UV-B輻射下不同樹齡杜仲葉片光合及部分生理特性的變化1)

劉英 于雪瑩 于莉莉 杜丹丹 李德文 唐中華

(東北林業(yè)大學(xué)，哈爾濱，150040)

近年來，隨著現(xiàn)代城市工業(yè)的快速發(fā)展，大量的氯氟烴和氧化氮等物質(zhì)不加節(jié)制地排放到大氣中，造成平流層臭氧(O3)的破壞[1]，致使到達(dá)地表的紫外輻射B區(qū)(UV-B，波長(zhǎng)280～320 nm)輻射量日漸增強(qiáng)，對(duì)地球生物產(chǎn)生了嚴(yán)重的影響[2]。許多植物學(xué)、生態(tài)學(xué)家對(duì)不同植物在生理上響應(yīng)UV-B輻射做出相關(guān)實(shí)驗(yàn)，進(jìn)而判斷大氣臭氧層破壞對(duì)植物造成的影響程度，如UV-B輻射對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育、光合作用、抗氧化系統(tǒng)、代謝產(chǎn)物等產(chǎn)生不同的影響[3-4]。因此，植物對(duì)UV-B輻射的響應(yīng)已成為眾多學(xué)者研究的熱點(diǎn)，研究UV-B輻射增強(qiáng)對(duì)植物所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)具有重要的理論和實(shí)踐意義。

杜仲(EucommiaulmoidesOliver)為多年生落葉喬木，屬杜仲科杜仲屬，是中國(guó)珍稀瀕危第二類保護(hù)樹種。目前，有關(guān)杜仲研究層面主要集中在杜仲膠的生產(chǎn)與利用[5]、杜仲皮和葉子中藥用物質(zhì)的提取、分離、純化[6]等方面，近年杜仲保健品也得到推廣，但大部分研究的側(cè)重點(diǎn)均是杜仲各部位活性物質(zhì)功能的研究，對(duì)于外界環(huán)境對(duì)其生長(zhǎng)特征的改變研究較少。因此本實(shí)驗(yàn)開展不同強(qiáng)度UV-B輻射對(duì)杜仲各生理特征的響應(yīng)研究，豐富有關(guān)杜仲的逆境生理生化領(lǐng)域的研究。

1 材料與方法

1.1 UV-B輻射處理

以1、3、5年生杜仲樹苗為試驗(yàn)材料，栽至東北林業(yè)大學(xué)森林植物生態(tài)學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)園內(nèi)。進(jìn)行日常管理，確保水分、養(yǎng)分供應(yīng)。每個(gè)樹齡的杜仲各選取90株，分成3組，每組30株，在自然光基礎(chǔ)上，人工施加0(CK)、1.40(T1)、2.81 kJ·m-2·d-1(T2)不同UV-B輻射的處理。UV-B輻射處理通過懸掛UV-B輻射燈管產(chǎn)生，每日處理時(shí)間為08:00—16:00。UV-B輻射強(qiáng)度通過光譜儀AvaSpec 2048-2(Avantes BV, Netherlands)進(jìn)行測(cè)定。經(jīng)過3 d UV-B照射后，挑取植株葉位一致的葉子，測(cè)定各項(xiàng)指標(biāo)，每個(gè)處理隨機(jī)取樣。

1.2 光合色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定方法

光合色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的測(cè)定參考Jiang et al.[7]方法，稱取0.2 g新鮮杜仲葉片，加入80%預(yù)冷的丙酮，研磨成勻漿，6 000 r/min離心15 min，抽取上清液，在665、649和480 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值，利用公式計(jì)算質(zhì)量分?jǐn)?shù)(以鮮質(zhì)量計(jì))和比值。計(jì)算公式如下：

葉綠素a質(zhì)量分?jǐn)?shù)=12.19×A665-3.45×A649；

葉綠素b質(zhì)量分?jǐn)?shù)=21.99×A649-5.32×A665；

類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)=(1 000×A480-2.14×葉綠素a質(zhì)量分?jǐn)?shù)-70.16×葉綠素b質(zhì)量分?jǐn)?shù))/220。

1.3 光合參數(shù)測(cè)定方法

在實(shí)驗(yàn)處理周期內(nèi)，選取狀況完好的葉子，采用LI-6400型便攜式光合儀，在6400-02B LED光源下，氣溫25 ℃，相對(duì)濕度60%，CO2摩爾分?jǐn)?shù)為400 μmol·mol-1條件下測(cè)定凈光合速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO2濃度、蒸騰速率。

1.4 抗氧化酶活性的測(cè)定方法

抗氧化酶活性測(cè)定參照魏曉雪等[8]方法，稱取0.5 g新鮮杜仲葉片，加入5 mL緩沖液(50 mmol/L磷酸鈉鹽緩沖溶液，pH=7.8，含1.0 mmol/L乙二胺四乙酸二鈉，1%聚乙烯吡咯烷酮，1 mmol/L抗壞血酸)，充分研磨成勻漿，在4 ℃、8 000 r/min下，離心30 min，上清液即為酶的粗提取液。抗壞血酸過氧化物酶活性在290 nm波長(zhǎng)下，讀取3 min內(nèi)每15 s內(nèi)變化的吸光度值；過氧化氫酶活性測(cè)定以1 min內(nèi)OD240減少0.1的酶量為1個(gè)酶活單位(U)；超氧化物歧化酶活性以抑制氮藍(lán)四唑光化還原50%所需酶量為1個(gè)酶活單位；過氧化物酶活性測(cè)定利用愈創(chuàng)木酚氧化的原理測(cè)定該酶活性。

1.5 丙二醛濃度的測(cè)定方法

采用硫代巴比妥酸比色法[9]，稱取0.5 g新鮮杜仲葉片，液氮研磨成勻漿，加入5 mL 10%預(yù)冷的三氯乙酸，充分混勻后，在4 ℃下，4 000 r/min離心10 min，抽取上清液備用。取3 mL上清液，加入2 mL 0.5%的硫代巴比妥酸，充分混勻加塞，沸水浴15～30 min，冷卻后，8 000 r/m沁離心15 min。取上清液在532、450、600 nm波長(zhǎng)下讀取其吸光度值。計(jì)算公式為：

丙二醛濃度=[6.45×(A532-A600)-0.56×A450]×

Vt/WF/Vs。

式中：Vt為總提取液的體積(mL)；Vs為測(cè)定時(shí)所用的提取液體積(mL)；WF為樣品鮮質(zhì)量(g)。

1.6 次生代謝產(chǎn)物質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定方法

總酚的提取與測(cè)定參考Chaovanalikit et al.[10]方法，選用沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)物，765 nm處測(cè)吸光度值，得到吸光度值A(chǔ)與沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度(g·L-1)之間的回歸方程，計(jì)算總酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg·g-1)。黃酮的提取與測(cè)定參考尉芹等[11]方法，以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)物，510 nm處吸光度值，根據(jù)蘆丁濃度和吸光度值建立回歸方程，計(jì)算總黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg·g-1)。單寧的提取與測(cè)定參考王杰興等[12]方法，442 nm處測(cè)定吸光值，以單寧標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和吸光度值建立回歸方程，計(jì)算葉片中單寧質(zhì)量分?jǐn)?shù)(mg·g-1)。

1.7 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2010軟件處理數(shù)據(jù)，GraphPad Prism 5制圖，采用SAS軟件進(jìn)行LSD顯著性差異檢驗(yàn)。利用隸屬函數(shù)法[13]對(duì)不同樹齡的抗紫外性能進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，運(yùn)用的主要公式如下：U(Xi)=(Xi-Ximin)/(Ximax-Ximin)。式中：U為抗脅迫隸屬函數(shù)值；Xi表示第i個(gè)因子得分的平均值；Ximin表示第i個(gè)因子得分的最小值；Ximax表示第i個(gè)因子得分的最大值。

2 結(jié)果與分析

2.1 UV-B輻射強(qiáng)度對(duì)不同樹齡杜仲光合色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

不同樹齡杜仲光合色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化結(jié)果如表1所示。T1和T2處理下，5年生杜仲葉片中葉綠素a、葉綠素b、總?cè)~綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著增加(P<0.05)，類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)明顯下降(P<0.05)。T2處理下，5年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)升高了19.51%，1年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)降低了36.21%；3年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)降低了13.83%，其中葉綠素b質(zhì)量分?jǐn)?shù)、葉綠素a質(zhì)量分?jǐn)?shù)/葉綠素b質(zhì)量分?jǐn)?shù)無顯著影響(P>0.05)，葉綠素a和類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)明顯(P<0.05)下降。由此，UV-B輻射強(qiáng)度下，葉綠素a、葉綠素b、葉綠素、類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)從大到小變化表現(xiàn)為：1、3、5年生；葉綠素a質(zhì)量分?jǐn)?shù)/葉綠素b質(zhì)量分?jǐn)?shù)從大到小變化表現(xiàn)為：5年生最大，3年生和1年生相近。

2.2 UV-B輻射強(qiáng)度對(duì)不同樹齡杜仲氣體交換參數(shù)、氣孔導(dǎo)度、蒸騰速率的影響

UV-B輻射強(qiáng)弱對(duì)不同樹齡杜仲氣體交換參數(shù)影響不同，結(jié)果見表2。不同樹齡杜仲的凈光合速率、氣孔導(dǎo)率和蒸騰速率對(duì)UV-B增強(qiáng)的響應(yīng)均表現(xiàn)為下降；與CK相比，T2處理下1、3、5年生杜仲葉片的凈光合速率分別降低了86.03%、70.57%、12.77%，氣孔導(dǎo)率分別降低了87.5%、75%、21.43%，蒸騰速率分別降低了82.38%、65.52%、18.14%。隨UV-B輻射增強(qiáng)情況下，不同樹齡杜仲葉的胞間CO2濃度變化不同，1、5年生杜仲胞間CO2濃度表現(xiàn)為略降低；而T1處理下，3年生杜仲胞間CO2濃度稍有升高，T2處理下降低。同一UV-B輻射強(qiáng)度下，不同樹齡間氣體交換參數(shù)凈光合速率、氣孔導(dǎo)率和蒸騰速率為5年生最大，3年生與1年生相近，胞間CO2濃度則無顯著差異性變化。

表1 增加UV-B輻射對(duì)不同樹齡杜仲光和色素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

注：CK為對(duì)照，T1和T2分別是UV-B輻射強(qiáng)度1.41 kJ·m-2·d-1和2.81 kJ·m-2·d-1；同列不同大寫字母代表在同一UV-B輻射強(qiáng)度下不同樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)，小寫字母代表在UV-B增強(qiáng)下同一樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)。

表2 增加UV-B輻射對(duì)不同樹齡杜仲凈光合速率、蒸騰速率、胞間CO2濃度、氣孔導(dǎo)率的影響

注：CK為對(duì)照，T1和T2分別是UV-B輻射強(qiáng)度1.41 kJ·m-2·d-1和2.81 kJ·m-2·d-1；同列不同大寫字母代表在同一UV-B輻射強(qiáng)度下不同樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)，小寫字母代表在UV-B增強(qiáng)下同一樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)。

2.3 UV-B輻射增強(qiáng)對(duì)不同樹齡杜仲丙二醛濃度的影響

與CK相比，T1和T2處理下，不同樹齡杜仲丙二醛濃度呈顯著增加趨勢(shì)(見表3)，T2處理下，不同樹齡杜仲丙二醛濃度均顯著增加(P<0.05)，分別增加了22.27%，78.0%，93.09%，說明不同齡杜仲受到UV-B輻射的脅迫。同一UV-B輻射強(qiáng)度下，丙二醛濃度從大到小變化表現(xiàn)為：5年生最大、3年生大于或等于1年生。

2.4 UV-B輻射增強(qiáng)對(duì)不同樹齡杜仲抗氧化酶活性的影響

對(duì)不同樹齡杜仲葉片中抗氧化酶系活性影響的結(jié)果見表4。紫外輻射B區(qū)(UV-B)輻射增強(qiáng)情況下，不同樹齡杜仲抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶和過氧化物酶活性均呈顯著降低(P<0.05)趨勢(shì)(表4)。與CK相比，T2處理下，1年生杜仲抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶和過氧化物酶分別下降了88.44%、84.85%和58.82%，3年生杜仲抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶和過氧化物酶分別下降了80.58%、62.23%和58.06%，5年生杜仲抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶和過氧化物酶分別下降了71.43%、72.18%、54.57%，表明重度UV-B輻射(2.81 kJ·m-2·d-1)下，1、3年生杜仲抗氧化酶系中的抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶和過氧化物酶活性下降趨勢(shì)更顯著(P<0.05)。隨著UV-B輻射增強(qiáng)，1、3年生杜仲超氧化物歧化酶活性呈上升趨勢(shì)(P<0.05)，5年生杜仲超氧化物歧化酶活性無顯著變化(P>0.05)，表明UV-B輻射強(qiáng)度對(duì)5年生杜仲葉片中超氧化物歧化酶活性沒有影響。

2.5 UV-B輻射增強(qiáng)對(duì)不同樹齡杜仲次生代謝物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

不同UV-B輻射強(qiáng)度下，不同樹齡杜仲次生代謝物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)響應(yīng)不同，結(jié)果見表5。在T1處理下，1、5年生杜仲黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著提高(P<0.05)，分別提高了1.04倍和0.11倍，3年生杜仲黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)上升趨勢(shì)不顯著(P>0.05)。在T2處理下，3年生杜仲黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著增高(P<0.05)，增加了1.45倍，1、5年生杜仲黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)相對(duì)T1處理呈下降趨勢(shì)；但與CK相比，5年生杜仲黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)還呈顯著提高趨勢(shì)(P<0.05)。同一UV-B輻射強(qiáng)度下，不同樹齡杜仲黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)5年生最大，1年生大于等于3年生。隨著UV-B輻射強(qiáng)度增加，1、3年生杜仲總酚和單寧的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均呈增加后稍有下降，5年生杜仲總酚和單寧的質(zhì)量分?jǐn)?shù)均呈增加趨勢(shì)(P<0.05)。其中T1處理下，不同樹齡總酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別提升了16.73%、10.21%和30.68%，T2處理下，單寧質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別提升了1.24倍、0.29倍和0.068倍。同一UV-B輻射強(qiáng)度下，不同樹齡杜仲總酚和單寧質(zhì)量分?jǐn)?shù)1年生與3年生相近，5年生最小。

表3 增加UV-B輻射對(duì)不同樹齡杜仲丙二醛濃度的影響

注：丙二醛濃度以鮮質(zhì)量計(jì)；CK為對(duì)照，T1和T2分別是UV-B輻射強(qiáng)度1.41 kJ·m-2·d-1和2.81 kJ·m-2·d-1；同列不同大寫字母代表在同一UV-B輻射強(qiáng)度下不同樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)，小寫字母代表在UV-B增強(qiáng)下同一樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)。

表4 增加UV-B輻射對(duì)不同樹齡杜仲抗氧化酶抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶、過氧化物酶、超氧化物歧化酶活性的影響

注：CK為對(duì)照，T1和T2分別是UV-B輻射強(qiáng)度1.41 kJ·m-2·d-1和2.81 kJ·m-2·d-1；同列不同大寫字母代表在同一UV-B輻射強(qiáng)度下不同樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)，小寫字母代表在UV-B增強(qiáng)下同一樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)。

表5增加UV-B輻射對(duì)不同樹齡杜仲中次生代謝物質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

樹齡/a處理黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)/mg·g-1單寧質(zhì)量分?jǐn)?shù)/mg·g-1總酚質(zhì)量分?jǐn)?shù)/mg·g-11CK(6.69±0.28)Bb(27.77±1.87)Ac(2.76±0.28)BbT1(14.71±2.01)Ba(62.60±2.01)Aa(3.23±0.28)AaT2(8.89±0.98)Cb(48.39±4.68)Bb(2.90±0.35)Aa3CK(6.14±2.01)Bb(35.03±2.35)Ab(3.15±0.21)AbT1(7.51±0.28)Cb(54.05±2.81)Aa(3.08±0.58)AaT2(11.41±1.30)Ba(49.14±5.21)Aa(3.23±0.28)Aa5CK(25.49±0.58)Ab(15.04±2.01)Bc(0.94±0.09)CcT1(28.32±2.11)Aa(16.06±2.01)Bb(1.20±0.11)BbT2(21.45±0.98)Ac(26.06±3.21)Ba(1.33±0.32)Ba

注：CK為對(duì)照，T1和T2分別是UV-B輻射強(qiáng)度1.41 kJ·m-2·d-1和2.81 kJ·m-2·d-1；同列不同大寫字母代表在同一UV-B輻射強(qiáng)度下不同樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)，小寫字母代表在UV-B增強(qiáng)下同一樹齡杜仲的差異顯著性(P<0.05)。

2.6 不同樹齡杜仲對(duì)抗紫外輻射的性能評(píng)估

通過隸屬度函數(shù)計(jì)算分析表明(見表6)：1年生杜仲在胞間CO2濃度、葉綠素和單寧的質(zhì)量分?jǐn)?shù)積累上抗紫外輻射B(UV-B)能力較強(qiáng)，3年生杜仲在過氧化氫酶和超氧化物歧化酶活性、總酚的積累上抗UV-B能力較強(qiáng)，5年生杜仲在氣孔導(dǎo)率、蒸騰速率、黃酮的積累上抗UV-B能力較強(qiáng)，說明在UV-B輻射下，不同樹齡杜仲通過調(diào)節(jié)部分指標(biāo)來抵御脅迫。通過隸屬函數(shù)均值(1年生為0.42、3年生為0.47、5年生為0.57)結(jié)果反映出不同樹齡杜仲抗紫外能力，五年生最大，3年生大于等于1年生，說明5年生杜仲抗紫外能力最強(qiáng)。

表6 不同樹齡杜仲對(duì)抗紫外處理的綜合評(píng)價(jià)

3 討論

由于近年臭氧層破壞，使得太陽(yáng)光中波UV-B輻射到達(dá)地表劑量加大，UV-B輻射直接作用到植物葉片上；而葉片是直接接受光源的植物器官，且光合作用的強(qiáng)弱對(duì)植物的生長(zhǎng)和抗逆性都具有十分重要的影響[14]。由于植物種類、生長(zhǎng)環(huán)境、UV-B輻射作用時(shí)間長(zhǎng)短、作用劑量強(qiáng)弱等諸多影響因子，UV-B輻射對(duì)植物光合作用的影響也各有差異[15]。葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)的高低直接影響著光合速率和光合產(chǎn)物的形成，影響植物的生長(zhǎng)[16]。本研究中增加環(huán)境UV-B輻射強(qiáng)度，1、3年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)降低，是由于UV-B輻射強(qiáng)度的增強(qiáng)損傷了杜仲樹苗的葉綠體結(jié)構(gòu)，造成葉綠素分解或合成受阻，使葉綠體膜完整性缺失，所以1、3年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈降低的趨勢(shì)；而5年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)在UV-B輻射脅迫下呈升高趨勢(shì)，可能5年生樹苗葉綠體結(jié)構(gòu)沒有被破壞，推測(cè)其抵抗UV-B輻射能力增強(qiáng)。類胡蘿卜素除吸收傳遞和轉(zhuǎn)化光能外，還可對(duì)葉片起到保護(hù)作用[17]，本試驗(yàn)中，隨著UV-B輻射的增強(qiáng)，5年生杜仲類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈降低趨勢(shì)，也說明UV-B輻射對(duì)5年生樹苗造成脅迫損害較小，因而從葉綠素和類胡蘿卜素質(zhì)量分?jǐn)?shù)變化反映出5年生杜仲樹苗抗紫外能力強(qiáng)于低年齡的杜仲。

抗氧化酶系統(tǒng)作為植物體內(nèi)重要的活性氧自由基清除系統(tǒng)，在植物抵抗氧化脅迫中起著重要的作用[18]。Foyer et al.[19]認(rèn)為，植物自身會(huì)通過降低抗氧化酶活性來喚醒其它的抵御外界脅迫的保衛(wèi)機(jī)制。在不同環(huán)境脅迫下，不同植物中活性氧的產(chǎn)生與質(zhì)量分?jǐn)?shù)聚集程度不一，抗氧化酶活性變化也存在差異[20]。當(dāng)植物體內(nèi)出現(xiàn)活性氧積累時(shí)，第一個(gè)接受清除信號(hào)的是超氧化物歧化酶[20]，說明超氧化物歧化酶在植物體內(nèi)抗氧化酶清除系統(tǒng)中首先發(fā)揮其功能，它能迅速的將超氧陰離子自由基催化成H2O2，超氧化物歧化酶活性增加說明增加了清除活性氧自由基的能力。本研究中，1年生和3年生杜仲在UV-B輻射增強(qiáng)下，超氧化物歧化酶活性顯著升高，說明1、3年生杜仲受到UV-B輻射脅迫的刺激，激活體內(nèi)超氧化物歧化酶活性來清除活性氧自由基進(jìn)而抵御逆境脅迫；而5年生杜仲在不同UV-B輻射強(qiáng)度處理下，超氧化物歧化酶活性變化不明顯，間接說明5年生杜仲抗UV-B輻射能力增強(qiáng)。

植物體內(nèi)黃酮類可作為判斷植株響應(yīng)UV-B輻射耐受力大小的重要依據(jù)[21]，黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，被認(rèn)為是植株響應(yīng)UV-B的普遍特征[22]，因其具有屏蔽UV-B和清除UV-B誘發(fā)活性氧功能而被作為植物對(duì)抗UV-B輻射的“過濾劑”和“淬滅劑”[23]?？偡优c單寧也是植株體內(nèi)普遍存在的次生代謝防御物，能有效屏蔽UV-B輻射，提高植株對(duì)UV-B的抵御能力[24]。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明：不同UV-B輻射強(qiáng)度下，與CK相比，不同樹齡杜仲黃酮、總酚、單寧質(zhì)量分?jǐn)?shù)均有所積累，表明次生代謝物質(zhì)的積累提高了植物抵御脅迫的能力，減少傷害。隨著UV-B輻射強(qiáng)度增強(qiáng)，5年生杜仲中黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)積累明顯高于3、1年生的，推測(cè)5年生杜仲抗UV-B輻射能力強(qiáng)，可能是通過調(diào)節(jié)體內(nèi)黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)實(shí)現(xiàn)的。

4 結(jié)論

隨著環(huán)境UV-B輻射強(qiáng)度的增加，不同樹齡杜仲在光合和生理代謝變化上存在差異。1、3年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)均呈顯著降低趨勢(shì)(P<0.05)，而5年生杜仲葉綠素質(zhì)量分?jǐn)?shù)呈升高趨勢(shì)；不同樹齡中抗壞血酸過氧化物酶、過氧化氫酶、過氧化物酶的活性顯著降低，1、3年生杜仲超氧化物歧化酶活性均呈顯著升高(P<0.05)，5年生杜仲超氧化物歧化酶活性升高趨勢(shì)不明顯；不同樹齡杜仲黃酮、總酚、單寧質(zhì)量分?jǐn)?shù)均有所積累，其中5年生黃酮質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著(P<0.05)升高。綜合分析表明5年生杜仲抗UV-B輻射能力相對(duì)強(qiáng)。