長(zhǎng)鏈非編碼RNA在肝癌化療耐藥中的研究進(jìn)展

唐貴菊，田塬，王繼婷，蘇松，宋敏，李亞玲

1西南醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院臨床藥學(xué)系，四川瀘州 646000；2西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院肝膽科，四川瀘州 646000；3西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)部，四川瀘州 646000；4西南醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，四川瀘州 646000

肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是全球第5位的惡性腫瘤性疾病，2018年其致死人數(shù)占癌癥死亡總數(shù)的8.2%[1]。我國(guó)是肝癌高發(fā)國(guó)家，肝癌患者占全球50%以上。肝癌早期癥狀不明顯，病灶隱匿且發(fā)展迅速，致使大多數(shù)患者在臨床確診時(shí)已屬中晚期甚至已發(fā)生轉(zhuǎn)移，不能行根治性手術(shù)切除[2]，因此化療成為中晚期肝癌的主要治療方法之一[3]。近年來(lái)，肝癌化療藥物呈現(xiàn)多元化(如阿霉素、順鉑、絲裂霉素、氟尿嘧啶、奧沙利鉑等)，并由單一藥物發(fā)展為多種藥物聯(lián)合應(yīng)用，提高了晚期肝癌患者的生存率，但長(zhǎng)期用藥產(chǎn)生的化療耐藥仍是亟待解決的關(guān)鍵問(wèn)題。大量研究發(fā)現(xiàn)，長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNAs，lncRNAs)的異常表達(dá)與肝癌化療耐藥密切相關(guān)[4-6](表1)，可通過(guò)調(diào)控肝癌細(xì)胞的藥物代謝、程序性死亡及腫瘤干細(xì)胞的自我更新等生物學(xué)活動(dòng)參與肝癌化療耐藥。本文就lncRNAs參與肝癌化療耐藥的作用及機(jī)制進(jìn)行 綜述。

1 定義與分類(lèi)

LncRNAs是真核細(xì)胞中一類(lèi)轉(zhuǎn)錄本長(zhǎng)度多于200個(gè)核苷酸的非編碼RNA，由于缺乏開(kāi)放閱讀框，不具備編碼蛋白質(zhì)的功能[7]。但lncRNAs并非無(wú) 生物學(xué)功能的“噪音序列”[8-9]，而是具有潛在的生物學(xué)功能，與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展、診斷和治療密切相關(guān)。目前，lncR NA s已成為腫瘤耐藥機(jī)制研究的熱點(diǎn)[10-11]。近年來(lái)，隨著人類(lèi)基因組計(jì)劃的完成和高通量基因組技術(shù)的建立，越來(lái)越多的lncR NA s被發(fā)現(xiàn)。根據(jù)基因組定位，lncRNAs可分為5類(lèi)[8]：正義lncRNA(sense lncRNA)、反義lncRNA(an-tisence lncRNA)、雙向lncRNA(bidirectional lncRNA)、內(nèi)含子lncRNA(intronic lncRNA)和基因間lncRNA(intergenic lncRNA)。LncRNAs可通過(guò)信號(hào)、支架、誘餌、引導(dǎo)等方式在表觀遺傳、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)，參與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移等生物學(xué)活動(dòng)，在腫瘤(包括肝癌)化療耐藥中發(fā)揮重要作用[12-15]。

表1 肝癌化療耐藥相關(guān)lncRNAsTab.1 Long non-coding RNA in chemotherapeutic resistance of hepatocellular carcinoma

2 調(diào)控肝癌細(xì)胞藥物代謝

藥物代謝反應(yīng)主要包括氧化、還原、水解及結(jié)合反應(yīng)等4種類(lèi)型。其中氧化、還原和水解反應(yīng)為Ⅰ相代謝反應(yīng)：藥物經(jīng)過(guò)Ⅰ相代謝反應(yīng)后極性增大(即水溶性增大)，易于排出體外；結(jié)合反應(yīng)為Ⅱ相代謝反應(yīng)：藥物及其代謝物與一些內(nèi)源性物質(zhì)(如葡萄糖醛酸、甲基、硫基、甘氨酸等基團(tuán))結(jié)合，形成極性更強(qiáng)的物質(zhì)，通過(guò)膽汁或尿液排出體外。2.1 細(xì)胞內(nèi)藥物清除 LncRNAs通過(guò)調(diào)控Ⅰ相代謝反應(yīng)中的細(xì)胞色素P450酶系來(lái)清除細(xì)胞內(nèi)藥物，從而介導(dǎo)肝癌化療耐藥。在研究小鼠肝臟時(shí)發(fā)現(xiàn)，位于細(xì)胞色素氧化酶P450 4B1(CYP4B1)編碼基因下游約40 kb處的lncRNA Gm12839與CYP4B1基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān)[16]，表明lncRNA Gm12839可通過(guò)抑制CYP4B1基因的表達(dá)降低P450酶的水平，以減弱Ⅰ相代謝反應(yīng)對(duì)藥物的清除能力，逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞的耐藥性。

2.2 藥物外排 除Ⅰ、Ⅱ相代謝反應(yīng)外，藥物代謝還包括逆濃度外排。腫瘤細(xì)胞中逆濃度外排是藥物代謝誘發(fā)腫瘤細(xì)胞耐藥的主要原因。LncRNAs調(diào)控藥物代謝介導(dǎo)肝癌耐藥的機(jī)制主要是通過(guò)藥物外排，該過(guò)程與ATP結(jié)合盒式蛋白(ATP-binding cassette transporter，ABC)超家族(一類(lèi)ATP驅(qū)動(dòng)泵，具有主動(dòng)運(yùn)輸跨膜化合物的功能)密切相關(guān)。已有研究顯示，ABC超家族的多個(gè)蛋白能與細(xì)胞內(nèi)藥物底物相結(jié)合，再結(jié)合膜上的ATP獲得能量，最終將底物泵出細(xì)胞，從而降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度，導(dǎo)致細(xì)胞耐藥[17]。研究發(fā)現(xiàn)，ABC超家族中B、C、G亞家族的ABCB1(multi-drug resistance 1，MDR1/P-gp)、ABCC1、ABCG2等成員參與了腫瘤細(xì)胞的多藥 耐藥。

2.2.1 調(diào)控ABCB1表達(dá) P-糖蛋白(P-gp)是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的ABC轉(zhuǎn)運(yùn)體，由多藥耐藥基因MDR1編碼，在多種腫瘤細(xì)胞中高度表達(dá)。P-gp在肝癌細(xì)胞中高表達(dá)，可將胞內(nèi)藥物泵出，降低胞內(nèi)藥物濃度，導(dǎo)致細(xì)胞耐藥。一項(xiàng)與多藥耐藥基因MDR1相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA H19可通過(guò)調(diào)節(jié)MDR1啟動(dòng)子甲基化，促進(jìn)肝癌細(xì)胞HepG2中P-gp的表達(dá)[18]。敲低lncRNA H19可增強(qiáng)ABCB1啟動(dòng)子甲基化，抑制P-gp的表達(dá)，增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性[19]。 在肝癌細(xì)胞SMMC-7721/ADM和HepG2/ADM中，敲低lncRNA TUG1或TUG1過(guò)表達(dá)均會(huì)影響P-gp的表達(dá)，從而影響肝癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的耐藥性[20]。此外，lncRNA HOTAIR在肝癌細(xì)胞Huh7中低表達(dá)，增強(qiáng)了肝癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性，分析其機(jī)制為：在敲低lncRNA HOTAIR的肝癌細(xì)胞Huh7中，ABCB1 mRNA和蛋白表達(dá)水平均降低，表明lncRNA HOTAIR可能通過(guò)調(diào)控ABCB1的表達(dá)而影響肝癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性[21]?？傊玫蚻ncRNA H19、TUG1和HOTAIR均可下調(diào)P-gp的表達(dá)，減少P-gp參與的藥物外排，使胞內(nèi)藥物濃度增加，增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性，提示P-gp可能是逆轉(zhuǎn)肝癌化療耐藥的一個(gè)靶點(diǎn)。

2.2.2 調(diào)控ABCC1表達(dá) ABCC1又稱(chēng)多藥耐藥相關(guān)蛋白1(multidrug resistance protein 1，MRP1)，被發(fā)現(xiàn)于阿霉素小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株H69/AR中，在耐藥細(xì)胞中的表達(dá)水平高于敏感細(xì)胞近100倍，是除P-gp外研究最多的多藥耐藥蛋白之一。有研究發(fā)現(xiàn)，在奧沙利鉑耐藥肝癌細(xì)胞(Huh7/OXA和HepG2/OXA)中，lncRNA NR2F1-AS1及ABCC1表達(dá)均上調(diào)，而miR-363表達(dá)下調(diào)，敲低lncRNA NR2F1-AS1可降低肝癌細(xì)胞對(duì)奧沙利鉑的耐藥性，表明lncRNA NR2F1-AS1可通過(guò)內(nèi)源性應(yīng)答miR-363促進(jìn)ABCC1表達(dá)，從而影響肝癌細(xì)胞耐藥[22]。綜上，lncRNA可抑制ABCC1的表達(dá)，減少能與ABCC1結(jié)合的化療藥物的外排，抑制肝癌細(xì)胞的化療耐藥。2.2.3 調(diào)控ABCG2表達(dá) ABCG2又稱(chēng)乳腺癌耐藥蛋白，被發(fā)現(xiàn)于乳腺癌耐藥細(xì)胞株中，其表達(dá)水平與乳腺癌化療耐藥密切相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，過(guò)表達(dá)的ABCG2參與了肝癌的多藥耐藥[23]。LincRNA VLDLR在腫瘤細(xì)胞中呈現(xiàn)高表達(dá)。暴露于不同的抗癌藥物(如阿霉素和喜樹(shù)堿)后，肝癌細(xì)胞及其釋放的細(xì)胞外囊泡中的lncRNA VLDLR表達(dá)增加，提示lncRNA VLDLR與肝癌細(xì)胞的化療敏感性相關(guān)；siRNA介導(dǎo)的lncRNA VLDLR敲低降低了ABCG2的表達(dá)及細(xì)胞存活率，阻滯了細(xì)胞周期進(jìn)程[24]。ABCG2過(guò)表達(dá)減弱了lncRNA VLDLR敲低對(duì)阿霉素誘導(dǎo)的HepG2細(xì)胞死亡的作用，表明lncRNA VLDLR可能通過(guò)調(diào)控癌細(xì)胞內(nèi)ABCG2的表達(dá)，促進(jìn)化療耐藥。綜上，lncRNA可抑制ABCG2的表達(dá)，致使藥物外排作用減弱，抑制肝癌細(xì)胞的化療耐藥。

3 調(diào)控細(xì)胞程序性死亡

細(xì)胞程序性死亡(programmed cell death，PCD)是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細(xì)胞自主的有序的死亡。

3.1 調(diào)控細(xì)胞凋亡 細(xì)胞凋亡是一種生理性、程序性的細(xì)胞死亡過(guò)程。細(xì)胞凋亡受阻或喪失凋亡能力是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生耐藥的重要誘因[25]。LncRNAs可通過(guò)調(diào)節(jié)生物酶活性、癌基因或抑癌基因和轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)等過(guò)程阻止腫瘤細(xì)胞在藥物作用下凋亡，從而產(chǎn)生耐藥性。

3.1.1 調(diào)節(jié)生物酶活性 糖原合成酶激酶-3β (glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)是糖原合成酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3，GSK-3)的一種亞型結(jié)構(gòu)酶，其可作用于眾多的信號(hào)蛋白、結(jié)構(gòu)蛋白和轉(zhuǎn)錄因子，進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖、存活和凋亡。GSK-3β通過(guò)磷酸化糖原合成酶(glycogen synthase，GS)抑制GS的活性，影響血液中葡萄糖的濃度，調(diào)控Bax/HKII的比例，進(jìn)而影響線(xiàn)粒體滲透性及細(xì)胞色素C的釋放，參與細(xì)胞凋亡的調(diào)控。在肝癌細(xì)胞中，lncRNA HANR可直接結(jié)合GSK-3β反應(yīng)蛋白(GSKIP)促進(jìn)GSK-3β磷酸化，調(diào)控肝癌細(xì)胞的增殖和凋亡。敲低lncRNA HANR可抑制肝癌細(xì)胞的增殖及異種原位移植，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性[26]。

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，是生物衰老與死亡的直觀指標(biāo)。相關(guān)研究顯示，SOD活性與lncRNA H19表達(dá)水平及細(xì)胞活性均呈負(fù)相關(guān)，在肝癌細(xì)胞中，lncRNA H19表達(dá)下調(diào)可能通過(guò)阻斷MAPK/ERK信號(hào)通路，誘導(dǎo)CD133+腫瘤干細(xì)胞的氧化應(yīng)激，抑制肝癌細(xì)胞的化療耐藥[27]。GSK-3β和SOD均參與調(diào)控肝癌細(xì)胞凋亡，通過(guò)促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡，逆轉(zhuǎn)肝癌的化療耐藥。總之，敲低lncRNA HANR及H19可通過(guò)影響GSK-3β和SOD活性抑制肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)，促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡，提示lncRNA HANR及H19是肝癌化療耐藥治療的靶點(diǎn)。

3.1.2 調(diào)節(jié)癌基因或抑癌基因和轉(zhuǎn)錄因子表達(dá) p53基因是一種與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)的抑癌基因，可根據(jù)細(xì)胞受損程度和修復(fù)能力決定是否啟動(dòng)細(xì)胞凋亡。有研究顯示，TNF-α/IL-6-lncRNA 00607-NFκB-p65/p53信號(hào)軸可作為肝癌化療的一種新途徑。LncRNA 00607可與p65啟動(dòng)子結(jié)合，抑制p65轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致肝癌細(xì)胞中p53水平升高，抑制肝癌細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，從而增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性[28]。此外，lncRNA NRAL(Nrf2調(diào)節(jié)相關(guān)的lncRNA)通過(guò)取代競(jìng)爭(zhēng)性?xún)?nèi)源性RNA(ceRNA)miR-340-5p調(diào)控Nrf2的表達(dá)，敲低NRAL可抑制Nrf2的表達(dá)，增強(qiáng)HepG2/DDP的細(xì)胞毒性，促進(jìn)耐藥細(xì)胞凋亡[29]。由此可見(jiàn)，lncRNA 00607和NRAL可直接或間接發(fā)揮抑癌基因的作用，通過(guò)調(diào)控lncRNA 00607和NRAL可抑制肝癌細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡，逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞的化療耐藥。

3.2 調(diào)控細(xì)胞自噬 細(xì)胞自噬是一種進(jìn)化上保守的細(xì)胞降解過(guò)程，對(duì)腫瘤細(xì)胞具有雙重作用。在腫瘤早期，自噬通過(guò)抑制炎癥反應(yīng)及促進(jìn)基因組的穩(wěn)定性，抑制腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[30]；而作為一種細(xì)胞自我保護(hù)方式，自噬亦可保護(hù)癌細(xì)胞對(duì)抗外界各種不利因素的影響[31-32]。LncRNAs具有促進(jìn)和抑制腫瘤細(xì)胞自噬的雙重調(diào)節(jié)功能[33]，可通過(guò)調(diào)控胞內(nèi)自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，影響肝癌化療耐藥。

微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(microtubule associated protein 1 light chain 3，LC3)是自噬特異性標(biāo)志分子，包含LC3Ⅰ和LC3Ⅱ兩種類(lèi)型，其表達(dá)水平高低間接反映了自噬活性的強(qiáng)弱。在肝癌細(xì)胞中，lncRNA HULC可通過(guò)下調(diào)成熟miR-15a的表達(dá)，上調(diào)p62的表達(dá)；lncRNA HULC過(guò)表達(dá)可通過(guò)激活Sirt1增加LC3和Becline-1(自噬相關(guān)基因)的表達(dá)，增強(qiáng)LC3與Atg3之間的作用，促進(jìn)細(xì)胞自噬，增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)奧沙利鉑的耐藥性[34]。LC3和p62作為自噬標(biāo)志蛋白參與了整個(gè)自噬過(guò)程，是檢測(cè)自噬活性的重要指標(biāo)[35]。在肝癌多藥耐藥細(xì)胞株BEL-7402/5-FU中，MALAT1分子可調(diào)控miR-216b，而敲低MALAT1或miR-216b過(guò)表達(dá)均可下調(diào)胞內(nèi)LC3Ⅱ及p62蛋白的表達(dá)，表明MALAT1可通過(guò)自噬促進(jìn)肝癌的化療耐藥[36]。 LncRNA HULC和MALAT1均可通過(guò)上調(diào)p62的表達(dá)促進(jìn)細(xì)胞自噬，增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性?？梢?jiàn)，在lncRNA調(diào)控肝癌耐藥的過(guò)程中，p62起著至關(guān)重要的作用，提示p62是研究lncRNA通過(guò)自噬調(diào)控肝癌耐藥機(jī)制的關(guān)鍵。

4 調(diào)控腫瘤干細(xì)胞的自我更新

腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cell，CSC)是腫瘤中具有自我更新能力并能產(chǎn)生異質(zhì)性腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞。隨機(jī)化理論(認(rèn)為腫瘤細(xì)胞具有同質(zhì)性，僅有少部分腫瘤細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞分化周期)和分層理論(認(rèn)為腫瘤細(xì)胞具有功能異質(zhì)性，僅有限數(shù)目的腫瘤細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞分化周期)均認(rèn)為腫瘤組織中存在少量干細(xì)胞樣的癌細(xì)胞亞群，該亞群具有自我更新、增殖及分化能力，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移中起著重要作用。這些細(xì)胞不僅可能逃逸抗腫瘤藥物，且新生腫瘤可能具有耐藥性。多種lncRNAs可通過(guò)多種信號(hào)通路介導(dǎo)肝癌干細(xì)胞(liver cancer stem cells，LCSCs)和腫瘤初始細(xì)胞(tumor initiating cell，TIC)的自我更新。因此，探究lncRNAs在LCSCs和TIC中的作用是研究lncRNAs、LCSCs的自我更新及肝癌細(xì)胞耐藥三者間具體作用機(jī)制的前提。

4.1 參與Wnt信號(hào)通路的調(diào)節(jié) Wnt信號(hào)通路是存在于腫瘤干細(xì)胞中的重要分子信號(hào)傳導(dǎo)通路，與腫瘤的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)及耐藥密切相關(guān)[37]。LincRNA 00210、TCF7、FZD6、β-Catm和THOR等可通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路調(diào)控LCSCs和TIC的自我更新。LincRNA 00210可與CTNNBIP1結(jié)合，抑制CTNNBIP1的表達(dá)，從而抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路，增強(qiáng)肝癌TIC細(xì)胞的自我更新能力[38]。LincRNA TCF7和FZD6均可將SWI/SNF復(fù)合物招募到相應(yīng)受體(TCF7、FZD6)的啟動(dòng)子并調(diào)控其表達(dá)，從而激活Wnt信號(hào)，增強(qiáng)LCSCs或TIC的自我更新能力[39-40]。 LincRNA β-Catm可與β-catenin和EZH2結(jié)合，促進(jìn)β-catenin甲基化，甲基化可抑制β-catenin泛素化并增強(qiáng)其穩(wěn)定性，激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路，增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力[41]。LincRNA THOR可通過(guò)靶向β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)，激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路，增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力[42]?？梢?jiàn)，多種lncRNAs可通過(guò)Wnt/β-catenin信號(hào)通路增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力。LCSCs的自我更新能力越強(qiáng)，其逃逸化療藥物的可能性越大，且獲得性耐藥的概率越高。綜上，通過(guò)調(diào)控lncRNAs可調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號(hào)通路，抑制LCSCs及TIC的自我更新能力，增強(qiáng)肝癌的化療敏感性。

4.2 參與STAT3信號(hào)通路的調(diào)節(jié) 信號(hào)傳導(dǎo)與活化轉(zhuǎn)錄因子3(signal transducers and activators of transcription 3，STAT3)是信號(hào)傳導(dǎo)活化轉(zhuǎn)錄因子家族的重要成員，在細(xì)胞中起傳遞信號(hào)和啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的作用。在LCSCs中，lncRNA DLX6-AS1的下調(diào)可增強(qiáng)Cadm1的表達(dá)，抑制STAT3信號(hào)通路和Cadm1啟動(dòng)子甲基化，從而抑制LCSCs的自我更新能力[43]。LncRNA Sox4與STAT3作用，可將后者招募至Sox4啟動(dòng)子并啟動(dòng)Sox4的表達(dá)；lncRNA Zic2可招募BRG1至MARCKS和MARCKSL1啟動(dòng)子并促進(jìn)其表達(dá)，從而增強(qiáng)肝癌TIC的自我更新能力[44-45]。在順鉑耐藥LCSCs中，過(guò)表達(dá)的lncRNA DILC可與IL-6啟動(dòng)子結(jié)合而抑制IL-6的表達(dá)；敲低lncRNA DILC可激活I(lǐng)L6/STAT3信號(hào)通路，增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力[46]。LncRNA ARSR可通過(guò)STAT3通路促進(jìn)LCSCs的自我更新，而抑制lncRNA ARSR的表達(dá)可在一定程度上增強(qiáng)肝癌細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性[47]，提示STAT3是逆轉(zhuǎn)肝癌耐藥的一個(gè)靶點(diǎn)，LCSCs的自我更新能力受到STAT3狀態(tài)的調(diào)控。綜上，lncRNAs參與STAT3信號(hào)通路的調(diào)節(jié)，調(diào)控lncRNAs可調(diào)節(jié)STAT3信號(hào)通路，抑制LCSCs的自我更新能力，從而逆轉(zhuǎn)肝癌的化療耐藥。

4.3 參與BMP與YAP信號(hào)通路的調(diào)節(jié) BMP信號(hào)通路在維持腫瘤干細(xì)胞特性方面起重要作用，是腫瘤發(fā)生可能的分子機(jī)制。LncRNA HAND2-AS1能招募INO80染色質(zhì)重塑復(fù)合物至BMPR1A啟動(dòng)子并誘導(dǎo)其表達(dá)，激活BMP信號(hào)，增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力[48]。YAP信號(hào)通路的激活可增強(qiáng)干細(xì)胞的自我更新能力。研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA ARSR表達(dá)上調(diào)可通過(guò)調(diào)節(jié)PTEN-PI3K/Akt信號(hào)通路，促進(jìn)肝癌細(xì)胞對(duì)阿霉素的耐藥性，增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力[49]。lncRNA BRM在LCSCs和肝癌細(xì)胞中高度表達(dá)，且LCSCs的自我更新和肝癌的發(fā)生均需要lncRNA BRM。研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA BRM可與BRM結(jié)合，啟動(dòng)BRG1/BRM開(kāi)關(guān)，BRG1嵌入的BAF復(fù)合物可激活YAP1信號(hào)[50-51]。可見(jiàn)，BMP與YAP信號(hào)激活均會(huì)增強(qiáng)LCSCs的自我更新能力。綜上，調(diào)控lncRNA可調(diào)節(jié)BMP和YAP信號(hào)，抑制LCSCs的自我更新能力，減弱其逃逸藥物的可能性及新生腫瘤的強(qiáng)耐藥性，逆轉(zhuǎn)肝癌的化療耐藥。

5 總結(jié)與展望

LncRNA曾被視為無(wú)生物學(xué)功能的“噪音序列”而被長(zhǎng)期忽視，到如今被證實(shí)為具有復(fù)雜機(jī)制的多生物學(xué)功能的新分子，參與了蛋白識(shí)別、催化、代謝、胚胎干細(xì)胞分化[52]、細(xì)胞周期調(diào)控及腫瘤發(fā)生等多種生理或病理過(guò)程。雖然越來(lái)越多的lncRNAs在肝癌化療耐藥研究中被發(fā)現(xiàn)，但其結(jié)構(gòu)及參與肝癌耐藥的機(jī)制尚未明確。目前的研究多應(yīng)用體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞株探討lncRNAs參與肝癌耐藥的機(jī)制，如H19參與HepG2、Plc/Prf5、Huh7細(xì)胞耐藥性的相關(guān)研究[53]，KCNQ1OT1和FOXD2-AS1參與HepG2、HUH7細(xì)胞耐藥性的相關(guān)研究[54-55]等，但尚缺乏臨床研究。隨著lncRNAs參與肝癌化療耐藥研究的不斷深入及科研水平的提升，lncRNAs將成為攻克肝癌化療耐藥的新方向。