PCR技術(shù)及其在食品微生物檢測中的應(yīng)用

胡弘宇 馬慧麗

摘 要：現(xiàn)階段，致病微生物的數(shù)量越來越多，且這類微生物的存在范圍也比較廣泛，怎樣在較短的時間內(nèi)檢測出致病微生物已經(jīng)成為目前我國食品行業(yè)的首要研究課題。PCR技術(shù)是一類新型的微生物檢測技術(shù)，該項(xiàng)技術(shù)可以在較短的時間內(nèi)檢測出食品當(dāng)中的各類致病微生物。本文主要對PCR技術(shù)及其在食品微生物檢測中的應(yīng)用進(jìn)行探究，分析該技術(shù)的發(fā)展形勢以及使用要點(diǎn)，進(jìn)一步提升我國食品的安全性，切實(shí)保障人們的身體健康。

關(guān)鍵詞：PCR技術(shù);食品安全檢測;致病病原體

Abstract：At present， the number of pathogenic microorganisms in the natural environment in China is increasing， and the range of such microorganisms is also relatively wide， how to detect pathogenic microorganisms in a short time has become the development of Chinas food industry the primary research topic. PCR technology is a new type of microbial detection technology in China， which can be used to identify all kinds of pathogenic microorganisms in food in a short time. This paper mainly explores the PCR technology and its application in the detection of food microorganisms， analyzes the development situation of the technology and the key points of its use， and further improves the food safety in China and practically guarantees the health status of people.

Key words：PCR; Food safety testing; Pathogenic agent

我國以往的食品微生物檢測方式通常都是培養(yǎng)可能的病原體，再對這些病原體進(jìn)行檢測，該種檢測方式所耗用的資金量比較大，整體的成本費(fèi)用比較高，并且檢測速度慢，工作效率低下，不能達(dá)到現(xiàn)階段我國食品安全檢測要求標(biāo)準(zhǔn)。PCR技術(shù)進(jìn)行了改良及處理，改良后的檢測方式可以更精確地檢測出食品中的各類病原體，該技術(shù)的快捷性及靈活度比較高，已經(jīng)廣泛投入到我國的食品微生物檢測中。隨著人們生活水平的提升，人們的安全意識開始不斷增強(qiáng)，這給我國食品安全檢驗(yàn)工作的開展帶來了挑戰(zhàn)，需要合理的借助PCR技術(shù)，完善食品微生物檢測工作內(nèi)容[1]。

1 PCR技術(shù)在食品微生物檢測中的優(yōu)勢

我國傳統(tǒng)的檢測方式主要是培養(yǎng)致病菌，培養(yǎng)致病菌所損耗的時間比較長，前期培養(yǎng)過程需要耗費(fèi)大量的人力物力資源，整體操作過程較為繁瑣，并且各類微生物實(shí)際生長所需要的pH值以及溫度等數(shù)值都有所差異。在培養(yǎng)過程中，耗用的培養(yǎng)時間比較長，要對其細(xì)胞特征以及格蘭氏染色狀況進(jìn)行更為細(xì)致的觀察及分析，鑒定各類生物的特性，分辨出各類微生物，該項(xiàng)工作的難度比較高，尤其是對于弱勢菌種來說，其檢測難度更是比較大[2]。

PCR技術(shù)便捷性比較強(qiáng)，PCR技術(shù)所使用的設(shè)備數(shù)量比較少，操作更加簡便，總檢測過程更加便捷。PCR技術(shù)可以在較短的時間內(nèi)得到檢測結(jié)果，該項(xiàng)技術(shù)準(zhǔn)確性比較高，食品安全當(dāng)中的微生物類別會比較繁雜，若使用同一種檢測方式，是不能較為精確的檢測出各類的微生物，但是使用PCR技術(shù)就可以規(guī)避其上述問題的風(fēng)險，同時還可以使得食品微生物檢測的準(zhǔn)確度得到明顯性的提升[3]。

2 PCR技術(shù)在食品微生物檢測中的應(yīng)用

對各類食品微生物檢測的條件以及PCR技術(shù)的使用需求等進(jìn)行分析，使用和其相對應(yīng)的檢測技術(shù)，分析各類PCR技術(shù)的使用優(yōu)劣勢。

2.1 常規(guī)PCR技術(shù)的應(yīng)用

常規(guī)PCR技術(shù)是較為基礎(chǔ)的一類檢測技術(shù)，該技術(shù)的便捷性以及準(zhǔn)確性等比較強(qiáng)，所以將該技術(shù)應(yīng)用到食品安全微生物檢測中的優(yōu)勢也比較強(qiáng)。如在檢驗(yàn)單核細(xì)胞增多癥李氏桿菌的過程中，傳統(tǒng)的檢測方式無法較好地進(jìn)行行檢測。并且簡單的分離技術(shù)不能對單核細(xì)胞增多癥進(jìn)行精確檢測，但是PCR技術(shù)可以高效分離李氏桿菌，并且所損耗的時間也比較短。一般情況下，其檢測僅需12 h即可完成，就能精確判斷出該食品藥品中是否存在李氏桿菌.另外，其所需要使用的樣本數(shù)量也比較少[4]。

2.2 多重PCR技術(shù)的應(yīng)用

多重PCR技術(shù)主要是借助PCR技術(shù)中不同類別互補(bǔ)的原理，以DNA增長速度差異為基準(zhǔn)，分析熒光反射數(shù)值差異。多重PCR技術(shù)的分離速度比較快，且工作果也比較高，但是也存在一定的缺陷，不斷地完善技術(shù)，提高檢測水平才可以將其效用更好地發(fā)揮出來，防止其出現(xiàn)誤測等的問題[5]。

2.3 RT-PCR技術(shù)的應(yīng)用

提取微生物當(dāng)中的RNA，用RNA當(dāng)做模板得到cDNA，利用PCR技術(shù)對其進(jìn)行擴(kuò)增。RT-PCR技術(shù)的檢驗(yàn)效率較高，且靈活度也比較高?？梢跃_識別并辨別出食品中的各類微生物。除此之外，該項(xiàng)技術(shù)還可以分辨出生物特征，突破了生物檢測的有限度，避免檢測不到位等問題，切實(shí)保證檢測結(jié)果以及工作效率。

2.4 熒光PCR技術(shù)的應(yīng)用

不同類別的熒光分子進(jìn)行染色處理，實(shí)時檢測基因標(biāo)靶，對微生物的特異性進(jìn)行分析，依據(jù)病原體的類別，選擇和其相匹配的具有不同特異性的熒光劑，這樣可以在較短的時間內(nèi)精確的判斷出多種病原體。

3 PCR技術(shù)的發(fā)展方向

PCR技術(shù)原理是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，在無細(xì)胞條件下對DNA進(jìn)行克隆。PCR技術(shù)在微生物檢測中，第一步是進(jìn)行細(xì)菌細(xì)胞的富集，在獲取微生物細(xì)胞之后對細(xì)胞進(jìn)行裂解，將其中的DNA完全釋放，再按照微生物的實(shí)際特性選擇合適的引物，最后再使用電泳法，對其中的DNA序列進(jìn)行嚴(yán)格的檢測。PCR技術(shù)的特點(diǎn)就是檢測速度以及檢測精度高，可以對食品中的沙門氏菌、腸出血性大腸桿菌、以及金黃色葡萄球菌等進(jìn)行準(zhǔn)確的測量。因此，PCR技術(shù)在食品的檢測過程中將發(fā)揮極為關(guān)鍵的作用和效果。傳統(tǒng)自動化檢測技術(shù)下，微生物檢測通常需要2～5天不等，較長時間可達(dá)1周或1周以上，因檢測時間過長，往往出現(xiàn)食品已投向市場流轉(zhuǎn)而檢測結(jié)果尚未出來的情況，體現(xiàn)了傳統(tǒng)自動化檢測具有費(fèi)時的弊端，對我國食品行業(yè)實(shí)際生產(chǎn)運(yùn)作造成嚴(yán)重影響，進(jìn)而影響我國社會穩(wěn)定與經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。而高自動化檢測技術(shù)PCR完全規(guī)避了費(fèi)時這一弊端，在較短時間之內(nèi)便能得出檢測結(jié)果，通常幾小時，較長時間僅為1天，因此，高自動化檢測技術(shù)PCR始終對我國食品行業(yè)的發(fā)展具有重要的意義。

4 結(jié)語

目前，我國的PCR技術(shù)仍舊處于一個發(fā)展的時期，需要對該項(xiàng)技術(shù)進(jìn)行完善化的處理，PCR技術(shù)在我國未來食品安全檢測當(dāng)中所占據(jù)的地位以及空間會比較大，且其技術(shù)所發(fā)揮的效應(yīng)也會比較顯著。就長遠(yuǎn)層面進(jìn)行分析，免疫學(xué)及分子生物學(xué)等的使用可以進(jìn)一步的提升食品微生物檢測效果的精確性以及靈活性。利用PCR技術(shù)，設(shè)定好PCR技術(shù)的發(fā)展方向，讓其朝向精確化且標(biāo)準(zhǔn)化的方面發(fā)展，滿足我國當(dāng)代的食品安全檢測需求，針對食品的類別，選擇和其相匹配的檢測工藝技術(shù)，切實(shí)的保障食品的安全。

參考文獻(xiàn)：

[1]夏天爽.流式細(xì)胞術(shù)在食品微生物檢測領(lǐng)域的研究進(jìn)展[J].食品安全導(dǎo)刊，2019（34）：62-64.

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[3]沈正艷.食品安全中微生物檢測技術(shù)的價值[J].食品安全導(dǎo)刊，2019（30）：128.

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[5]陳 晨，王 璐，張 文，等.近紅外光譜技術(shù)在食品微生物檢測中運(yùn)用嘗試[J].食品安全導(dǎo)刊，2019（33）：74.