miR-141-3p 表達(dá)對(duì)人異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞增殖與凋亡影響及其機(jī)制

劉文博　封全靈

[摘要] 目的 探討微小RNA-141-3p（miR-141-3p）對(duì)人異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞（HEEC）增殖和凋亡的影響及其機(jī)制。

方法 采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)異位子宮內(nèi)膜組織及正常子宮內(nèi)膜組織中miR-141-3p的表達(dá)。體外原代培養(yǎng)HEEC，miR-141-3p mimics轉(zhuǎn)染至HEEC后，采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。采用雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證miR-141-3p與高遷移率族蛋白B1（HMGB1）的靶向調(diào)控作用。

結(jié)果 異位子宮內(nèi)膜組織中miR-141-3p的表達(dá)水平明顯低于正常子宮內(nèi)膜組織（t=56.880，P<0.001）;miR-141-3p過(guò)表達(dá)能顯著降低HEEC增殖活力（t=10.972，P<0.001），升高細(xì)胞凋亡率（t=18.233，P<0.001）;miR-141-3p可靶向結(jié)合HMGB1。

結(jié)論 miR-141-3p過(guò)表達(dá)可通過(guò)靶向調(diào)控HMGB1而抑制HEEC增殖，誘導(dǎo)其凋亡。

[關(guān)鍵詞] 子宮內(nèi)膜異位癥;微RNAs;靶基因修復(fù);高遷移率族蛋白質(zhì)類(lèi);細(xì)胞增殖;細(xì)胞凋亡

[中圖分類(lèi)號(hào)] R711.71;R394.3

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼] A

[文章編號(hào)] 2096-5532（2020）03-0342-05

doi：10.11712/jms.2096-5532.2020.56.108

[開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）]

[網(wǎng)絡(luò)出版] https：//kns.cnki.net/kcms/detail/37.1517.R.20200610.1435.007.html;2020-06-11 11：19

EFFECT OF MIR-141-3P EXPRESSION ON THE PROLIFERATION AND APOPTOSIS OF HUMAN ECTOPIC ENDOMETRIAL CELLS AND RELATED MECHANISM

LIU Wenbo， FENG Quanling

（Department of Obstetrics and Gynecology， The Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University， Zhengzhou 450052， China）

[ABSTRACT]ObjectiveTo investigate the effect of miR-141-3p on the proliferation and apoptosis of human ectopic endometrial cells （HEECs） and related mechanism.

MethodsQuantitative real-time PCR was used to measure the expression of miR-141-3p in ectopic endometrial tissue and normal endometrial tissue. Primary HEECs were cultured in vitro， and after miR-141-3p mimics were transfected into HEECs， MTT assay was used to measure cell viability and flow cytometry was used to mea-

sure apoptosis rate. The dual-luciferase reporter experiment was used to verify the targeted regulatory effect of miR-141-3p and high-mobility group box 1 （HMGB1）.

ResultsThe expression level of miR-141-3p in ectopic endometrial tissue was significantly lower than that in normal endometrial tissue （t=56.880，P<0.001）. Overexpression of miR-141-3p can significantly reduce the proliferative activity of HEECs （t=10.972，P<0.001） and increase cell apoptosis rate （t=18.233，P<0.001）. miR-141-3p could target HMGB1.

ConclusionmiR-141-3p overexpression may inhibit the proliferation of HEECs and induce apoptosis through targeted regulation of HMGB1.

[KEY WORDS]endometriosis; microRNAs; targeted gene repair; high mobility group proteins; cell proliferation; apoptosis

目前關(guān)于子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明[1-2]。既往研究已表明，體腔化生、血管轉(zhuǎn)移等均可能引發(fā)子宮內(nèi)膜異位癥，而人異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞（HEEC）惡性增殖及凋亡能力降低是子宮內(nèi)膜異位癥的主要病理機(jī)制[3-4]。因此，深入探究HEEC增殖及凋亡的分子機(jī)制有助于提高子宮內(nèi)膜異位癥治療效果。研究已表明，微小RNA-141（microRNA-141，miR-141）在子宮內(nèi)膜異位癥病人中表達(dá)下調(diào)，但關(guān)于其具體作用機(jī)制尚未明確[5-6]。miR-141是微小RNA-141-3p（microRNA-141-3p，miR-141-3p）的前體，關(guān)于miR-141-3p對(duì)HEEC生物行為的影響及其機(jī)制研究相對(duì)較少。已有研究表明，子宮內(nèi)膜異位癥病人中高遷移率族蛋白 B1（HMGB1）的表達(dá)水平升高，其可能通過(guò)調(diào)節(jié)新生血管生成而參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程[7]。Target Scan網(wǎng)站預(yù)測(cè)顯示，HMGB1可能是miR-141-3p的靶基因，但miR-141-3p是否可通過(guò)靶向調(diào)控HMGB1而影響HEEC的增殖及凋亡尚未明確。為此，本研究探討miR-141-3p表達(dá)對(duì)HEEC增殖及凋亡的影響，分析其與HMGB1的靶向調(diào)控關(guān)系及其可能作用機(jī)制?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2016年2月—2018年10月，選取本院收治的45例子宮內(nèi)膜異位癥病人為研究對(duì)象，年齡35～60歲，平均（45.52±5.62）歲。臨床分期[8]：Ⅱ期10例，Ⅲ期20例，Ⅳ期15例。所有病人均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)為子宮內(nèi)膜異位癥，術(shù)前3個(gè)月內(nèi)未服用性激素類(lèi)藥物，于術(shù)中切取異位內(nèi)膜組織。同時(shí)，選取同期因婦科良性病變進(jìn)行子宮切除術(shù)的43例病人為對(duì)照組，年齡為42～60歲，平均（56.72±7.13）歲。所有病人均經(jīng)手術(shù)病理證實(shí)，術(shù)中切取正常子宮內(nèi)膜組織。排除合并其他生殖系統(tǒng)腫瘤者。兩組病人年齡、月經(jīng)周期等相比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，病人均知情并簽署同意書(shū)。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

DMEM培養(yǎng)基購(gòu)自美國(guó)Hyclone公司;胰蛋白酶和胎牛血清均購(gòu)自美國(guó)Gibco公司;Ⅰ型膠原酶購(gòu)自上海百賽生物技術(shù)股份有限公司;miR-141-3p mimics、miR-141-3p抑制劑（anti-miR-141-3p）及其各自陰性對(duì)照試劑均購(gòu)自廣州銳博生物科技有限公司;Lipofectamine2000購(gòu)自美國(guó)Invitrogen公司;Trizol試劑購(gòu)自北京全式金生物技術(shù)有限公司;反轉(zhuǎn)錄試劑盒與實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Thermo Fisher公司;MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海生物工程股份有限公司;Annexin V-FITC/PI檢測(cè)試劑盒購(gòu)自武漢艾美捷科技有限公司;雙熒光素酶活性檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司;RIPA裂解液購(gòu)自美國(guó)Sigma公司;兔抗人Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax抗體購(gòu)自美國(guó)Abcam公司;HRP標(biāo)記的IgG二抗購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司;兔抗人HMGB1抗體購(gòu)自武漢菲恩生物科技有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 體外原代培養(yǎng)HEEC 應(yīng)用差速梯度離心與細(xì)胞貼壁時(shí)間差等方法分離異位內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞。剪碎膜組織，Ⅰ型膠原酶（2 g/L）消化60 min，用100目濾網(wǎng)過(guò)濾，將含有PBS的DMEM培養(yǎng)液加入濾液內(nèi)，4 ℃條件下，以700 r/min離心7 min，棄上清，接種至培養(yǎng)皿（間質(zhì)細(xì)胞），加入含有體積分?jǐn)?shù)0.10胎牛血清的培養(yǎng)液，放入37 ℃、體積分?jǐn)?shù)0.05 CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)[9]。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)分組 待HEEC傳代至第3代時(shí)，收集生長(zhǎng)狀態(tài)良好的HEEC，隨機(jī)分為miR-NC組（細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-NC）、miR-141-3p組（轉(zhuǎn)染miR-141-3p mimics的細(xì)胞）。嚴(yán)格按照Lipofectamine2000轉(zhuǎn)染試劑說(shuō)明書(shū)的步驟進(jìn)行操作，轉(zhuǎn)染6 h后更換含有體積分?jǐn)?shù)0.10胎牛血清的DMEM完全培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)48 h，收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞完成功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。

1.3.3 qRT-PCR檢測(cè)miR-141-3p表達(dá)水平 采用Trizol法分別提取正常子宮內(nèi)膜組織、異位子宮內(nèi)膜組織、HEEC的總RNA，依次分別加入200 μL 氯仿與500 μL異丙醇，4 ℃下、12 000 r/min離心15 min，棄上清，RNA沉于管底。以體積分?jǐn)?shù)0.75乙醇洗滌RNA沉淀，晾干后加入適量無(wú)RNA酶水，充分溶解RNA，置于-80 ℃超低溫冰箱保存。應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA，qRT-PCR法檢測(cè)miR-141-3p相對(duì)表達(dá)量。反應(yīng)條件：95 ℃、5 min，95 ℃、30 s，60 ℃、30 s，72 ℃、30 s，共循環(huán)40次。miR-141-3p以U6為內(nèi)參，采用 2-ΔΔCt法計(jì)算miR-141-3p的表達(dá)水平。

1.3.4 MTT檢測(cè)細(xì)胞增殖 收集轉(zhuǎn)染后各組的HEEC，胰蛋白酶消化，制備細(xì)胞懸浮液，以每孔3×105個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔板。分別于培養(yǎng)24、48、72 h時(shí)每孔入MTT溶液20 μL，室溫孵育4 h，棄上清，每孔加入二甲基亞砜（DMSO）溶液150 μL，低速振蕩10 min。利用酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔在490 nm波長(zhǎng)處的吸光度（A）。每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。

1.3.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡 收集各組對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HEEC，PBS洗滌，胰蛋白酶消化，4 ℃下、10 000 r/min離心5 min。PBS洗滌細(xì)胞，分別加入200 μL結(jié)合緩沖液，依次加入5 μL 的Annexin V-FITC與5 μL 的PI，室溫避孵育20 min。置于流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。 每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。

1.3.6 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè) 靶基因預(yù)測(cè)網(wǎng)站預(yù)測(cè)miR-141-3p的靶基因，預(yù)測(cè)顯示miR-141-3p與HMGB1的3′UTR存在結(jié)合位點(diǎn)，將含有miR-141-3p結(jié)合位點(diǎn)及其突變位點(diǎn)的HMGB1-3′UTR片段插入PGL3熒光素酶報(bào)告基因載體，構(gòu)建野生型（WT-HMGB1）與突變型（MUT-HMGB1）的熒光素酶報(bào)告載體。實(shí)驗(yàn)分為4組：WT-HMGB1+miR-NC共轉(zhuǎn)染組、WT-HMGB1+miR-141-3p mimics共轉(zhuǎn)染組、MUT-HMGB1+miR-NC共轉(zhuǎn)

染組、MUT-HMGB1+miR-141-3p mimics共轉(zhuǎn)染組。轉(zhuǎn)染24 h后收集細(xì)胞，采用雙熒光素酶活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)各組相對(duì)熒光素酶活性。每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。

1.3.7 蛋白免疫印跡（Western blot）檢測(cè)HMGB1、Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax蛋白表達(dá) 分別取各組HEEC，加入細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞，4 ℃條件下、12 000 r/min離心15 min。收集上清，BCA法測(cè)定蛋白濃度。蛋白煮沸變性，取30 μg蛋白上樣進(jìn)行100 g/L的SDS-PAGE凝膠電泳，將分離的蛋白凝膠轉(zhuǎn)移至PVDF膜。50 g/L脫脂奶粉封閉1 h，加入一抗（稀釋比1∶1 000），4 ℃孵育24 h，TBST清洗;加入二抗（稀釋比1∶2 000），室溫孵育30 min，TBST洗膜。應(yīng)用ECL試劑盒進(jìn)行化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，置于凝膠成像系統(tǒng)并應(yīng)用Quantity One軟件定量分析蛋白條帶灰度值。每組實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3次。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以±s表示，兩組均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 正常和異位子宮內(nèi)膜組織miR-141-3p表達(dá)

本文qRT-PCR檢測(cè)結(jié)果表明，正常與異位子宮內(nèi)膜組織中miR-141-3p表達(dá)水平分別為0.87±0.08和0.17±0.02，異位子宮內(nèi)膜組織中miR-141-3p表達(dá)水平較正常子宮內(nèi)膜顯著降低，差異有顯著意義（t=56.880，P<0.001）。

2.2 miR-141-3p過(guò)表達(dá)對(duì)HEEC增殖與凋亡及相關(guān)蛋白影響

HEEC中轉(zhuǎn)染miR-141-3p mimics后，與miR-NC組（對(duì)照組）相比，miR-141-3p組（實(shí)驗(yàn)組）細(xì)胞活力顯著降低（t=10.972～13.403，P<0.001），細(xì)胞凋亡率顯著升高（t=18.233，P<0.001），Cyclin D與Bcl-2蛋白的水平降低（t=24.931、25.456，P<0.001），P21與Bax蛋白的水平則升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=19.312、20.175，P<0.001）。見(jiàn)圖1與表1、2。

2.3 miR-141-3p靶向?qū)MGB1蛋白表達(dá)的影響

Target Scan預(yù)測(cè)顯示，HMGB1的3′UTR含有miR-141-3p的互補(bǔ)序列。見(jiàn)圖2A。雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，WT-HMGB1+miR-NC共轉(zhuǎn)染組、WT-HMGB1+miR-141-3p mimics共轉(zhuǎn)染組、MUT-HMGB1+miR-NC共轉(zhuǎn)染組和MUTHMGB1+miR-141-3p mimics共轉(zhuǎn)染組HMGB1的相對(duì)熒光素酶活性分別為1.05±0.10、0.27±0.03、1.07±0.10和1.02±0.09，HEEC細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-141-3p mimics可顯著降低含有miR-141-3p結(jié)合位點(diǎn)熒光報(bào)告載體的相對(duì)熒光素酶活性（n=9，t=22.413，P<0.001）;后兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.115，P>0.05）。Western blot的檢測(cè)結(jié)果顯示，miR-NC組、miR-141-3p組、anti-miR-NC組和anti-miR-141-3p組HMGB1蛋白表達(dá)分別為0.63±0.06、0.21±0.02、0.64±0.06和0.99±0.10，各組比較差異有顯著性（n=9，F(xiàn)=208.278，P<0.001）。miR-141-3p過(guò)表達(dá)后，細(xì)胞中HMGB1蛋白的水平為0.21±0.02，與miR-NC組的0.63±0.06相比較顯著降低（t=19.922，P<0.05）;抑制miR-141-3p表達(dá)后，細(xì)胞中HMGB1蛋白水平為0.99±0.10，與anti-miR-NC組的0.64±0.06相比較顯著升高（t=9.004，P<0.05）。見(jiàn)圖2B。表明HMGB1是miR-141-3p的靶基因，miR-141-3p可負(fù)性調(diào)控HMGB1的表達(dá)。

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥主要指子宮腔被覆內(nèi)膜外存在子宮內(nèi)膜組織生長(zhǎng)及浸潤(rùn)。研究表明，miRNA可通過(guò)調(diào)控下游靶基因表達(dá)而參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程[10-12]。但仍有部分miRNA在子宮內(nèi)膜異位癥中的機(jī)制尚未完全闡明，因此本研究探尋新型miR-141-3p在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程中的可能作用機(jī)制。miR-141-3p在腫瘤細(xì)胞中呈低表達(dá)，miR-141-3p過(guò)表達(dá)后可顯著抑制細(xì)胞增殖及其侵襲能力，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[13-20]。但是，miR-141-3p在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)及其作用機(jī)制尚不明確。本研究結(jié)果顯示，miR-141-3p在異位子宮內(nèi)膜組織中呈低表達(dá)，說(shuō)明miR-141-3p表達(dá)降低可能參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程。本文進(jìn)一步研究顯示，miR-141-3p過(guò)表達(dá)后，HEEC的增殖能力顯著降低，細(xì)胞凋亡率顯著升高，Cyclin D1、Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)，P21、Bax蛋白表達(dá)上調(diào)。已有報(bào)道指出，Cyclin D1可正向調(diào)控細(xì)胞周期進(jìn)程，促進(jìn)細(xì)胞增殖;P21可以通過(guò)抑制Cyclin D1與CDK4結(jié)合而阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程，抑制細(xì)胞增殖[21-26]。Bcl-2、Bax蛋白是HEEC凋亡過(guò)程中的重要作用因子，Bcl-2蛋白表達(dá)升高可抑制HEEC凋亡，而B(niǎo)ax蛋白表達(dá)升高可促進(jìn)HEEC凋亡[27]。說(shuō)明miR-141-3p過(guò)表達(dá)可通過(guò)干擾細(xì)胞增殖及凋亡相關(guān)蛋白而調(diào)節(jié)HEEC的增殖及凋亡行為。即miR-141-3p過(guò)表達(dá)可抑制HEEC的增殖，促進(jìn)其凋亡。

HMGB1在子宮內(nèi)膜異位癥病人血清中的表達(dá)水平升高，并可作為子宮內(nèi)膜異位癥診斷的重要指標(biāo)[28]。HMGB1屬于DNA結(jié)合蛋白。研究表明，HMGB1可促進(jìn)炎癥反應(yīng)及血管生成，還可通過(guò)調(diào)節(jié)多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而參與多種疾病發(fā)生及發(fā)展過(guò)程[29。相關(guān)研究報(bào)道指出，HMGB1還可通過(guò)促進(jìn)Treg細(xì)胞分泌及增強(qiáng)其介導(dǎo)的免疫抑制作用而參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生過(guò)程[30]。本研究結(jié)果表明，miR-141-3p可靶向調(diào)控HMGB1表達(dá)。提示miR-141-3p過(guò)表達(dá)可能通過(guò)靶向調(diào)控HMGB1而抑制HEEC增殖，誘導(dǎo)其凋亡。

綜上所述，子宮內(nèi)膜異位癥病人中miR-141-3p的表達(dá)明顯降低，miR-141-3p過(guò)表達(dá)可能通過(guò)調(diào)控HMGB1的表達(dá)而抑制HEEC的增殖及促進(jìn)其凋亡。本研究結(jié)果為揭示子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制奠定理論基礎(chǔ)，為子宮內(nèi)膜異位癥治療提供了新的思路。但關(guān)于miR-141-3p在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中，具體通過(guò)調(diào)控哪種信號(hào)通路而發(fā)揮作用尚需進(jìn)一步探究。

[參考文獻(xiàn)]

[1]劉敏娟，黃郁馨，馮婉琴，等. miR-96靶向血管生成素-1基因?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥子宮內(nèi)膜干細(xì)胞增殖的影響[J].? 廣東醫(yī)學(xué)， 2018，39（23）：3448-3453.

[2]BRILHANTE A V， AUGUSTO K L， PORTELA M C， et al. Endometriosis and ovarian cancer： an integrative review （endometriosis and ovarian cancer）[J].? Asian Pacific Journal of Cancer Prevention： APJCP， 2017，18（1）：11-16.

[3]WILBUR M， SHIH I， SEGARS J， et al. Cancer implications

for patients with endometriosis[J].? Seminars in ReproductiveMedicine， 2017，35（1）：110-116.

[4]BARANOV V S， IVASCHENKO T E， LIEHR T， et al. Systems genetics view of endometriosis： a common complex disorder[J].? European Journal of Obstetrics， Gynecology， and Reproductive Biology， 2015，185（1）：59-65.

[5]陳觀盛，趙雅男，洪順家，等. 血清微小RNA在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達(dá)譜及其診斷潛能[J].? 嶺南急診醫(yī)學(xué)雜志， 2015，20（1）：44-47.

[6]張海燕. 非編碼小核酸miR-141與COX-2在子宮內(nèi)膜異位癥的在位內(nèi)膜中的表達(dá)及相關(guān)性研究[D].? 上海：復(fù)旦大學(xué)， 2013：1-38.

[7]吳錦杰，梁炎春，姚書(shū)忠. HMGB1對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥新生血管生成的潛在作用[J].? 國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志， 2016，43（2）：194-198.

[8]俞梅珍，賈蘭珍. 血清癌抗原125水平與子宮內(nèi)膜異位癥分期的關(guān)系研究[J].? 中國(guó)婦幼保健， 2015，30（14）：2175-2176.

[9]王丹，夏良斌，張婷，等. 內(nèi)皮抑素對(duì)異位子宮內(nèi)膜細(xì)胞的作用及機(jī)制[J].? 中國(guó)婦幼保健， 2016，31（4）：832-835.

[10]黃玲，王玎. miRNA在子宮內(nèi)膜異位癥中的研究進(jìn)展[J].? 長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)（自科版）， 2016，13（36）：81-84.

[11]YU H， ZHONG Q， XIA Y， et al. MicroRNA-2861 targets STAT3 and MMP2 to regulate the proliferation and apoptosis of ectopic endometrial cells in endometriosis[J].? Pharmazie， 2019，74（4）：243-249.

[12]宋文妍，王雪改，孫瑩璞，等. 三種促排卵方案對(duì)不同年齡子宮內(nèi)膜異位癥患者 IVF-ET妊娠及出生結(jié)局的影響[J].? 鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）， 2016，51（2）：227-233.

[13]王寓，邱明星，熊?chē)?guó)兵. miR-141-3p靶向TGF-β2對(duì)人前列腺癌C4-2B細(xì)胞惡性生物學(xué)行為的影響[J].? 中國(guó)腫瘤生物治療雜志， 2018，25（12）：1237-1243.

[14]HUANG S， WA Q， PAN J， et al. Downregulation of miR-141-3p promotes bone metastasis via activating NF-κB signaling in prostate cancer[J].? J Exp Clin Cancer Res， 2017，36（1）：173-183.

[15]LIANG Z， LI X， LIU S， et al. MiR-141-3p inhibits cell pro-

liferation， migration and invasion by targeting TRAF5 in colorectal cancer[J].? Biochem Biophys Res Commun， 2019，514（3）：699-705.

[16]LU G， ZHANG Y. Long non-coding RNA ATB promotes human non-small cell lung cancer proliferation and metastasis by suppressing miR-141-3p[J].? PLoS One， 2020，15（2）： e0229118-e0229128.

[17]LIU X， WANG M， CUI Y. LncRNA TP73-AS1 interacted with miR-141-3p to promote the proliferation of non-small cell lung cancer[J].? Arch Med Sci， 2019，15（6）：1547-1554.

[18]XING Y， JING H， ZHANG Y， et al. MicroRNA-141-3p affected proliferation， chemosensitivity， migration and invasion of colorectal cancer cells by targeting EGFR[J].? Int J Biochem Cell Biol， 2020，118（1）：105643-105653.

[19]SUN J， ZHANG Y. LncRNA XIST enhanced TGF-β2 expression by targeting miR-141-3p to promote pancreatic cancer cells invasion[J].? Biosci Rep， 2019，39（7）：332-342.

[20]LI W， CUI Y， WANG D， et al. MiR-141-3p functions as a tumor suppressor through directly targeting ZFR in non-small cell lung cancer[J].? Biochem Biophys Res Commun， 2019，509（3）：647-656.

[21]李金姑，石淑卿，林元. C-myc和cyclin D1在子宮內(nèi)膜異位癥中免疫反應(yīng)性增強(qiáng)[J].? 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志， 2017，26（2）：152-159.

[22]侴琳，王慧，趙曉麗. p53、p21、MDM2蛋白在卵巢子宮內(nèi)膜異位癥病人血清、異位及在位內(nèi)膜組織中的表達(dá)及相關(guān)性[J].? 安徽醫(yī)藥， 2019，23（5）：955-958.

[23]ZHOU J， DU G， FU H. miR-296-3p promotes the proliferation of glioblastoma cells by targeting ICAT[J].? Mol Med Rep， 2020，21（5）：2151-2161.

[24]WANG Q Y， YANG X， ZHOU X， et al. MiR-3174 promotes proliferation and inhibits apoptosis by targeting FOXO1 in hepatocellular carcinoma[J/OL]. Biochem Biophys Res Commun， 2020，S0006-291X（20）30649-5.

[25]WAN J， LONG F， ZHANG C， et al. miR-181b-p53 negative feedback axis regulates osteosarcoma cell proliferation and invasion[J].? Int J Mol Med， 2020，45（6）：1803-1813.

[26]YANG L， LIU L， ZHANG X， et al. miR-96 enhances the proliferation of cervical cancer cells by targeting FOXO1[J].? Pathol Res Pract， 2020，216（4）：152854-152864.

[27]肖新春，彭光霞. 宮瘤消膠囊對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥大鼠異位內(nèi)膜中Bcl-2、Bax蛋白表達(dá)的影響[J].? 上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)， 2016，30（5）：74-78.

[28]王婉. 血清HMGB1與RBP4聯(lián)合檢測(cè)在診斷子宮內(nèi)膜異位癥中的應(yīng)用[J].? 寧夏醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)， 2015，37（3）：309-311.

[29]VAN BEIJNUM J R， NOWAK-SLIWINSKA P， VAN DEN BOEZEM E， et al. Tumor angiogenesis is enforced by autocrine regulation of high-mobility group box 1[J].? Oncogene， 2013，32（3）：363-374.

[30]謝鴻玉，梁炎春，姚書(shū)忠.? HMGB1調(diào)節(jié)Treg細(xì)胞參與子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病的免疫機(jī)制[J].? 國(guó)際生殖健康計(jì)劃生育雜志， 2016，35（2）：160-164.

（本文編輯 于國(guó)藝）

[收稿日期]2019-10-27; [修訂日期]2020-05-13

[基金項(xiàng)目]河南省醫(yī)學(xué)科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目（20180214253）

[第一作者]劉文博（1983-），女，碩士，主治醫(yī)師。E-mail：liuwenbo201907@163.com。