CA242、HSP90α與結直腸癌患者患病的關系研究

魏榮花，王利強，李勇杰

（1.濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院普外二科，河南 濮陽 455000；2.濮陽市安陽地區(qū)醫(yī)院精準醫(yī)學科，河南 濮陽455000）

結直腸癌又稱大腸癌,是臨床上常見的消化系統(tǒng)的腫瘤,也是在世界上僅次于肺癌和乳腺癌的常見惡性腫瘤[1]。該病發(fā)病率很高，全球每年新發(fā)結直腸癌的人數(shù)約93 萬，其中中國患病人數(shù)就高達15 萬左右，40~60 歲的中老年人是高發(fā)人群[2]。結直腸癌患者的早期臨床特征不明顯,但隨著腫瘤的增大,患者多表現(xiàn)為便血、腹瀉與便秘交替、腹痛等癥狀；其次該病易發(fā)生淋巴道、種植、局部以及血液轉移,一旦發(fā)展到癌癥后期,死亡率可高達90 %,所以，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療是提高患者生存率的關鍵所在[3,4]。CA242 是一種唾液酸化的新型粘糖蛋白類的糖類腫瘤相關抗原,在消化道惡性腫瘤病人的血清中常有升高[5]。HSP90α 是熱休克蛋白亞型之一，據(jù)研究[6]HSP90α 在多種惡性腫瘤患者體內都會表達異常,與腫瘤的發(fā)病機制具有密切的關系。本研究通過檢測患者血清中的 CA242 和HSP90α 的水平，進一步探討它們與結直腸患者患病的關系，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取 2017 年 3 月至 2018 年 12 月在我院治療的結直腸癌患者121 例, 納入標準：⑴均經(jīng)病理學確診；⑵未行放化療等抗腫瘤治療；⑶臨床資料保存完整；⑷患者及家屬知情同意。排除標準：⑴合并有其他惡性腫瘤；⑵合并有瓣膜病、心肌病、自身免疫性疾病、腎病綜合征、哮喘、子宮內膜息肉、急慢性感染等疾?。虎墙? 個月內有創(chuàng)傷或手術者。同時選取健康正常者120 例作為對照,結直腸癌患者和正常者一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表1。

表1 結直腸癌患者和正常者一般資料比較

1.2 實驗方法 所用患者空腹采集外周靜脈血樣3ml，并 放 置 EDTA-K2 抗 凝 管 ,3000r/min 離 心10min，轉移血清至EP 管中，并于-20℃凍存待測。應用CA242 雙抗體夾心法ELISA 試劑盒 （生產(chǎn)于瑞典 CanAg 公司） 測定血清 CA242 含量；取出HSP90α 雙抗體夾心法 ELISA 試劑盒(R＆D systems INc，usA)測定 HSP90α。操作方法：在 37℃條件下，將試劑盒平衡30min，將板條至于板架上并依次吸取50μl 校準品液和稀釋30 倍后樣品，加入微孔板中, 每個微孔中各加入 50μl 測 CA242、HSP90α 用標記物液。將微孔板用封板膜覆蓋，于37℃下孵育1h,清洗微孔板6 次，并用吸水紙清除殘留液體，在微孔中加入各 50μl 顯色劑 A、B 液，37℃下孵育20min, 然后加入50μl 反應終止液,lOmin 內在450 nm ／620nm 波長下讀取 OD 值[7]。

1.3 統(tǒng)計學處理 統(tǒng)計分析采用SPSS19.0 軟件，計量資料采用（)表示，比較使用t 檢驗，計數(shù)資料比較使用χ2檢驗，相關性采用Pearson 相關分析。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 結直腸癌患者和正常者CA242、HSP90α 水平比較 結直腸癌患者CA242 和HSP90α 水平明顯高于正常者，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表2。

表2 結直腸癌患者和正常者CA242、HSP90α 水平比較

2.2 CA242 與結直腸癌患者臨床病理特征關系TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期結直腸癌患者血清CA242 明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者,比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);不同性別、年齡、分化程度、腫瘤直徑、病變部位結直腸癌患者血清CA242 水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 CA242 與結直腸癌患者臨床病理特征關系

2.3 HSP90α 與結直腸癌患者臨床病理特征關系不同性別、年齡、分化程度、腫瘤直徑、病變部位、TNM 分期結直腸癌患者血漿HSP90α 水平比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表4。

2.4 相關性分析 將結直腸癌患者血清CA242 與血漿HSP90α 水平進行相關分析,結果顯示：血清CA242 與血漿 HSP90α 呈弱正相關系（r=0.221，P＜0.05）。

3 討論

腫瘤標記物是由癌變細胞分泌產(chǎn)生或機體針對腫瘤細胞而產(chǎn)生的具有特異性的一類物質[8]。它們主要存在癌癥患者的組織、細胞、血液及體液等部位，對于良惡性腫瘤的診斷、輔助治療、預后恢復以及監(jiān)測復發(fā)等具有一定的意義[9]。理想的腫瘤標記物應只能在腫瘤機體里檢測出來，具有100%的靈敏性及特異性和較短的半衰期,其濃度應與腫瘤的大小、分期具有一定的相關性[10]。結直腸癌沒有一種腫瘤標志物是完全符合上述標準,目前臨床上主要選取血清CA242 和血漿HSP90α 作為結直腸癌的腫瘤標志物。血清CA242 是近年來應用于臨床較新的代表胰腺癌和結直腸癌的腫瘤標志物，它是一種唾液酸化的鞘糖脂類抗原，在腫瘤組織中的含量大大超過正常的組織,其水平可以提示腫瘤的性質,對于結直腸癌的診斷具有一定的特異性和靈敏性[11]。血漿 HSP90α 是體內重要的分子伴侶，它能與上百種底物蛋白發(fā)生作用，參與細胞內多種生物過程,它在多種惡性腫瘤細胞里都具有高表達，因此與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預后有一定的關系[12]。

表4 HSP90α 與結直腸癌患者臨床病理特征關系

本文的研究結果顯示結直腸癌患者CA242 和HSP90α 水平明顯高于正常者，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）,說明血清 CA242 和血漿 HSP90α 可以是鑒別癌癥的、具有高敏感性以及高特異性的標志物。結直腸癌TNM 分期是美國癌癥聯(lián)合會于1986 提出的，目的是通過檢查明確腫瘤的范圍，為腫瘤的預后和治療提供指導方案[13]。本文的實驗結果顯示TNM 分期Ⅲ～Ⅳ期結直腸癌患者血清CA242 明顯高于Ⅰ～Ⅱ期患者，比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），說明血清中 CA242 水平與結直腸癌分期成正比，TNM 分期越大,血清中CA242 水平越高，這與于海濤[14]等研究結果一致。通過觀察患者臨床病理特征與這兩種腫瘤標志物之間的關系,實驗結果顯示不同性別、年齡、分化程度、腫瘤直徑、病變部位的結直腸癌患者血漿HSP90α 和血清CA242 水平差異無統(tǒng)計學意義,說明這兩種腫瘤標志物與患者的年齡、性別、分化程度、腫瘤直徑和病變部位無關，這與梁勇明[15]等研究結果一致。此外實驗結果還顯示血漿中HSP90α 水平在結直腸癌TNM 分期中差異無統(tǒng)計學意義,說明血漿中HS P90α 水平與腫瘤分期無關，這與宋敏[16]等研究結果一致。本研究還將患者血漿 HSP90α 與血清CA242 水平進行回歸分析,結果顯示結直腸癌患者血清 CA242 與血漿 HSP90α 呈弱正相關性 （r=0.221，P＜0.05），進一步證明了血清 CA242 與血漿HSP90α 都可以作為結直腸癌的腫瘤標志物, 它們與結直腸癌的發(fā)生發(fā)展具有一定的關系[17]。

綜上所述,血清CA242 與血漿HSP90α 在結直腸癌患者體內的表達水平明顯高于正常人,而且血清CA242 與TMT 分期有一定的相關性，但是血漿HSP90α 與患者的臨床病理特征無明顯關系，除此之外,血清CA242 與血漿HSP90α 還具有一定的弱相關性,因此血清CA242 與血漿HSP90α 可能與結直腸癌的發(fā)病機制有關。