新生兒乙肝表面抗原陽(yáng)性的確認(rèn)及原因分析①

王菊英 劉瑤瑤 李 鋒

(寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，銀川 750004)

電化學(xué)發(fā)光法(ECLIA)檢測(cè)乙型肝炎病毒(HBV)感染在臨床中診斷率較高[1]。近年來(lái)，臨床檢驗(yàn)中出現(xiàn)多例新生兒乙肝表面抗原(HBsAg)一過(guò)性陽(yáng)性，其母體多數(shù)并非乙型肝炎患者。因此，本研究從本院兒科住院部檢測(cè)乙肝病毒標(biāo)志物(HBV-M)的2 260例接種過(guò)乙肝疫苗的新生兒中，選取99例HBsAg陽(yáng)性新生兒，通過(guò)病例對(duì)照及追蹤監(jiān)測(cè)，明確HBsAg陽(yáng)性新生兒HBV感染狀況并分析其陽(yáng)性原因，為臨床合理解釋新生兒HBV-M結(jié)果提供理論依據(jù)，為正確選擇HBV-M檢測(cè)時(shí)間提供指導(dǎo)性建議。

1 資料與方法

1.1資料

1.1.1研究對(duì)象 選取2014年1月～2017年12月寧夏醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院兒科住院部檢測(cè)HBV-M的2 260例接種過(guò)乙肝疫苗的新生兒，其中，男性1 335例、女性925例、年齡1～28 d。

1.1.2儀器及試劑 ROCHE COBAS E601電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品(羅氏公司)；總膽紅素檢測(cè)使用奧森多VITROS5600全自動(dòng)干式生化免疫分析儀及其配套試劑、校準(zhǔn)品及質(zhì)控品(中國(guó)奧森多醫(yī)療器械貿(mào)易有限公司)。

1.2方法 采集2 260例新生兒靜脈血2～3 ml，檢測(cè)HBV-M，HBsAg陽(yáng)性者立即采用原管血清進(jìn)行HBsAg定量復(fù)檢，確認(rèn)陽(yáng)性者納入觀(guān)察組，陰性者納入對(duì)照組，將觀(guān)察組依據(jù)年齡分為1～7 d組、8～14 d組和15～28 d組，對(duì)照組依據(jù)臨床診斷是否為高膽紅素血癥分為黃疸組和非黃疸組。知情同意后，觀(guān)察組進(jìn)行1～2周HBV-M追蹤監(jiān)測(cè)，收集所有新生兒的臨床診斷、HBV-M及總膽紅素(TBIL)檢測(cè)結(jié)果，觀(guān)察組患兒母親的HBV感染資料，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS25.0軟件統(tǒng)計(jì)分析。樣本率比較采用χ2檢驗(yàn)，平均值比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1觀(guān)察組HBV-M特征、追蹤監(jiān)測(cè)結(jié)果及其母親HBV感染狀況 經(jīng)HBsAg定量確認(rèn)，觀(guān)察組納入99例，陽(yáng)性率4.4%(99/2 260)。觀(guān)察組HBV-M模式主要以單項(xiàng)HBsAg(+)為主，占比62.6%(62/99)，其次為HBsAg(+)合并HBsAb(+)，占比20.2%(20/99)；1～7 d組新生兒陽(yáng)性檢出率最高，占比97.0(96/99)；3例HBeAg陽(yáng)性者(出生時(shí)均進(jìn)行了乙肝疫苗聯(lián)合乙肝高效價(jià)免疫球蛋白的標(biāo)準(zhǔn)免疫預(yù)防)其母親為乙肝“大三陽(yáng)”，其余患兒母親HBsAg陰性，HBsAg定量測(cè)定值前者為3.84(0.5～11.5)U/ml，后者為0.11(0.06～0.24)U/ml，均為低值；追蹤監(jiān)測(cè)，第1周3例HBeAg陽(yáng)性者HBV-M模式未變，67例HBsAg轉(zhuǎn)陰，29例患兒測(cè)定值明顯降低，并于第2周轉(zhuǎn)陰20例、9例未檢。觀(guān)察組HBV-M的檢出情況詳見(jiàn)表1。

2.2觀(guān)察組、黃疸組及非黃疸組總膽紅素比較 觀(guān)察組中新生兒高膽紅素血癥者為50例，占比50.5%。為排除新生兒黃疸引起HBsAg檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性，比較觀(guān)察組、黃疸組及非黃疸組總膽紅素檢測(cè)結(jié)果。觀(guān)察組與黃疸組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與非黃疸組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；黃疸組與非黃疸組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表1 觀(guān)察組HBV-M檢測(cè)結(jié)果

Tab.1 Results of HBV-M in observation group

Mode of HBV-M1-7 d8-14 d15-28 dTotalHBsAg(+)601162HBsAg(+) HBeAg(+) HBcAb(+)2002HBsAg(+) HBeAb(+) HBcAb(+)2002HBsAg(+) HBsAb(+) HBeAg(+) HBeAb(+) HBcAb(+)0011HBsAg(+) HBsAb(+)200020HBsAg(+) HBsAb(+) HBcAb(+)1001HBsAg(+) HBsAb(+) HBeAb(+) HBcAb(+)6006HBsAg(+) HBsAb(+) HBeAb(+)2002HBsAg(+) HBcAb(+)3003Total961299

GroupsnTBIL(μmol/L)tPObservation50247.2±73.11.012>0.05Jaundice526264.2±68.75.113<0.05Non-Jaundice1 635166.9±71.39.723<0.05

表3 觀(guān)察組與對(duì)照組HBsAb陽(yáng)性率及其測(cè)定值比較

Tab.3 Comparison of HBsAb positive rate and results between observation group and control group

GroupsnPositive rate(%)χ2PResults(U/L)tPObservation9930.3(30/99)62.4<0.0555.1(12-1000)6.1<0.05Control2 16168.6(1 481/2 161)272.3(10-948)

2.3觀(guān)察組與對(duì)照組間HBsAb檢測(cè)結(jié)果比較 觀(guān)察組HBsAb陽(yáng)性率及其測(cè)定值均低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

3 討論

HBsAg是乙肝病毒的外殼蛋白,本身不具有傳染性，但常伴隨乙肝病毒存在,HBsAg陽(yáng)性可表示HBV感染[2]。本研究觀(guān)察組99例HBsAg陽(yáng)性新生兒均經(jīng)定量確認(rèn)，定量檢測(cè)HBsAg血清標(biāo)志物可有效反映HBV DNA復(fù)制程度，HBV DNA載量是反映HBV感染的最直接指標(biāo)，由此表明該組患兒可能感染HBV，母嬰垂直傳播為HBV感染的主要途徑[3-5]。觀(guān)察組僅3例患兒母親為乙肝“大三陽(yáng)”，其余患兒母親均為HBsAg陰性，經(jīng)1～2周追蹤監(jiān)測(cè)共計(jì)87例HBsAg(+)轉(zhuǎn)陰，表明觀(guān)察組87.9%(87/99)未感染HBV。鑒于觀(guān)察組50.5%(50/99)為高膽紅素血癥患兒，為排除新生兒黃疸引起HBsAg檢測(cè)結(jié)果假陽(yáng)性，本研究比較觀(guān)察組、黃疸組及非黃疸組間總膽紅素檢測(cè)結(jié)果，結(jié)果顯示觀(guān)察組與黃疸組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，與非黃疸組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HBsAg試劑說(shuō)明書(shū)標(biāo)明膽紅素<684 μmol/L檢測(cè)結(jié)果不受影響,而觀(guān)察組總膽紅素為(247.2±73.1)μmol/L，小于此截?cái)嘀?，由此可?jiàn)新生兒黃疸對(duì)HBsAg檢測(cè)結(jié)果無(wú)影響。

乙肝疫苗主要成分不含有病毒遺傳物質(zhì)HBsAg，不具有致病性，但保留了免疫原性，能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生保護(hù)性抗體[6]。新生兒接種乙肝疫苗后會(huì)發(fā)生HBsAg一過(guò)性陽(yáng)性，主要發(fā)生于接種后0～7 d，以單項(xiàng)HBsAg(+)為主，同時(shí)伴有合并性HBsAb(+)，HBsAg定量為低值水平[6-13]。本研究觀(guān)察組1～7 d組新生兒HBsAg陽(yáng)性檢出率占97.0%(96/99)，HBV-M模式主要以單項(xiàng)HBsAg(+)為主，占比62.6%(62/99)，其次為HBsAg(+)合并HBsAb(+)，占比20.2%(20/99)，除3例HBeAg(+)者外，其余新生兒HBsAg定量測(cè)定為0.11(0.06～0.24)U/ml的低值水平，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。劉華等[7]將乙肝疫苗1∶600稀釋后檢測(cè)HBsAg為0.13 U/ml，與本研究觀(guān)察組HBsAg定量濃度相似。鑒于87例HBsAg轉(zhuǎn)陰新生兒均接種過(guò)乙肝疫苗，HBV-M特征與報(bào)道一致，HBsAg已通過(guò)定量確認(rèn)，并除了母嬰垂直傳播及黃疸影響檢測(cè)結(jié)果等因素，由此推測(cè)是接種乙肝疫苗即刻檢測(cè)引起的HBsAg一過(guò)性陽(yáng)性。

張楠[14]認(rèn)為新生兒HBsAb陽(yáng)性率及病毒滴度均與母親HBsAb有關(guān)，對(duì)乙肝疫苗主動(dòng)免疫具有負(fù)面效果。武巧珍[15]等也報(bào)道新生兒可通過(guò)胎盤(pán)獲得母源性HBsAb，且這些HBsAb能有效中和HBsAg，保護(hù)新生兒免受HBV感染，但同時(shí)也抑制乙肝疫苗的接種效果。本研究中，觀(guān)察組HBsAb陽(yáng)性率及其測(cè)定值均低于對(duì)照組P<0.05，由此提示對(duì)照組HBsAg檢測(cè)結(jié)果陰性是由于高濃度的母源性HBsAb中和了乙肝疫苗中HBsAg，而觀(guān)察組因無(wú)HBsAb或濃度較低，無(wú)法中和或結(jié)合乙肝疫苗中HBsAg，導(dǎo)致陽(yáng)性。

如果母源性HBsAb可以中和乙肝疫苗中的HBsAg，但觀(guān)察組中出現(xiàn)的20例HBsAg合并HBsAb陽(yáng)性、10例HBsAg、HBsAb合并其他乙肝標(biāo)志物陽(yáng)性的模式的原因未明確。文獻(xiàn)報(bào)道S基因突變誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生的無(wú)效中和抗體不具備保護(hù)作用，試推測(cè)此類(lèi)新生兒體內(nèi)的母源性HBsAb可能為抗病毒變異株抗體，無(wú)法中和乙肝疫苗中的HBsAg，此推論有待進(jìn)一步研究[16]。本研究不足之處在于3例HBeAg(+)及9例未完成追蹤監(jiān)測(cè)新生兒的HBV感染狀況未明確，有待日后補(bǔ)充病例繼續(xù)研究。

綜上所述，HBsAg陽(yáng)性多出現(xiàn)于1周齡內(nèi)新生兒，多數(shù)經(jīng)2周后轉(zhuǎn)陰，表明并未感染HBV，為接種乙肝疫苗即刻檢測(cè)所致。由此提示，新生兒檢測(cè)HBV-M最好選擇在接種乙肝疫苗2～3周后。