卵巢癌組織XIAP、Survivin表達及臨床意義

張凱，薛惠英，劉現(xiàn)紅

（安陽市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 安陽455000）

卵巢癌的早期診斷率較低,遠期病情進展的風(fēng)險較高,其復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的風(fēng)險持續(xù)在較高水平[1]。臨床上在不孕或者多囊卵巢綜合征的患者中,卵巢癌的發(fā)生風(fēng)險可持續(xù)上升[2]。在研究卵巢癌的發(fā)生發(fā)展機理過程中,一般認(rèn)為腫瘤細胞增殖調(diào)控蛋白的改變,能夠在癌細胞周期的調(diào)控或者癌細胞凋亡調(diào)控過程中發(fā)揮作用。X 染色體連鎖的凋亡抑制蛋白（XIAP）的表達濃度的上升，能夠通過加劇癌細胞周期的紊亂，抑制癌細胞的凋亡，干擾腫瘤細胞的微環(huán)境，最終促進卵巢癌的發(fā)生[3]；生存素（Survivin） 能夠參與癌細胞生物學(xué)特征的調(diào)控過程，其對癌細胞浸潤和侵襲能力具有加強作用，能夠顯著提高癌細胞突破基底膜組織的能力，促進了癌細胞的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移[4,5]。為了揭示 XIAP、Survivin 在卵巢癌病灶組織中的表達情況,從而深入揭示卵巢癌的發(fā)生機理，本次研究選取2017 年2 月至2019年3 月我院保存的上皮性卵巢癌組織97 例，探討了XIAP、Survivin 蛋白的表達情況，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2017 年 2 月至 2019 年 3 月我院保存的上皮性卵巢癌組織97 例，其中年齡21～73 歲，平均年齡（49.54±9.22）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴均經(jīng)病理組織學(xué)確診；⑵臨床資料保存完整；⑶術(shù)前未行放化療等抗腫瘤治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴有其他惡性腫瘤者；⑵卵巢轉(zhuǎn)移瘤。同時選取良性卵巢腫瘤組織54 例，正常卵巢組織60 例作為對照組，各組受試者一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05），見表1。

表1 各組受試者一般資料比較

1.2 實驗方法 采用石蠟切片,脫水操作后采用3%H2O2室溫條件下孵育20min, 磷酸鹽緩沖液清洗3次，每次5min，磷酸鹽緩沖液稀釋后的山羊血清封閉抗體5min，倒去血清后不清洗，加入一抗（購自賽默飛世爾中國 濃度：1：1000）5ml，37℃孵育 2h，或者放置4℃冰箱過夜孵育, 磷酸鹽緩沖液清洗3次，每次5min，加入生物素?zé)晒鈽?biāo)記的二抗（購自賽默飛世爾中國 濃度：1：2000）3ml，37℃孵育 20～30min，磷酸鹽緩沖液清洗3 次，每次 5min，加入Streptavidin/HRP 辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素，37℃孵育20～30min，磷酸鹽緩沖液清洗3 次，每次 5min，增強型HRP-DAB 底物顯色試劑盒 (PA110)顯色，自來水沖洗，復(fù)染，封片。

1.3 結(jié)果判斷 每張切片隨機選取5 個高倍鏡視野，對染色強度和染色范圍進行半定量評分，其中染色強度：無著色為0 分，淡黃色為1 分，棕黃色為2 分，棕褐色為3 分；染色范圍：陽性細胞比例＜5%為 0 分，5%～25%為 1 分，26%～50%為 2 分，51%～75%為 3 分，＞75%為 4 分。染色強度與染色范圍評分之和≥3 分為陽性表達。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)分析統(tǒng)計采用SPSS22.0 軟件，計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較使用方差分析，兩兩比較采用LSD-t 檢驗；計數(shù)資料比較使用卡方檢驗；相關(guān)性采用Spearman 秩相關(guān)分析。檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 各組XIAP、Survivin 表達情況 卵巢癌組織XIAP、Survivin 蛋白陽性表達率明顯高于良性卵巢組織和正常卵巢組織（P＜0.05）；良性卵巢組織XIAP、Survivin 蛋白陽性表達率分別高于正常卵巢組織（P＜0.05）。見表2。

表2 各組XIAP、Survivin 蛋白陽性表達率比較

2.2 XIAP、Survivin 表達與患者臨床病理特征關(guān)系臨床分期Ⅲ～Ⅳ期、中低分化組織XIAP、Survivin 蛋白陽性表達率明顯高于Ⅰ～Ⅱ期、高分化在 （P＜0.05），見表3。

2.3 相關(guān)性分析 卵巢癌組織XIAP 和Survivin 蛋白表達呈正相關(guān)性（rs=0.387，P＞0.05），見表4。

表4 相關(guān)性分析

3 討論

卵巢生發(fā)上皮細胞的起源較多,細胞病理類型來源較為廣泛, 在多種病理生理機制的激活過程中，癌細胞持續(xù)異常分裂的風(fēng)險較高，其遠期惡性腫瘤病情進展的可能性可顯著上升[6]。卵巢癌的帶瘤生存時間較短,卵巢癌患者更為容易發(fā)生遠處臟器轉(zhuǎn)移，加劇了患者臨床病死率[7]。隨訪方面的研究發(fā)現(xiàn),卵巢癌患者的短期內(nèi)病情進展惡化的風(fēng)險可超過15%以上,遠期多器官功能衰竭的比例可超過35%以上[8]。而通過對于卵巢癌臨床病理特征的評估，能夠為卵巢癌的病情控制、疾病診療及預(yù)后判斷提供一定的參考。雖然糖鏈蛋白125 能夠作為臨床上診斷卵巢癌及卵巢癌臨床預(yù)后評估的主要指標(biāo),但其對于不同類型的卵巢癌的評估特異性程度仍然存在一定的局限,對于特殊類型或者較為少見的性鎖細胞來源卵巢腫瘤評估靈敏度較低[9]。本次研究對于卵巢癌患者病灶組織中XIAP、Survivin 的表達分析,能夠在深入揭示卵巢癌病情進展內(nèi)在機理的同時,為臨床上卵巢癌臨床病理特征的評估提供新的參考指標(biāo)。

XIAP 是性連鎖染色體相關(guān)蛋白，其對于癌細胞骨架結(jié)構(gòu)蛋白的穩(wěn)定作用,能夠調(diào)控癌細胞的增殖速度，影響癌細胞的核DNA 擴增風(fēng)險。XIAP 對于腫瘤微環(huán)境的調(diào)控作用,能夠進一步抑制癌細胞的凋亡，提高癌細胞G1/S 期的細胞比例，降低G0期細胞比例數(shù)量[10,11]；Survivin 是生存素相關(guān)蛋白，其對于癌細胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)換的調(diào)控作用，能夠提高上皮惡性腫瘤細胞突破基底膜組織的能力[12,13]?；仡櫹嚓P(guān)研究，部分論著探討了XIAP 在卵巢癌患者中的表達情況，認(rèn)定XIAP 蛋白的表達濃度的上升與卵巢癌耐藥有關(guān)[3]，但對于 XIAP、Survivin 的內(nèi)在關(guān)系分析不足。

免疫組化分析探討了XIAP、Survivin 蛋白在卵巢癌患者中的表達情況,發(fā)現(xiàn)在卵巢良性腫瘤患者中，XIAP、Survivin 蛋白的表達陽性率明顯上升，高于健康對照組，而在卵巢癌患者中，XIAP、Survivin 蛋白的表達陽性率進一步的上升，提示了XIAP、Survivin 可能參與到了卵巢腫瘤從良性導(dǎo)致惡性的演變過程。XIAP、Survivin 對于卵巢生發(fā)上皮細胞凋亡的調(diào)控作用,能夠增加早期癌細胞的免疫逃逸風(fēng)險,提高了早期腫瘤從細胞學(xué)到組織學(xué)改變的形成速度。有其他研究者也認(rèn)為，在卵巢癌患者病灶組織中，Survivin 的表達濃度可隨著卵巢癌患者病情進展速度的加快而上升,在卵巢癌復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移風(fēng)險較高的患者中，Survivin 蛋白的表達陽性率水平可超過65%[14-17]。本次研究還探討了XIAP、Survivin 蛋白的表達與卵巢癌臨床病理特征的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)在臨床分期較高或者合并顯著組織學(xué)低分化表現(xiàn)的患者中，XIAP、Survivin 蛋白的表達陽性率較高,表明XIAP、Survivin 蛋白的表達波動，還能夠影響到腫瘤細胞的浸潤范圍,加劇腫瘤細胞分化成熟過程的障礙。這主要由于XIAP、Survivin 的表達，不僅能夠調(diào)控凋亡抑制過程，同時還能夠干預(yù)癌細胞上皮-間質(zhì)過程，促進了癌細胞浸潤深度和浸潤范圍的增加，進而提高了臨床分期。但本次研究中并無發(fā)現(xiàn)不同病理來源或者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者中XIAP、Survivin 的表達差別,提示 XIAP、Survivin 并不會影響到卵巢細胞對于盆腹腔淋巴結(jié)的粘附浸潤過程。最后筆者研究還發(fā)現(xiàn)，XIAP、Survivin 的表達具有一定的正相關(guān)性，推測二者在影響卵巢腫瘤發(fā)生的過程中可能具有一定的協(xié)調(diào)刺激作用。

綜上所述, 在卵巢癌患者病灶組織中，XIAP、Survivin 蛋白的表達陽性率明顯上升，XIAP、Survivin 的表達能夠影響到臨床分期及組織分化程度。本次研究的現(xiàn)實價值在于通過對于XIAP、Survivin 的分析，能夠為臨床上卵巢癌的診療提供新的依據(jù)。