結(jié)腸癌患者血清超氧化物歧化酶和堿性磷酸酶聯(lián)合檢測的臨床分析

趙穎慧 吳窮

[摘要] 目的 探討血清超氧化物歧化酶（SOD）和堿性磷酸酶（ALP） 聯(lián)合檢測在結(jié)腸癌診療中的臨床應(yīng)用價(jià)值。方法 采用回顧性調(diào)查的方法，方便收集2017年9月—2019年7月入住該院的結(jié)腸癌患者共95例、結(jié)腸息肉患者共65例（對照組），使用Beckman Coulter AU5800型全自動(dòng)生化分析儀，測定血清中SOD和ALP 含量，以觀察不同時(shí)期、不同狀態(tài)下患者血清中兩指標(biāo)的變化。結(jié)果 結(jié)腸癌組患者血清SOD水平（138.76±20.605）KU/L低于結(jié)腸息肉組患者血清SOD水平（181.26±28.712）kU/L，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=10.903，P<0.01），結(jié)腸癌組患者血清ALP水平（132.71±66.882）U/L高于結(jié)腸息肉組患者血清的ALP水平（67.75±19.095）U/L（t=8.948，P<0.01）。在結(jié)腸癌組中，TNM分期Ⅲ期的患者血清SOD水平高于Ⅳ期的患者血清SOD水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。接受過手術(shù)治療的患者血清SOD水平高于未接受過手術(shù)治療的患者血清SOD水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清SOD水平低于未出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清SOD水平，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 結(jié)論 聯(lián)合檢測血清SOD與ALP 水平對結(jié)腸癌患者疾病診斷、病情評估可能有一定的臨床意義。

[關(guān)鍵詞] 結(jié)腸癌;超氧化物歧化酶;堿性磷酸酶

[Abstract] Objective To investigate the clinical application value of combined detection of serum superoxide dismutase （SOD） and alkaline phosphatase （ALP） in the diagnosis and treatment of colon cancer. Methods A retrospective survey was performed. Convenient select a total of 95 colon cancer patients and 65 colon polyps patients （control group） were admitted to our hospital from September 2017 to July 2019. A Beckman Coulter AU5800 automatic biochemical analyzer to determine the content of SOD and ALP in serum to observe the changes of two indicators in the serum of patients at different periods and in different states. Results The serum SOD level （138.76±20.605）kU/L in patients with colon cancer group was lower than the serum SOD level （181.26±28.712）kU/L in patients with colon polyp group，the difference was statistically significant（t=10.903， P<0.01）. The serum ALP level in patients with colon cancer group （132.71±66.882）U/L was higher than the serum ALP level in patients with colon polyps （67.75±19.095）U/L，the difference was statistically significant（t=8.948， P <0.01）. In the colon cancer group， the serum SOD level in patients with TNM stage III was higher than that in patients with stage Ⅳ，the difference was statistically significant（P<0.05）. The serum SOD level of patients who had undergone surgery was higher than that of patients who had not undergone surgery，the difference was statistically significant（P<0.05）. The serum SOD level in patients with distant metastasis was lower than that in patients without distant metastasis，the difference was statistically significant（P<0.05）. Conclusion The combined detection of serum SOD and ALP levels may have certain clinical significance in the diagnosis and evaluation of the disease of patients with colon cancer.

[Key words] Colon cancer; Superoxide dismutase; Alkaline phosphatase

結(jié)直腸癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤，此瘤種發(fā)病率高、早期診斷率低、治愈率低、病死率高。在全球范圍內(nèi)，每年因罹患結(jié)直腸癌而死亡的病例約占所有腫瘤患者的8.5%[1]。2012 年，在所有惡性腫瘤中，結(jié)直腸癌的發(fā)病率排第 3位、死亡率排第4位[2]。在我國范圍內(nèi)，目前結(jié)直腸癌標(biāo)化死亡率為12.07/10萬，死亡率居第5位[3]，且其發(fā)病率、死亡率均呈現(xiàn)上升趨勢[4]。鑒于此瘤種對于人類健康構(gòu)成較大的威脅，進(jìn)一步探索診斷方法及預(yù)后評價(jià)成為重要的課題。超氧化物歧化酶（SOD）是一種抗氧化金屬酶，它在生物體內(nèi)廣泛分布，其作用是清除體內(nèi)的活性氧自由基，從而保護(hù)正常細(xì)胞免受氧化應(yīng)激反應(yīng)的損傷。有關(guān)研究顯示[5]，SOD可作為一種腫瘤標(biāo)志物而為惡性腫瘤的診斷及預(yù)后評估提供參考價(jià)值。堿性磷酸酶（ALP）在人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織中廣泛分布，這種酶能催化核酸分子脫掉5-磷酸基團(tuán)，從而使DNA或RNA片段的5-P末端轉(zhuǎn)換成5-OH末端，其在遺傳物質(zhì)的復(fù)制中起到一定作用。有關(guān)研究顯示[6]，該酶在結(jié)腸癌患者血清中水平升高，對結(jié)腸癌的診斷有重要意義。因此，該研究擬對2017年9月—2019年7月入住蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院的結(jié)腸癌患者95例及結(jié)腸息肉患者65例的血清SOD和ALP水平聯(lián)合檢測和分析，以觀察不同時(shí)期、不同狀態(tài)下患者血清中兩指標(biāo)的變化，從而為臨床實(shí)踐提供數(shù)據(jù)和資料，現(xiàn)報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

該研究采用的方法是回顧性調(diào)查，經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，經(jīng)患者及家屬知情同意后，方便選取入住蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院結(jié)腸癌患者共95例（均經(jīng)病理診斷和影像學(xué)證實(shí)為結(jié)腸腺癌），結(jié)腸息肉患者共65例。通過查看電子病歷資料分別記錄患者姓名、住院號、性別、年齡、診斷、分期、是否接受過手術(shù)治療、是否存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、超氧化物歧化酶和堿性磷酸酶水平等。

1.2? 儀器與試劑

Beckman Coulter AU5800 型全自動(dòng)生化分析儀、安徽伊普諾康生物技術(shù)股份有限公司的SOD測定試劑盒、羅氏診斷公司的ALP檢測試劑盒。

1.3? 檢測方法

受試者停止進(jìn)食10 h后，在次日早晨空腹采靜脈血6 mL加入不含抗凝劑試管中，離心得血清標(biāo)本，SOD檢測采用鄰苯三酚自氧化法，參考范圍為129～216 KU/L。ALP檢測采用比色法，參考范圍為45～125 U/L。

1.4? 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 21.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，行t檢驗(yàn);計(jì)量資料用[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 一般資料的臨床特征

納入結(jié)腸癌組與結(jié)腸息肉組的全部患者共160例，其中男性94例（58.7%） 女性66例（41.3%）。年齡23～78歲，平均年齡（56.18±11.54）歲。

結(jié)腸癌組患者共95例，入組標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥18 歲，全部病例均經(jīng)過影像學(xué)及病理學(xué)檢查明確診斷。其中男性53例（55.8%），女性42例（44.2%）;年齡23～78歲，平均年齡（57.18±12.17）歲;按腫瘤發(fā)生部位，左半結(jié)腸53例（55.8%），右半結(jié)腸42例（44.2%）;按腫瘤TNM分期，Ⅰ期2例（2.1%），Ⅱ期16例（16.9%），Ⅲ期23例（24.2%），Ⅳ期54例（56.8%）。按有無接受手術(shù)治療，接受手術(shù)者78例（82.1%），未接受手術(shù)者17例（17.9%）。按有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者52例（54.7%），無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者43例（45.3%）。

結(jié)腸息肉組患者共65例，其中男性41例（63.1%），女性24例（36.9%）;年齡28～77歲，平均年齡（54.72±10.48）歲。

結(jié)腸癌組患者與結(jié)腸息肉組患者的性別和年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

2.2? 2組血清SOD和ALP水平的比較

結(jié)腸癌組患者血清SOD水平低于結(jié)腸息肉組患者血清SOD水平，結(jié)腸癌組患者血清ALP水平高于結(jié)腸息肉組患者血清ALP水平（P<0.01）。見表2。

2.3? 結(jié)腸癌患者血清SOD和ALP水平與臨床特征的關(guān)系

在結(jié)腸癌組中，不同年齡、性別、腫瘤發(fā)生部位的患者血清SOD、ALP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。TNM分期Ⅲ期的患者血清SOD水平高于Ⅳ期的患者血清SOD水平（P<0.05）;而ALP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。接受過手術(shù)治療的患者血清SOD水平高于未接受過手術(shù)治療的患者血清SOD水平（P<0.05）;而ALP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清SOD水平低于未出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清SOD水平（P<0.05）;而ALP水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3。

2.4? 結(jié)腸癌患者血清SOD和ALP表達(dá)水平的相關(guān)性分析

95例結(jié)腸癌患者中，血清SOD與ALP的水平呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.384），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

3? 討論

超氧化物歧化酶（SOD）是一種抗氧化金屬酶，它在生物體內(nèi)廣泛存在。其主要作用是催化活性氧自由基發(fā)生歧化反應(yīng)，生成氧和過氧化氫，從而能在機(jī)體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用。當(dāng)活性氧自由基產(chǎn)生過多而致使抗氧化系統(tǒng)的平衡被打破時(shí)，或?qū)е履承┘膊〉陌l(fā)生[7-8]。在許多重要的生物反應(yīng)中，活性氧 （reactive oxygen species，ROS）的過度積累可以使不同的磷酸酶失活，從而改變MAPK-ERK和AKT-激酶靶蛋白磷酸化狀態(tài)，并可促進(jìn)細(xì)胞增殖，除了在促進(jìn)癌細(xì)胞存活和增殖方面的作用外，活性氧也是也被認(rèn)為是重要的腫瘤表型，它可誘導(dǎo)DNA損傷導(dǎo)致不同類型的突變和整體基因組不穩(wěn)定[9]。因此，ROS的存在會(huì)導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定、轉(zhuǎn)錄失調(diào)、有絲分裂信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的誘導(dǎo)和復(fù)制錯(cuò)誤，以上所述過程可能引起抑癌基因的失活或原癌基因的激活，從而導(dǎo)致癌癥的發(fā)生[10]。由此，SOD或與機(jī)體抗氧化能力密切相關(guān)。國內(nèi)外多項(xiàng)研究顯示，惡性腫瘤（如胃癌、結(jié)直腸癌等）患者SOD水平低于非腫瘤患者，綜合多方論點(diǎn)總結(jié)，考慮惡性腫瘤患者血清SOD水平普遍降低，且低水平SOD可能增加了癌癥的發(fā)生率。

該研究主要觀察的是結(jié)腸癌患者，腸道容易受到化學(xué)物質(zhì)（如大量定植菌）、食物消化、情緒調(diào)節(jié)、免疫刺激等多種因素的影響，這些因素均可引起慢性炎癥反應(yīng)，伴隨著炎癥介質(zhì)的釋放，活性氧自由基以及其衍生物可同時(shí)產(chǎn)生[12]。在該項(xiàng)研究中，結(jié)腸癌組患者血清的SOD水平（138.76±20.605）kU/L低于結(jié)腸息肉組患者血清的SOD水平（181.26±28.712）kU/L，申穎等人[11]的研究示結(jié)腸癌組患者血清的SOD水平（126.6±30.6）kU/L低于胃腸息肉組患者血清的SOD水平（143.6±22.1）kU/L，兩項(xiàng)研究的結(jié)論相一致。在結(jié)腸癌組中，SOD水平在性別上無差異。在腫瘤發(fā)生部位上，以脾曲劃分左半結(jié)腸和右半結(jié)腸以分組，兩組患者SOD水平亦差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。左右半結(jié)腸癌癌變過程的不同分子生物學(xué)差異可能是左右半結(jié)腸癌差異的基礎(chǔ)，不同的分子特征賦予左右半結(jié)腸相異的組織學(xué)類型、臨床生物學(xué)行為，從而導(dǎo)致不同的臨床預(yù)后[13]，但該研究中，兩組患者血清SOD水平未見明顯差異，分析其可能與惡性腫瘤發(fā)生的分子機(jī)制無直接相關(guān)。根據(jù)TNM分期，結(jié)腸癌Ⅰ、Ⅱ期患者血清SOD水平與Ⅲ期、Ⅳ期患者血清SOD水平無明顯差異，可能與入組的Ⅰ、Ⅱ期病例數(shù)較少有關(guān)，而結(jié)腸癌Ⅲ期患者血清SOD水平高于Ⅳ期的患者血清SOD水平。Mantovani等人[14]對82例進(jìn)展期腫瘤患者和36名健康個(gè)體進(jìn)行對照研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，腫瘤分期越晚，SOD活性及水平越低。由此證實(shí)，機(jī)體氧化-抗氧化系統(tǒng)的失衡程度與腫瘤分期有關(guān)。結(jié)腸癌組中，出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清SOD水平低于未出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者血清SOD水平，結(jié)合結(jié)腸癌Ⅲ期患者血清SOD水平高于Ⅳ期的患者血清SOD水平，此結(jié)論與申穎等人的研究結(jié)論一致，考慮出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者已處于晚期，病情快速進(jìn)展，腫瘤細(xì)胞快速增殖，此生物過程可產(chǎn)生大量的活性氧自由基，因此，為清除過多的自由基，大量的SOD被消耗，而且有活性的SOD比例有所降低。此外，手術(shù)患者的SOD水平高于未手術(shù)患者，考慮手術(shù)治療可通過直接減瘤以減少腫瘤細(xì)胞的生長，從而減少氧自由基的產(chǎn)生，考慮手術(shù)治療的療效或可以改善結(jié)腸癌患者的預(yù)后，目前尚未檢索到其他文獻(xiàn)資料詳細(xì)闡述手術(shù)治療這一因素對于結(jié)腸癌患者血清SOD水平的影響。通過上述討論可以推測出SOD于機(jī)體是“正向”的物質(zhì)，提高機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的功能可能有利于預(yù)防、治療、控制結(jié)腸癌，徐顥溪[15]認(rèn)為SOD可作為醫(yī)藥產(chǎn)品用于預(yù)防腫瘤的發(fā)生。

堿性磷酸酶（ALP）可參與遺傳物質(zhì)的復(fù)制過程，存在于人體的各個(gè)器官，但主要集中在肝臟、骨、腎。它常被用來檢測膽管系統(tǒng)是否存在梗阻。ALP水平升高常見于肝臟疾病，如膽結(jié)石，酗酒，肝炎，原發(fā)性膽汁性肝硬化，原發(fā)性肝或膽汁性腫瘤，以及肝臟轉(zhuǎn)移性腫瘤等[16]。此前已經(jīng)有證據(jù)表明癌細(xì)胞內(nèi)ALP的活性較高，而且其會(huì)增加癌細(xì)胞的增殖。ALP水平不僅升高與肝臟疾病相關(guān)，也與晚期腫瘤狀態(tài)有關(guān)，提示結(jié)腸癌患者或處于較差的生存狀態(tài)[17]。在該研究中，相較于結(jié)腸息肉組血清ALP水平（67.75±19.095）U/L，結(jié)腸癌組患者血清ALP水平（132.71±66.882）U/L更高，考慮可能與癌癥細(xì)胞的惡性增殖、DNA加速復(fù)制有關(guān)。而在結(jié)腸癌組內(nèi)，以不同標(biāo)準(zhǔn)分組后患者血清ALP水平未見明顯差異。通過上述討論可以推測出ALP于機(jī)體是“負(fù)向”的物質(zhì)，其水平在一定程度上可區(qū)分癌癥患者與非癌癥患者。在臨床實(shí)踐中，ALP可作為一種簡便的檢測指標(biāo)來粗估患者是否患有癌癥。然而目前關(guān)于ALP與結(jié)腸癌相關(guān)性的臨床研究較少，仍需大量的臨床數(shù)據(jù)進(jìn)一步證實(shí)。

綜上所述，SOD與ALP在結(jié)腸癌患者血清中呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性，兩種酶的表達(dá)均有血清腫瘤標(biāo)志物的價(jià)值以反映惡性腫瘤的生長代謝、增殖活性情況及患者的生存狀態(tài)。通過一系列的分析和對比，SOD的腫瘤標(biāo)志物特性強(qiáng)于ALP，因此，動(dòng)態(tài)聯(lián)合監(jiān)此這兩項(xiàng)指標(biāo)而非單獨(dú)檢測某一種指標(biāo)對結(jié)腸癌診斷、病情評估具有重要的臨床意義。不足的是，該研究樣本數(shù)量有限、隨訪時(shí)長受限，故無法探討兩種酶對于結(jié)腸癌患者生存期及預(yù)后的判斷。因此SOD與ALP在結(jié)腸癌患者中的作用仍需要更大量的臨床數(shù)據(jù)資料及更長的隨訪時(shí)間以進(jìn)一步研究。

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