丹在貯藏8～16 d花青素含量增加,表明FM能延緩果實(shí)花青素的降解,使花青素的生成速率大于降解速率,從而使花青素含量增加。圖3D顯示,貯藏12～16 d,同CK相比,3種包裝均能顯著提高果實(shí)花青素含量,FM膜的紅毛丹總花青素含量顯著高于SW和PE包裝(P<0.05),SW的果實(shí)花青素含量又顯著高于PE包裝,原因可能是SW薄膜是PE薄膜上嵌加一定面積的具有選擇透性的有機(jī)硅窗,包裝內(nèi)與周圍大氣之間通過硅窗膜進(jìn)行氣體交換,最終使包裝內(nèi)氣體濃度達(dá)到適宜的水平。結(jié)果表明3種不同包裝材料中,FM包裝更能延緩花青素的降解,其次是SW薄膜和PE薄膜。

圖3 包裝材料對(duì)紅毛丹果皮相對(duì)電導(dǎo)率、丙二醛、總酚及花青素的影響Fig.3 The effect of packing materials on relative conductivity,malondialdehyde content,total polyphenol content,total anthocyanin content of rambutan

從果皮相對(duì)電導(dǎo)率、MDA、總酚及花青素的變化結(jié)果可得相同低溫條件下,與CK相比,3種包裝均能較好的延緩果皮相對(duì)電導(dǎo)率、MDA的積累及總酚、花青素的降解,其中FM的果實(shí)相對(duì)電導(dǎo)率、MDA最小,總酚和總花青素含量最高。

2.4 不同包裝下紅毛丹果皮多酚氧化酶,過氧化物酶含量的變化

多酚氧化酶(PPO)是一組含銅金屬的氧化還原酶,利用分子氧催化多種酚類化合物的氧化[31-32]。紅毛丹果實(shí)PPO活性隨時(shí)間的變化如圖4A所示,先下降后上升。貯藏第12～16 d,CK和PE包裝的果實(shí)PPO活性顯著增大(P<0.05),但PE薄膜的紅毛丹PPO活性低于CK,同時(shí)FM和SW包裝的紅毛丹PPO活性在第16 d同CK比顯著降低,結(jié)果表明與CK相比,包裝抑制了紅毛丹PPO活性的增大,其中FM薄膜能顯著抑制紅毛丹PPO活性,其次是SW薄膜和PE薄膜。

過氧化物酶(POD)以一組以H2O2存在為前提催化酚類、黃酮類等的氧化酶,POD活性的高低也可說明細(xì)胞內(nèi)的過氧化情況[33]。圖4B中,紅毛丹POD活性隨貯藏時(shí)間變化呈先增大后減小。貯藏第16 d,3種包裝的果實(shí)POD活性無明顯差異但均顯著低于CK(P<0.05),表明3種包裝均能明顯抑制紅毛丹POD活性;貯藏第12 d,FM包裝的紅毛丹POD活性顯著小于SW和PE包裝(P<0.05),SW和PE薄膜包裝的果實(shí)POD活性差異不明顯,表明3種包裝材料中,FM薄膜更能抑制紅毛丹果POD活性,降低細(xì)胞內(nèi)的過氧化作用。

圖4 包裝材料對(duì)紅毛丹果皮多酚氧化酶及過氧化物酶的影響Fig.4 The effect of packing materials on polyphenol oxidase and peroxidase of rambutan

3 討論與結(jié)論

與CK相比,(6±1) ℃下,3種保鮮包裝材料在低溫貯藏8 d之前,均能顯著抑制紅毛丹褐變指數(shù)的上升,維持較高的好果率,較好的保持紅毛丹品質(zhì),8 d后各種指標(biāo)變化急劇增減,3中包裝性能對(duì)紅毛丹果實(shí)的保鮮效果差異明顯。FM包裝紅毛丹果肉和果皮在低溫貯藏16 d,11個(gè)指標(biāo)變化均最小,保持新鮮品質(zhì)最好,是3種包裝中最佳包裝材料,可為紅毛丹采后包裝技術(shù)的應(yīng)用提供技術(shù)支撐。紅毛丹果皮褐變是直接影響品質(zhì)的因素,果皮結(jié)構(gòu)疏松,與果肉呈現(xiàn)分離狀態(tài),低溫貯藏后果皮失水褐變,果皮硬度逐漸變硬,首先劣變?cè)诠?果肉劣變速度明顯低于果皮劣變速度。果皮多酚和花青素的含量、果皮細(xì)胞膜透性和丙二醛含量變化直接反映了紅毛丹果實(shí)的品質(zhì)變化。

有無包裝和不同的包裝材料對(duì)紅毛丹采后保鮮效果有極大影響。本實(shí)驗(yàn)僅針對(duì)不同包裝袋對(duì)紅毛丹果實(shí)品質(zhì)變化監(jiān)測(cè),除了薄膜本身厚度對(duì)紅毛丹果保鮮有極大影響外,對(duì)包裝材料性能如氧氣滲透系數(shù)、透濕率、透光率等需進(jìn)一步研究,同時(shí)由于材料性能不同,包裝內(nèi)O2、CO2等氣體濃度是否對(duì)紅毛丹保鮮造成影響,也需對(duì)此深入研究。