阮少江,黃偉卿,,倪建成,周逢芳,林培華,葉祖云
(1.福建省特色藥用植物工程技術(shù)研究中心,福建 寧德 352100;2.寧德師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院,福建 寧德 352100;3.寧德市鼎誠水產(chǎn)有限公司,福建 寧德 352100)
大黃魚Larimichthys crocea 主要分布在中國黃海南部、東海、臺灣海峽到南海雷州半島以東,2017年產(chǎn)量達17.76 萬t,居海水養(yǎng)殖魚類產(chǎn)量之首,為我國近海海水網(wǎng)箱養(yǎng)殖規(guī)模最大和八大優(yōu)勢出口水產(chǎn)品之一[1]。近幾年,隨著養(yǎng)殖規(guī)?;图s化水平的不斷提高,養(yǎng)殖環(huán)境變化、長期投喂冰鮮餌料和落后的飼養(yǎng)管理水平等使養(yǎng)殖水產(chǎn)動物生長緩慢、病害頻發(fā),藥物用量和頻率增加,制約著整個養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展[2]。因此,開發(fā)促進養(yǎng)殖水產(chǎn)動物生長、增強抗病能力的環(huán)保型飼料添加劑已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展新趨勢[3,4]。
太子參Pseudostellaria heterophylla(又名孩兒參)是一種可用于保健的中藥材,含有多糖、皂甙、環(huán)肽、氨基酸、微量元素等活性物質(zhì)[5],具有抗應(yīng)激、抗疲勞、抗氧化、抗炎等藥理活性[6,7]。對小鼠[8-10]、豬[11-13]的研究結(jié)果表明,太子參可提升動物機體免疫保護作用,促進增長;對水生生物的研究僅見于提高對蝦Penaeus orientalis[14]和福瑞鯉Cyprinus carpio[15]的抗病能力,太子參提取物在大黃魚養(yǎng)殖中的應(yīng)用未見報導(dǎo)。
本研究通過將太子參提取液添加到大黃魚飼料中,研究其對大黃魚養(yǎng)殖成活率和生長性能的影響,以期為開發(fā)提升大黃魚品質(zhì)的健康環(huán)保型飼料改進劑提供參考。
試驗用魚:來源于寧德市鼎誠水產(chǎn)有限公司自行繁育的健康、規(guī)格一致,平均體長(23.45±0.83)cm,體質(zhì)量(34.05±8.23)g 的大黃魚幼魚。
太子參提取液的制備:選取太子參塊根,洗凈風(fēng)干,研磨成粉,過60 目篩備用。將太子參粉末置圓底底燒瓶中,加80%乙醇,水浴90℃回流提取3h,趁熱過濾,殘渣用95℃超純水浸提4h 后過濾,兩次濾液混合、濃縮,去除水分,即為太子參提取液(濃度為40mg/mL),保存于4℃冰箱中備用。
試驗用飼料:采用“海馬”牌大黃魚人工配合飼料(粗蛋白≥45.0,粗脂肪≥6.0,粗纖維≤5.0,粗灰分≤14.0,3.0≥鈣≥1.0,總磷≥1.0,3.0≥氯化鈉≥0.5,賴氨酸≥2.8,水分≤10.0)。
試驗在寧德師范學(xué)院國家海洋局海西海洋生物種質(zhì)資源及生物制品開放利用公共服務(wù)平臺循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中1.5T 養(yǎng)殖桶中進行。試驗組飼料中分別添加太子參提取液濃度為0.5%(C0.5)、1.0%(C1.0)、1.5%(C1.5)和2.0%(C2.0),對照組不添加太子參提取液。每組設(shè)置3 個平行組,每組300 尾大黃魚幼魚。每天分2 次投喂魚體質(zhì)量1%~2%的試驗飼料,視攝食情況酌情調(diào)整。
養(yǎng)殖水體水溫控制在24~26℃之間,溶解氧大于5.0mg/L,pH8.0 左右,氨氮小于0.2mg/L。常規(guī)養(yǎng)殖管理,做好養(yǎng)殖記錄。
在試驗中期(60d)和試驗結(jié)束(120d)時,每組隨機取30 尾樣品,采用丁香酚麻醉后,測量(精度0.1 cm)體長和稱量(精度0.1g)體質(zhì)量、內(nèi)臟重和肝臟重,測量后放回繼續(xù)養(yǎng)殖。
測定和計算公式如下:
成活率(%)=Nt/N0×100%
體重絕對增加率(g/d)=(M2-M1)/(T2-T1)
絕對增長率(cm/d)=(L2-L1)/(T2-T1)
增積量=(M2-M1)×(L2-L1)/(T2-T1)2
肥滿度=M/L3×100%
臟體比(%)=m/M×100%
肝體比(%)=n/M×100%
式中:Nt為終末魚尾數(shù);N0為初始魚尾數(shù);M 為體質(zhì)量(g);L 為體長(cm);M1、M2和L1、L2分別為時間T1、T2時的體質(zhì)量(g)和體長(cm);m 為內(nèi)臟重量,n 為肝臟重量。
數(shù)據(jù)采用SPSS17.0 統(tǒng)計分析。用Duncan’s 多重比較分析差異顯著性。
由圖1 可知:試驗60d 時,C1.0和C2.0組的成活率分別為(96.5±2.8)%和(95.4±3.5)%,顯著高于對照組(P<0.05);試驗120d 時,C0.5、C1.0和C2.0組的成活率分別為(84.5±4.1)%、(88.1±5.3)%和(84.9±5.7)%,均顯著高于對照組(P<0.05),且C1.0的養(yǎng)殖成活率均高于其他各組(圖1)。
試驗60d 時,C1.5組大黃魚的體質(zhì)量絕對增加率(0.22±0.007)g/d 顯著高于對照組(P<0.05),C0.5和C2.0組魚的體質(zhì)量絕對增加率低于對照組,差異不顯著(P>0.05);試驗120d 時,試驗組的體質(zhì)量絕對增加率均顯著高于對照組(P<0.05),C0.5組的體質(zhì)量絕對增加率最大,為(0.25±0.004)g/d(圖2-A)。
試驗60d 時,C1.0組大黃魚的絕對增長率(0.033±0.005)cm/d,顯著高于對照組(P<0.05),其他試驗組均顯著低于對照組(P<0.05);試驗120d 時,C0.5組的絕對增長率最大,為(0.026±0.006)cm/d,C1.5組的絕對增長率最小,為(0.016±0.004)cm/d,除C1.5組,其他試驗組的絕對增長率均高于對照組(圖2-B)。
試驗60d 時,C0.5和C2.0組大黃魚的增積量顯著低于對照組(P<0.05),C1.0組的增積量顯著高于對照組(P<0.05);試驗120d 時,C0.5、C1.0和C2.0組的增積量顯著高于對照組(P<0.05),C1.5組的低于對照組,但差異不顯著(P>0.05)(圖3-A)。
試驗60d 時,試驗組大黃魚的肥滿度均高于對照組,差異不顯著(P>0.05);試驗120d 時,對照組的肥滿度(2.43±0.36)最大,顯著高于試驗組(P<0.05)(圖3-B)。
試驗60d 時,試驗組魚的臟體比均高于對照組,其中C0.5和C1.5組顯著高于對照組(P<0.05);試驗120d 時,C1.0組顯著低于其他各組(P<0.05),C2.0組顯著高于其他各組(P<0.05)(圖3-C)。
試驗60d 時,C0.5組的肝體比最大,為(1.39±0.21)%,C0.5組的肝體比最小,為(1.00±0.14)%,組間差異不顯著(P>0.05);試驗120d 時,對照組的肝體比為(1.95±0.23)%,顯著高于試驗組(P<0.05)(圖3-D)。
王家葵等[16]、宋玉龍等[17]、Yang 等[18]的研究結(jié)果表明,太子參活性物質(zhì)對損傷動物免疫機體起到保護作用,具有較強的增強動物機體免疫力的功效。本試驗中,試驗組和對照組大黃魚均感染了嗜水氣單胞菌病Aeromonas hydrophila 和假單胞菌病Pseudomonadaceae,而試驗組死亡率明顯下降,可見太子參提取液提高了大黃魚的免疫力、抗病能力和成活率。
本研究還發(fā)現(xiàn),隨著太子參提取液添加量的不斷增加,大黃魚養(yǎng)殖成活率卻下降,添加量為1.0%組的成活率最高。這與謝忠毅[19]將太子參應(yīng)用在鯉上出現(xiàn)的結(jié)果一致。太子參提取液的主要成分是多糖和皂苷,這兩種成分對大黃魚機體免疫能力影響的濃度及最適添加量將在后期進一步探討。
本研究結(jié)果表明,飼料中添加太子參提取液養(yǎng)殖60d 時,大黃魚體質(zhì)量絕對增加率提高。筆者認為,太子參能促進人體腸胃消化吸收的功效[20,21],對大黃魚可能也有同樣功效。隨著養(yǎng)殖時間的增長,養(yǎng)殖120d 后,大黃魚的體質(zhì)量絕對增加率、絕對增長率和增積量均顯著高于對照組,與丁春花[22]對太子參藥效評價中得出具有藥力平和的特點結(jié)果一致,長時間的使用效果更佳。經(jīng)過120d 的養(yǎng)殖試驗,各試驗組大黃魚的肥滿度顯著小于對照組,說明太子參對大黃魚有健胃消食作用效果。
肝臟是魚類碳水化合物代謝的重要器官,在糖酵解和糖異生作用中調(diào)節(jié)血糖含量變化中發(fā)揮重要作用[23]。而肝臟的這種調(diào)節(jié)能力隨著魚食性的變化而有所不同,一般情況下,肉食性魚類表現(xiàn)出比較低的水平[24,25]。本次研究前期(60d),投喂添加太子參提取液的大黃魚臟體比和肝體比高于對照組,這主要與太子參提取液中含有多糖有關(guān);試驗后期(120d),部分肝體比和臟體比均低于對照組,這與對金頭鯛Sparus aurata[26]、河鱸Perca fluviatilis[27]和歐洲鱸Dicentrarchus labrax[28]的研究結(jié)果一致。太子參高糖飼料對肝臟PK 活力影響有待深入研究。
大量的研究表明,太子參具有顯著的增強免疫、抗炎和調(diào)節(jié)機體免疫功能的作用,在畜牧生產(chǎn)中已有較多應(yīng)用[8]。在水生動物上,已在對蝦[14]和福瑞鯉[15]中進行了應(yīng)用,并取得了良好的抗病和提高免疫力的效果。本次在大黃魚中的應(yīng)用,對促進大黃魚的抗病、生長和形體性能均有一定的促進和改良效果。太子參作為一種新型綠色的免疫增強劑,具毒性低、無污染、無耐藥性、無藥物殘留等特點,目前被廣泛認可[29-31]。近年來,以太子參的下腳料(莖和葉)作為飼料添加劑同樣具有較高的營養(yǎng)價值[32],可為后期在生產(chǎn)上廣泛應(yīng)用中降低生產(chǎn)成本和太子參的綜合利用提供新思路。隨著太子參及其下腳料中的有效成分作用于水生動物機制的深入研究,將可能實現(xiàn)其作為水生動物飼料綠色、新型添加劑,作為獸用藥物的替代品應(yīng)用于生產(chǎn)中。