豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室在豬病防控中的作用及其應(yīng)用

馮建遠(yuǎn) 馬青蘭 郭 旋趙放英 劉德清 羅 偉 曾 香 張 寧

（廣西農(nóng)墾永新畜牧集團(tuán)金光有限公司，廣西南寧 530023）

在當(dāng)前的養(yǎng)豬行業(yè)中，新病突發(fā)、老病復(fù)發(fā)或老病新型新發(fā)的情況不斷出現(xiàn)，如非洲豬瘟的發(fā)生與威脅，豬丹毒、豬偽狂犬病、不同亞型的口蹄疫和高致病性豬繁殖與呼吸綜合征的感染。此外，在豬場(chǎng)生產(chǎn)過(guò)程中還存在著不同程度的隱性感染、非典型癥狀感染和混合感染，使得獸醫(yī)很難根據(jù)臨床癥狀和病理變化進(jìn)行確診，必須依靠正確的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行判斷。正確的鑒別診斷對(duì)于某種疾病的適時(shí)預(yù)警大有裨益，準(zhǔn)確的診斷是豬病治療的前提，抗體水平監(jiān)測(cè)是制定科學(xué)合理免疫程序的關(guān)鍵，而這些工作的有序開(kāi)展終究離不開(kāi)實(shí)驗(yàn)室的支撐[1]。

相比市場(chǎng)上獨(dú)立的經(jīng)營(yíng)性檢測(cè)機(jī)構(gòu)，養(yǎng)豬企業(yè)或豬場(chǎng)配備診斷實(shí)驗(yàn)室（以下統(tǒng)稱為“豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室”）在豬病防控中的作用會(huì)更加明顯，可以使檢測(cè)更有針對(duì)性，結(jié)果更加快速、分析更加貼近生產(chǎn)一線，指導(dǎo)意見(jiàn)更能發(fā)揮豬場(chǎng)庫(kù)存用藥的習(xí)慣。

1 豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室在豬病防控中的作用

1.1 建立穩(wěn)固的豬場(chǎng)生物安全體系

通過(guò)實(shí)驗(yàn)室的輔助作用，建立并加固豬場(chǎng)的生物安全體系，一是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)把關(guān)好人流、豬流、車流和物流進(jìn)入豬場(chǎng)的關(guān)卡，杜絕豬病傳染源進(jìn)入豬場(chǎng)，特別是在當(dāng)前非洲豬瘟疫情防控中，通過(guò)有檢測(cè)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室對(duì)待入或靠近豬場(chǎng)的人員、豬群、車輛和物資進(jìn)行檢測(cè)，及時(shí)將病毒隔絕在場(chǎng)外；二是通過(guò)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)將感染豬只快速識(shí)別并清除，避免其他動(dòng)物的感染與傳播，比如某種特定疾病的凈化；三是通過(guò)篩選有效藥物、疫苗提高豬群的健康度，抵抗疾病的威脅。

1.2 針對(duì)性病原檢測(cè)，快速確診疾病，對(duì)癥治療

在豬場(chǎng)正常生產(chǎn)中，定期對(duì)豬場(chǎng)豬群進(jìn)行病原學(xué)檢測(cè)，了解豬群是否攜帶或感染某種病原，從而了解豬群的健康狀況，一旦豬場(chǎng)生產(chǎn)情況出現(xiàn)異?；蜇i只發(fā)病，豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室可以第一時(shí)間到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)，通過(guò)臨床癥狀和病理變化對(duì)其進(jìn)行初步診斷，再通過(guò)實(shí)驗(yàn)室針對(duì)性的及時(shí)檢測(cè)，達(dá)到快速確診疾病，采取科學(xué)合理的方案控制疫情，防止疾病的蔓延，減少豬場(chǎng)損失。

同時(shí)，對(duì)病原檢測(cè)陽(yáng)性的樣品，可以進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)室鑒定。比如分離細(xì)菌的亞型鑒定，區(qū)分某些病毒是野毒株還是疫苗株的感染，如豬偽狂犬病毒；也可以做到經(jīng)典株和高致病性變異株的區(qū)分，如豬繁殖與呼吸綜合征病毒。

1.3 細(xì)菌分離，了解細(xì)菌感染情況和耐藥情況，更加科學(xué)合理用藥

從豬場(chǎng)樣品中分離鑒定的致病菌，豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室可以進(jìn)行進(jìn)一步的生物學(xué)鑒定，同時(shí)選擇豬場(chǎng)常用藥物進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，這樣可以了解豬場(chǎng)常見(jiàn)菌的分布情況、藥物耐藥情況，以評(píng)估階段性用藥效果，為豬場(chǎng)科學(xué)合理用藥、更換用藥提供依據(jù)。

1.4 抗體監(jiān)測(cè)，監(jiān)測(cè)豬群健康，制定和優(yōu)化合理的免疫程序

按照制定的年度豬群主要疫病監(jiān)測(cè)方案，對(duì)豬場(chǎng)各階段豬群進(jìn)行相應(yīng)的抗體監(jiān)測(cè)。

通過(guò)檢測(cè)血清抗體的變化，了解豬群的整體免疫狀況，及早發(fā)現(xiàn)問(wèn)題，及早采取措施，對(duì)豬群的群體健康起到一種預(yù)警的作用。以常使用的IDEXX公司藍(lán)耳病抗體S/P值為例，S/P值檢測(cè)的是N蛋白，和藍(lán)耳病病毒中和抗體沒(méi)有任何相關(guān)性，它反映的是豬群的藍(lán)耳病病毒波動(dòng)狀態(tài)。育肥豬發(fā)生嚴(yán)重呼吸道疾病，母豬出現(xiàn)發(fā)燒、流產(chǎn)、不食等癥狀，通過(guò)病原檢測(cè)只有藍(lán)耳病病毒甚至沒(méi)檢測(cè)到任何病原，其他項(xiàng)目抗體檢測(cè)均未發(fā)現(xiàn)異常，只是此時(shí)S/P會(huì)出現(xiàn)急劇的升高，和臨床癥狀基本是同步的。那么通過(guò)這一特性可以對(duì)公豬、后備豬等進(jìn)行健康狀態(tài)的監(jiān)測(cè)，以判斷公豬是否可用或后備豬能否入群[2]。

根據(jù)抗體消長(zhǎng)規(guī)律，制定或優(yōu)化合理的免疫程序。如對(duì)豬群各階段的豬瘟抗體進(jìn)行監(jiān)測(cè)（見(jiàn)圖1），陽(yáng)性率低于30%或平均阻斷率在45%左右時(shí)考慮進(jìn)行首免[2]，確定豬瘟首免時(shí)間為4～5周齡；小豬偽狂犬gB抗體S/N值在0.3左右時(shí)考慮首免等[3]。

1.5 篩選有效的藥物和疫苗

從豬場(chǎng)樣品中分離鑒定的致病菌，獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室根據(jù)豬場(chǎng)常用的藥物對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的藥物敏感性試驗(yàn)或者消毒藥的消殺試驗(yàn)，以評(píng)估目前所用藥物的效果，也給豬場(chǎng)選擇抗生素和消毒藥提供依據(jù)，從而更加有效控制原發(fā)性和繼發(fā)性細(xì)菌感染。

此外，合理的運(yùn)用抗體檢測(cè)手段有助于篩選出適合本場(chǎng)的優(yōu)秀疫苗，如豬瘟抗體阻斷率和中和抗體水平呈正相關(guān)，可以通過(guò)種豬免疫豬瘟疫苗后4～6周的豬瘟抗體水平來(lái)初步評(píng)價(jià)疫苗效果；偽狂犬gB抗體S/N值高低可以用來(lái)比較不同廠家偽狂犬疫苗的效果等[3]。

1.6 毒素檢測(cè)，了解飼料霉菌毒素情況，防止霉菌毒素危害

豬場(chǎng)環(huán)境中和飼料中的霉菌毒素，不但會(huì)降低飼料營(yíng)養(yǎng)、引起飼料資源浪費(fèi)，而且還可能影響豬只的細(xì)胞代謝，抑制免疫系統(tǒng)機(jī)能，降低機(jī)體抵抗力。其中對(duì)豬只危害最為嚴(yán)重的主要有黃曲霉毒素（AFT）、赭曲霉毒素（OTA）、煙曲霉毒素/伏馬毒素（FUM）、玉米赤霉烯酮（ZON）、嘔吐毒素（DON）和T2毒素。豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室通過(guò)對(duì)飼料原料和成品料，以及豬場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)料槽等進(jìn)行定期的取樣檢測(cè)，就可以了解飼料原料、成品料及豬舍環(huán)境中的毒素含量，并據(jù)此采取必要措施規(guī)避其危害。

1.7 疫病凈化，制定并實(shí)施可行有效的疫病凈化方案

通過(guò)對(duì)某種特定疫病病毒的抗體水平監(jiān)測(cè)，了解豬場(chǎng)該特定病原的存在情況，確定感染豬群或豬只，制定適合豬場(chǎng)的凈化方案。比如豬偽狂犬病，豬只一旦感染偽狂犬病毒，將會(huì)終身帶毒，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行抗體篩查—淘汰—免疫等措施進(jìn)行凈化（圖2）。

2 獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室工作的開(kāi)展及注意事項(xiàng)

在獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展工作的過(guò)程中，不僅要注重檢測(cè)的準(zhǔn)確性和時(shí)效性，更為重要的是檢測(cè)后數(shù)據(jù)的綜合科學(xué)分析和防控措施的規(guī)劃。因此，快速、準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)室診斷對(duì)于豬病防控的作用不言而喻，而如何確保檢測(cè)結(jié)果的可靠、可信，則需要從采樣、運(yùn)輸、檢測(cè)、分析4個(gè)方面科學(xué)把握。

2.1 臨床樣品的采集與送檢

2.1.1 血清學(xué)抗體監(jiān)測(cè)

前腔靜脈或耳緣靜脈采血2～5 mL，血液4℃冷藏送樣，避免震蕩造成溶血。群體采集根據(jù)豬場(chǎng)情況具體實(shí)施，但應(yīng)滿足一定統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（可參考不同規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)疫病抗體監(jiān)測(cè)樣本推薦采樣分布及數(shù)量參照表）。樣品需4℃保存并及時(shí)送到實(shí)驗(yàn)室，越快越好，最好在24 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室，一般不能超過(guò)48 h。

2.1.2 發(fā)病病原檢測(cè)

選擇臨床癥狀典型、能代表整個(gè)豬群發(fā)病特點(diǎn)的病豬2～3頭進(jìn)行剖解，根據(jù)懷疑疫病采集病原嗜性組織，以淋巴結(jié)、扁桃體、肺臟、腎臟、脾臟、血樣為主。作細(xì)菌性病原檢測(cè)，應(yīng)該選擇送檢前5～7 d內(nèi)未使用抗生素治療的待剖豬只。內(nèi)臟病料的采取，不能選擇死亡3 h以上的死亡豬只的病料。采樣后4℃保存，運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室后馬上開(kāi)展檢測(cè)工作，如不能及時(shí)送至實(shí)驗(yàn)室或者實(shí)驗(yàn)室不能馬上開(kāi)展樣品處理和檢測(cè)，應(yīng)－20℃凍存，嚴(yán)禁檢測(cè)前反復(fù)凍融。

2.2 臨床樣品的檢測(cè)與分析

全面、準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果分析對(duì)于防控措施的提出和實(shí)施至關(guān)重要。因此，除了將檢測(cè)與分析有機(jī)結(jié)合外（如樣品采集與處理的細(xì)節(jié)，檢測(cè)環(huán)境的干擾等），還要根據(jù)豬場(chǎng)的實(shí)際情況考慮分析，包括豬場(chǎng)的飼養(yǎng)環(huán)境、管理水平、豬群的群體健康狀況，以及發(fā)病豬只的發(fā)病情況和治療情況，豬場(chǎng)歷史疾病發(fā)生情況，豬場(chǎng)所在區(qū)域疾病流行現(xiàn)狀等。并且做到豬場(chǎng)檢測(cè)數(shù)據(jù)、檢測(cè)結(jié)果、預(yù)防與治療效果的持續(xù)性跟蹤服務(wù)，只有這樣，才能發(fā)揮獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室的最大效用。

2.3 獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室工作人員的要求

在開(kāi)展獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室工作的過(guò)程中，對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員的要求也很高：一是考量工作人員的細(xì)心和耐心，因?yàn)殚_(kāi)展一項(xiàng)檢測(cè)工作，準(zhǔn)備工作比較繁瑣，操作時(shí)間較長(zhǎng)；二是工作人員要有一定的實(shí)驗(yàn)室操作經(jīng)驗(yàn)，比如有經(jīng)驗(yàn)的人員比較懂得選擇合適的采樣時(shí)機(jī)和采樣部位。同時(shí)檢測(cè)的儀器比較精密，試劑量小且易受污染，對(duì)工作人員的實(shí)操經(jīng)驗(yàn)是很大的考驗(yàn)。三是工作人員要有扎實(shí)的豬場(chǎng)生產(chǎn)管理經(jīng)驗(yàn)以及與豬場(chǎng)溝通的水平，這樣對(duì)于檢測(cè)數(shù)據(jù)的分析、處理措施的落實(shí)與跟蹤，效果的評(píng)估很有意義，也保證了一項(xiàng)檢測(cè)工作的有效性。四是豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室工作人員的培養(yǎng)成本也是一筆不小的開(kāi)支，因此，要留住有經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)室工作人員，需要提供一定的收入水平和職業(yè)生涯平臺(tái)。

3 小結(jié)

豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室在豬病防控中的作用舉足輕重，無(wú)論是哪方面的應(yīng)用，都應(yīng)將檢測(cè)與分析，實(shí)驗(yàn)室與豬場(chǎng)相結(jié)合，并做好持續(xù)性的跟蹤。只有如此，才能發(fā)揮獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室的最大效用?？茖W(xué)專業(yè)的檢測(cè)手段加之合理可行的解決方案遠(yuǎn)比免費(fèi)的增值服務(wù)來(lái)的劃算。據(jù)統(tǒng)計(jì)，如果豬場(chǎng)每年的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)成本為2萬(wàn)元，那么通過(guò)專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)并積極采取科學(xué)合理的保健和免疫措施，可挽回因發(fā)病而引起的經(jīng)濟(jì)損失和隱性損失20萬(wàn)～200萬(wàn)元。因此，獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室對(duì)豬病防控至關(guān)重要。

可以預(yù)想，由于更多的豬場(chǎng)診斷實(shí)驗(yàn)室更直接地參與到豬場(chǎng)生產(chǎn)中來(lái)，豬場(chǎng)預(yù)警系統(tǒng)必將越來(lái)越完善，終將有一天我們的豬場(chǎng)不用忙于“整天救火”，而是從容淡定地進(jìn)行健康管理。