新生兒血型鑒定困難的探討

章小麗，徐秀云，柯江維，周根水

（江西省兒童醫(yī)院，江西 南昌 330006）

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 患兒，男，5d,第一胎第一產(chǎn)，因高黃疸、肝功能異常來(lái)我院就診,總膽紅素351μmol/L,間接膽紅素332μmol/L,直接膽紅素19μmol/L,血常規(guī) RBC 5.3×1012/L，Hb 183g/L。既往無(wú)輸血史,檢測(cè)新生兒溶血病時(shí)發(fā)現(xiàn)患兒血型鑒定異常。已知母親血型為O 型RHD 陽(yáng)性。

1.2 儀器與試劑 抗-A(批號(hào) 20170819)、抗-B(批號(hào) 20170819)、ABO 紅細(xì)胞(批號(hào) 20175333)、抗人球蛋白試劑(20175001)、抗H(20161107)均為上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任有限公司產(chǎn)品。新生兒ABO、RhD 血型檢測(cè)卡(批號(hào)20176915)、新生兒溶血病嬰兒不完全抗體檢測(cè)卡(批號(hào)20170901)均為長(zhǎng)春博迅生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。KA－2200 專用離心機(jī)(日本久保田)，HH-W420 水浴箱（金壇市醫(yī)療儀器廠），TD-3A 型血型血清學(xué)專用離心機(jī)(長(zhǎng)春博研)，F(xiàn)YQ 型免疫微柱孵育器(長(zhǎng)春博研)。

1.3 檢測(cè)方法 新生兒溶血病檢測(cè)采用熱放散法，ABO 血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗(yàn)、游離試驗(yàn)、放散試驗(yàn)均采用卡法與試管法互相驗(yàn)證[1,2]，ABO血型基因檢測(cè)委托上海血液中心和江蘇中濟(jì)萬(wàn)泰生物醫(yī)藥有限公司若貝爾獎(jiǎng)研究室進(jìn)行。

2 結(jié)果

2.1 血清學(xué)患兒血型檢測(cè)結(jié)果 見(jiàn)表1。

2.2 直接抗人球蛋白試驗(yàn) 陰性。

2.3 游離和放散試驗(yàn) 見(jiàn)表2。

2.4 分子生物學(xué)檢測(cè) 根據(jù)測(cè)序回報(bào)的結(jié)果，ABO 1-5 外顯子無(wú)突變位點(diǎn)，6、7 外顯子有以下突變位點(diǎn)，與參考序列A101.1 進(jìn)行對(duì)比，該樣本符合B101/O01 基因型，見(jiàn)表3。

表1 患兒試管法ABO 血清學(xué)血型檢測(cè)結(jié)果

表2 患兒游離與放散試驗(yàn)結(jié)果

表3 患兒ABO 基因6、7 外顯子測(cè)序突變點(diǎn)結(jié)果

3 討論

該患兒進(jìn)行新生兒溶血病檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)ABO 血型鑒定結(jié)果異常,紅細(xì)胞與抗B 試劑反應(yīng)出現(xiàn)混合視野, 鑒于患兒無(wú)輸血史我們懷疑他的ABO 血型是B3 亞型的可能性較高，進(jìn)一步進(jìn)行了ABO 基因分型與測(cè)序檢測(cè)。根據(jù)回報(bào)的結(jié)果，該樣本確定為B101/O01 基因型，但由于患者為新生兒，新生兒B型糖鏈抗原為直鏈抗原，抗原表達(dá)量約為成人25~50%，測(cè)序單位建議患兒滿周歲后追蹤血型，且不排除9 號(hào)染色體其他未測(cè)序部位變異導(dǎo)致血型異常的可能。

從輸血相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果聯(lián)系臨床其他檢查結(jié)果，患兒雖然存在總膽紅素351μmol/L,間接膽紅素332μmol/L 升高引起的高膽紅素血癥，且新生兒溶血病檢測(cè)中放散試驗(yàn)證實(shí)存在ABO 溶血[3,4]，但我們也觀察到患兒同一時(shí)間查血常規(guī),血紅蛋白高達(dá)183g/L 并不因溶血而貧血。已知胎兒母體輸血綜合征(FMH）是指胎兒將血倒輸回母體內(nèi)的臍帶或胎盤(pán)中,從而造成胎兒一出生就患有不同程度的貧血[5-10]。FMH 是一種少見(jiàn)的產(chǎn)科并發(fā)癥，大部分病例原因不明，雖發(fā)病率不高，一旦發(fā)作很容易導(dǎo)致嬰兒夭折。而本文報(bào)道的患兒情況, 筆者推測(cè)是FMH 的反轉(zhuǎn), 即母親O 型血液通過(guò)臍帶或胎盤(pán)輸入了患兒體內(nèi)即B 型血液中,故雖母子之間出現(xiàn)了ABO 血型不合新生兒溶血癥，患兒紅細(xì)胞被破壞，患兒網(wǎng)織紅紅細(xì)胞計(jì)數(shù)70.09×109/L,靠近正常值范圍 25～75×109/L 上限,但 Hb 值未見(jiàn)下降并高達(dá) 183 g/L。同時(shí)也能解釋患兒ABO 血型基因檢測(cè)結(jié)果為B101/O01 基因型, 而血清學(xué)血型鑒定中出現(xiàn)的類似B3 的混合視野現(xiàn)象。因缺乏新舊細(xì)胞分離設(shè)備,且對(duì)癥治療后患兒病情好轉(zhuǎn)很快出院了,我們沒(méi)有進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證。比之FMH 可引起胎兒貧血、水腫甚至死亡等嚴(yán)重臨床不良并發(fā)癥,本案例預(yù)后良好。值得注意的是這種胎母輸血會(huì)引起實(shí)驗(yàn)室血型鑒定困難,希望本案例的報(bào)道可以為輸血界同行遇到類似現(xiàn)象，提供參考。