早產(chǎn)兒侵襲性B族鏈球菌感染疾病分布特點(diǎn)與血清分型研究

焦俊麗

（安陽市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，河南 安陽455000）

B 族鏈球菌（group B streptococcus，GBS）又稱為無乳鏈球菌，屬于β 溶血性革蘭陽性菌，常定植于女性生殖道、泌尿道及下消化道，定植率為10%~30%[1]，可引起女性發(fā)生泌尿生殖道感染,在妊娠期及產(chǎn)褥期可引起孕產(chǎn)婦發(fā)生子宮內(nèi)膜炎、絨毛膜羊膜炎等, 同時(shí)還可引起宮內(nèi)感染及分娩時(shí)感染,導(dǎo)致新生兒發(fā)生肺炎、腦膜炎、敗血癥等，引起較高的致殘率及病死率[2,3]，在幸存的患兒中，較大一部分患兒會(huì)遺留發(fā)育遲緩、聽力異常、腦麻痹等永久性的神經(jīng)損害后遺癥, 嚴(yán)重影響到患兒的預(yù)后。在 20 世紀(jì) 70 年代，GBS 感染時(shí)引起新生兒和嬰幼兒感染的主要致病菌，經(jīng)過多年的努力,尤其是隨著《抗菌藥物臨床應(yīng)用管理辦法》、《抗菌藥物臨床應(yīng)用指導(dǎo)原則》、《圍生期B 族鏈球菌疾病預(yù)防指南》等規(guī)范性文件的實(shí)施，抗菌藥物得到了規(guī)范應(yīng)用，GBS 所致的感染性疾病發(fā)病率有所下降，但是仍然是導(dǎo)致新生兒死亡的主要致病菌。早產(chǎn)兒由于免疫功能不完善，血腦屏障功能差，更容易發(fā)生侵襲性GBS 所致的敗血癥和化膿性腦膜炎，患兒往往病情發(fā)展兇險(xiǎn),盡管目前診療技術(shù)的進(jìn)步提高了疾病治愈率, 但是早產(chǎn)兒侵襲性的GBS 感染仍然有較高的致殘率和致死率。目前，GBS 采用乳膠凝集試驗(yàn)可分為10 個(gè)血清型，臨床研究發(fā)現(xiàn)[3-5]，GBS 感染和血清型分布在不同種族和地區(qū)間存在差異，因此，本研究對(duì)早產(chǎn)兒侵襲性B 族鏈球菌感染疾病分布特點(diǎn)與血清分型進(jìn)行了分析，為早產(chǎn)兒侵襲性GBS 感染的預(yù)防和治療提供參考，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取 2016 年 1 月-2018 年 5 月在醫(yī)院診治的侵襲性GBS 感染早產(chǎn)兒60 例為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴發(fā)病日齡0~89d 的早產(chǎn)兒，分娩孕周＜37 周。⑵患兒痰液、血培養(yǎng)、腦脊液分泌物等標(biāo)本分離培養(yǎng)出GBS，均為非重復(fù)菌。

1.2 方法

1.2.1 菌株分離、培養(yǎng)及鑒定 采集患兒痰液、血液、腦脊液分泌物等標(biāo)本，接種于小兒中和抗菌素培養(yǎng)瓶（法國梅里埃公司生產(chǎn)）后在BACT/ALERT 3D 全自動(dòng)細(xì)菌培養(yǎng)儀（法國梅里埃公司生產(chǎn)）中進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)菌落轉(zhuǎn)種于萬古霉素巧克力平板和5%羊血瓊脂平板（廣州迪景公司生產(chǎn)），最后取得的菌落在VITEK 2 COMPACT 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)（法國梅里埃公司生產(chǎn)）中進(jìn)行菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)。質(zhì)控菌株購自衛(wèi)生部臨檢室，為肺炎鏈球菌ATCC49619。

1.2.2 臨床感染分型[1-3]根據(jù)發(fā)病時(shí)間可分為早發(fā)型（GBS-EOD）和晚發(fā)型（GBS-LOD），早發(fā)型為出生0~6d 發(fā)病，晚發(fā)型為出生后7~69d 發(fā)病。

1.2.3 血清分型 采用乳膠凝集法對(duì)GBS 血清分型進(jìn)行檢測，檢測試劑盒購自丹麥SSI 公司，將取得的B 組鏈球菌接種到Todd-Hewitt 肉湯培養(yǎng)基（上海鈺博生物科技有限公司）過夜，然后與膠乳試劑作凝集反應(yīng)，觀察反應(yīng)結(jié)果，根據(jù)凝集反應(yīng)結(jié)果對(duì)照試劑盒內(nèi)對(duì)照表進(jìn)行血清分型。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用百分?jǐn)?shù)表示，進(jìn)行精確概率法檢驗(yàn),P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患兒臨床資料分布構(gòu)成比 見表1。

表1 患兒臨床資料分布構(gòu)成比（%）

2.2 患兒疾病分布特點(diǎn)及臨床表現(xiàn) 患兒診斷肺炎7 例、敗血癥14 例、化膿性腦膜炎6 例、肺炎合并敗血癥13 例、敗血癥合并化膿性腦膜炎7 例、肺炎合并敗血癥及化膿性腦膜炎13 例, 分別占11.67% 、23.33% 、10.00% 、21.67% 、11.67% 、21.67%。肺炎患兒主要以發(fā)熱及氣促為臨床表現(xiàn)，敗血癥以發(fā)熱為主要臨床表現(xiàn)，化膿性腦膜炎主要以發(fā)熱、呼吸困難、四肢肌張力高為臨床表現(xiàn)。

2.3 患兒血清分型 患兒檢出的60 株GBS 血清型分別為 Ia 型 6 株、Ib 型 8 株、III 型 37 株、V 型 2株，分別占 10.00%、13.33%、61.67%、3.33%，其中血清型以III 型為主。

2.4 患兒不同疾病時(shí)血清分型 敗血癥、化膿性腦膜炎、肺炎合并敗血癥、敗血癥合并化膿性腦膜炎、肺炎合并敗血癥及化膿性腦膜炎均以III 型為主,分別占 57.14%、83.33%、69.23%、55.56%、69.23%，見表2。

2.5 患兒不同臨床感染分型時(shí)血清分型 早發(fā)型和晚發(fā)型GBS 均以III 型為主，血清分型比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見表3。

表2 患兒不同疾病時(shí)血清分型及構(gòu)成比（%）

3 討論

表3 患兒不同臨床感染分型時(shí)血清分型及構(gòu)成比（%）

GBS 是革蘭陽性菌,在人體消化道和泌尿生殖道正常定植，30%的健康人糞便和25%的健康人泌尿生殖道均有GBS 的檢出, 同時(shí)在不同地區(qū)和種族人群中GBS 定植率存在一定差異[3-5]。GBS 最早在1938 年Fry 報(bào)告中被提及可引起致死性圍產(chǎn)期感染，后被臨床學(xué)者所重視，GBS 感染所致的感染性疾病在臨床報(bào)道逐漸增多,GBS 一直是歐美發(fā)達(dá)國家關(guān)注的重點(diǎn),是引起發(fā)達(dá)國家常見的新生兒致病菌,Kwatra 等學(xué)者報(bào)道顯示[6],GBS 定植率為17.9%，最高的為非洲地區(qū)人群，其次為美國和歐洲地區(qū)，西太平洋和東南亞地區(qū)定植率最低。以往在我國新生兒感染性疾病中報(bào)道較少,但是在近年來我國產(chǎn)科和新生兒科報(bào)道GBS 引起的感染性疾病病例逐漸增多,也成為引起我國新生兒感染的主要致病菌之一，相關(guān)報(bào)道顯示[7-9]，在東莞和深圳地區(qū)GBS 定植率9.1%~19.1%,在北京地區(qū)約為3.40 %~17.58%，在江蘇地區(qū)為4.07%~11.00%，為上海地區(qū)為3.7%左右，可以看出,在我國不同地區(qū)GBS 定植率也存在明顯差異。

新生兒發(fā)生GBS 感染, 其致病機(jī)制尚未完全闡明,但是普遍認(rèn)為是由于在圍生期孕產(chǎn)婦泌尿生殖道定植的GBS 感染所致，尤其是在早產(chǎn)、胎膜早破、孕婦有菌尿癥等高危因素時(shí)新生兒更容易發(fā)生GBS 感染。侵襲性GBS 感染是指在正常無菌部位（如血液、腦脊液、關(guān)節(jié)腔、胸膜腔、心包等部位）出現(xiàn)GBS 的感染，如敗血癥、肺炎、化膿性腦膜炎等,患兒一旦發(fā)生侵襲性GBS 感染,往往預(yù)后較差，致殘率和病死率較高。目前臨床上對(duì)新生兒GBS感染的研究時(shí)有報(bào)道, 但是對(duì)早產(chǎn)兒侵襲性GBS感染報(bào)道較少，本研究對(duì)診治的60 例侵襲性GBS感染早產(chǎn)兒進(jìn)行了研究，患兒所患疾病有肺炎、敗血癥、化膿性腦膜炎及其肺炎合并敗血癥、敗血癥合并化膿性腦膜炎、肺炎合并敗血癥及化膿性腦膜炎等，分析主要臨床表現(xiàn)，肺炎患兒主要以發(fā)熱及氣促為臨床表現(xiàn)，敗血癥以發(fā)熱為主要臨床表現(xiàn)，化膿性腦膜炎主要以發(fā)熱、呼吸困難、四肢肌張力高為臨床表現(xiàn)；可以看出，不同疾病時(shí)患兒早期臨床表現(xiàn)有所不同,但是以上臨床表現(xiàn)并無特異性，需要加以注意。

GBS 根據(jù)莢膜多糖抗原性的差異可分為Ia、Ib、II-IX 等10 個(gè)血清型, 臨床研究顯示在不同地區(qū)和種族中血清型分布也有所不同[6,10-15]，在孕婦定植的GBS 血清分型中韓國和意大利、法國、中國北京等國家及地區(qū)均以III 型為主,日本以III 型和Ia型為主，印度則主要為Ia 型，我國有一項(xiàng)多中心研究則顯示孕婦感染GBS 主要以Ia、III 和V 型為主[15]。新生兒 GBS 感染的臨床報(bào)道[16-18]，在我國主要以III 型為主，在美國和非洲主要是Ia 和III 型，在日本主要是VI 和VIII 型。本研究對(duì)我院60 例早產(chǎn)兒侵襲性GBS 感染病原菌血清型進(jìn)行分型，結(jié)果顯示 Ia 型、Ib 型、III 型、V 型均有檢出，以 III 型為主。III 型在GCS 的血清型中侵襲能力最強(qiáng)，毒力最強(qiáng)，對(duì)絨毛膜、新生兒肺組織、血管內(nèi)皮組織均有很強(qiáng)的粘附能力,因此容易引起敗血癥、肺炎、化膿性腦膜炎等同GBS 感染性疾病發(fā)生, 占到腦膜炎感染病原菌的50%以上。根據(jù)GBS 感染的時(shí)間不同可分為早發(fā)型和晚發(fā)型，臨床報(bào)道顯示[16-18]，早發(fā)型GBS 以肺炎多見，晚發(fā)型以腦膜炎多見，感染分型不同時(shí)患兒血清型是否存在不同[19]，本研究也進(jìn)行了研究, 結(jié)果顯示早發(fā)型和晚發(fā)型GBS均以III 型為主,血清分型比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示感染分型與血清型分型無關(guān),血清分型更多與疾病自身有關(guān)。

綜上所述,早產(chǎn)兒侵襲性B 族鏈球菌感染疾病以敗血癥、肺炎合并敗血癥、化膿性腦膜炎等多種疾病合并多見，血清分型均以III 型為主，血清分型與疾病臨床感染分型無關(guān)。