寧都黃雞生化指標(biāo)與體重的相關(guān)性研究

馬家玉　羅雯　艾佐佐　李麗群　林麗珍

摘要 [目的]以寧都黃雞為試驗(yàn)對(duì)象，分析寧都黃雞血清營養(yǎng)物質(zhì)含量和血清免疫活性物質(zhì)及盲腸消化酶活性與體重的相關(guān)性。[方法]選取健康狀態(tài)良好的雄性寧都黃雞150羽，散養(yǎng)條件下飼養(yǎng)至72日齡，按照體重由高到低分為較重組、中等組和較輕組。每組隨機(jī)抽取樣本10只，當(dāng)日屠宰取血、靜置并離心取血清，解剖后無菌取盲腸段內(nèi)容物，以上樣品置于-70 ℃冰箱中保存。血清總蛋白含量采用雙縮脲常規(guī)法檢測;血清白蛋白含量采用溴甲酚綠法檢測;血清葡萄糖含量采用鄰甲苯胺法檢測，血清總膽固醇和甘油三酯含量采用GPO-PAP法測定;血清超氧化物歧化酶活性采用羥胺法測定;過氧化氫酶活性采用鉬酸銨法測定;血清谷胱甘肽過氧化物酶和盲腸脂肪酶、胰蛋白酶活性均采用比色法測定;盲腸α淀粉酶活性采用淀粉-碘顯色法測定。[結(jié)果]各體重組甘油三酯含量以及過氧化氫酶、總超氧化物歧化酶、胰蛋白酶和α淀粉酶活性均無顯著差異，各生化指標(biāo)與體重?zé)o相關(guān)性;各體重組總膽固醇含量和脂肪酶活性無顯著差異，但與體重分別呈極顯著正相關(guān)（P<0.01）和顯著負(fù)相關(guān)（P<0.05）;各體重組谷胱甘肽過氧化物酶活性存在極顯著差異（P<0.01），且與體重呈極顯著負(fù)相關(guān)。[結(jié)論]該研究結(jié)果對(duì)寧都黃雞飼料中營養(yǎng)的合理配比及外源性消化酶的適時(shí)添加具有一定的指導(dǎo)作用。

關(guān)鍵詞 寧都黃雞;體重;免疫活性物質(zhì);消化酶;相關(guān)性

中圖分類號(hào) S831.8+9;S831.4文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611（2020）11-0116-03

Abstract [Objective] Ningdu Huang chicken were selected as experimental objects to analyze the correlation between serum nutrient content， immunologically active substances， cecal digestive enzyme activity and body weight of Ningdu Huang chicken. [Method] 150 male Ningdu Huang chicken in good health were raised to the age of 72 dayold under freerange conditions. According to the difference in body weight， they were divided into three groups from the highest to the lowest： the heavy group， the medium group and the light group. 10 samples were randomly selected from each group， respectively. On the day of slaughter， blood samples were taken and the serum was isolated after standing and centrifugation. After dissecting， the contents of cecum segment were extracted and stored in refrigerator at -70 ℃. Subsequently， the total serum protein content was detected by biuret method. The serum albumin content was detected by bromocresol green method. Serum glucose content was determined by otoluidine method. Serum total cholesterol and triglyceride content were determined by GPOPAP method. Serum superoxide dismutase activity was determined by hydroxylamine method. Serum catalase activity was determined by ammonium molybdate method. The activities of serum glutathione peroxidase， caecal lipase and trypsin were determined by colorimetry. The activity of αamylase in cecum was determined by iodinestarch colorimetry.[Result]There was no significant difference in the content of triglyceride and the activities of catalase， total superoxide dismutase， trypsin and αamylase in each body weight group， while there was no correlation between these biochemical index values and the body weight either. There was no significant difference between total cholesterol content and lipase activity in each body weight group， but there was extremely significant positive correlation （P<0.01） or significant negative correlation （P<0.05） with body weight， respectively. The activity of glutathione peroxidase was significantly different （P<0.01） in each group and negatively correlated with body weight. [Conclusion] The results of this study had a certain guiding effect on the reasonable proportion of nutrient ingredients and the timely addition of exogenous digestive enzymes in the feed of Ningdu Huang chicken .

Key words Ningdu Huang chicken;Body weight;Immunoactive substance;Digestive enzymes;Correlation

寧都黃雞原名為“寧都三黃雞”，其肉質(zhì)鮮美，暢銷于沿海地區(qū)，是重要的地方家禽養(yǎng)殖品種，也是我國小型優(yōu)質(zhì)肉雞的地方品種資源[1-2]。Ekunseitan 等[3]研究平菇對(duì)肉仔雞胴體、血清代謝物和肌肉脂蛋白含量的影響，結(jié)果表明血液生化指標(biāo)在一定程度上反映了營養(yǎng)價(jià)值水平。因此，研究血清中營養(yǎng)物質(zhì)和免疫活性物質(zhì)與肉雞體重是否具有相關(guān)性，可以為肉雞生產(chǎn)性能評(píng)價(jià)提供新的檢測指標(biāo)。同時(shí)，禽類生長速度與機(jī)體消化吸收能力密切相關(guān)，不同家禽品種的消化酶分泌不同，且消化酶在消化道不同部位的活性也存在差異[4]。雖然盲腸的吸收能力有限，但尚未被吸收的營養(yǎng)物質(zhì)將隨糞便排出體外，在散養(yǎng)方式飼喂時(shí)雞通過攝食糞便就可以利用這些營養(yǎng)物質(zhì)[5]。因此，針對(duì)盲腸這一腸道微生物菌群的主要寄居場所，對(duì)不同體重組雞群盲腸的消化酶活性進(jìn)行了檢測。筆者以散養(yǎng)寧都黃雞為研究對(duì)象，測定了寧都黃雞血清營養(yǎng)物質(zhì)含量和免疫活性物質(zhì)以及盲腸消化酶活性，旨在為合理補(bǔ)充酶制劑或調(diào)節(jié)飼料成分提供參考依據(jù)，從而豐富寧都黃雞生產(chǎn)和科研的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)，促進(jìn)寧都黃雞養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及其分組

選取同一批次1日齡雄性寧都黃雛雞150羽（由江西省地方雞種遺傳改良重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供），育雛籠中飼養(yǎng)至30日齡后，平地散養(yǎng)，直至70日齡。按照體重由高到低分為較重組、中等組、較輕組3組（表1），每組隨機(jī)抽取10只肉雞，當(dāng)天屠宰取血、靜置并離心取血清，解剖后無菌取盲腸段內(nèi)容物，以上樣品置于-70 ℃冰箱中保存用于后續(xù)試驗(yàn)。

1.2 血清生化指標(biāo)檢測

總蛋白（TP）含量采用雙縮脲常規(guī)法檢測;血清葡萄糖含量采用鄰甲苯胺法檢測;血清白蛋白（ALB）含量采用溴甲酚綠法檢測;血清總膽固醇（TC）含量測定試劑盒（單試劑GPO-PAP法）、甘油三酯（TG）含量測定試劑盒（單試劑GPO-PAP法）（分光光度計(jì)）、總超氧化物歧化酶（T-SOD）測試盒（羥胺法）、過氧化氫酶（CAT）測定試劑盒（可見光法也稱鉬酸銨法）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）測定試劑盒（比色法）、脂肪酶（LPS）測定試劑盒（比色法）、α-淀粉酶（AMS）測試盒（淀粉-碘比色法）、胰蛋白酶測定試劑盒（紫外比色法）均購自南京建成生物工程研究所。

1.3 儀器與設(shè)備

紫外可見分光光度計(jì)UV-1200 型，購自上海美譜達(dá)儀器有限公司;JJ224BC型電子天平，購自長熟市雙杰測試儀器廠;旋渦混合器，購自江蘇海門市麒麟醫(yī)用儀器廠;HH-4 恒溫水浴鍋，購自國華生物電器有限公司。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用 Excel 和 OriginPro 8.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，使用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素（ANOVA）方差分析和雙變量相關(guān)分析（Pearson correlation）。

2 結(jié)果與分析

由表2可知，在散養(yǎng)條件下各體重組寧都黃雞血清GSH-Px活性存在極顯著差異（P<0.01），LPS活性存在顯著差異（P<0.05），而其余生化指標(biāo)均無顯著差異（P>0.05）。

由表2可知，寧都黃雞血清TC含量與體重呈極顯著正相關(guān)（P<0.01），且TC含量隨著體重的增加有所升高;血清GSH-Px活性與體重呈極顯著負(fù)相關(guān)（P<0.01），且GSH-Px活性隨著體重的增加逐漸降低;盲腸LPS活性與體重呈顯著負(fù)相關(guān)（P<0.05）;其余生化指標(biāo)與體重均無相關(guān)性。

3 討論

家禽品種攜帶獨(dú)特的遺傳信息，在肉質(zhì)風(fēng)味影響因素中具有支配地位[6]。寧都黃雞具有肌肉纖維細(xì)、雞肉品質(zhì)細(xì)嫩等特點(diǎn)。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，草地放養(yǎng)方式有助于改善家禽的生產(chǎn)性能，使肉質(zhì)更加優(yōu)良[7]。該試驗(yàn)結(jié)果表明，各體重組寧都黃雞血清ALB、TP含量均無顯著差異且與體重?zé)o相關(guān)性;葡萄糖含量存在顯著差異，但與體重?zé)o相關(guān)性，由此可見以上3項(xiàng)血清生化指標(biāo)都不能直接反映肉雞的生長狀況。該研究還發(fā)現(xiàn)，雖然血清TG含量無顯著差異且與體重?zé)o相關(guān)性，但TC含量與體重呈現(xiàn)出極顯著正相關(guān)，但各體重組TC含量沒有顯著差異。脂質(zhì)來源主要由2部分組成。①內(nèi)源性：脂肪沉積情況與機(jī)體內(nèi)TG水平密切相關(guān)。②外源性：食物中攝取的脂肪在腸道中，在膽汁酸、LPS的雙重作用下被腸黏膜吸收[8]。70日齡體重較輕組寧都黃公雞脂質(zhì)含量較低，可能與散養(yǎng)條件下該組肉雞隨機(jī)采食量偏小、外源攝入不足有關(guān)。此次檢測結(jié)果表明，血清TC含量在一定程度上反映肉雞的生長狀況，基于膽固醇在合成激素、提高免疫力等方面的重要功能，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理以促進(jìn)采食。

血清中SOD、CAT和GSH-Px均是重要的抗氧化酶，在清除氧自由基、催化H2O2分解和使有毒的過氧化物還原成無毒的羥基化合物等方面發(fā)揮著重要作用。此次檢測結(jié)果表明，寧都黃雞不同體重組血清T-SOD、CAT含量均無顯著差異且與體重?zé)o相關(guān)性，但不同體重組GSH-Px活性有極顯著差異，且血清GSH-Px活性與體重呈極顯著負(fù)相關(guān)。當(dāng)外源污染物進(jìn)入生物體內(nèi)產(chǎn)生大量活性氧自由基時(shí)，會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化，損害機(jī)體健康。還原型谷胱甘肽在抗氧化系統(tǒng)清除氧自由基和維持細(xì)胞氧化還原平衡方面發(fā)揮著重要作用，其含量變化可以直接反映機(jī)體抗氧化能力[9]。此次檢測結(jié)果表明，隨著體重的增加，血清GSH-Px活性減小，抗氧化能力呈現(xiàn)減弱趨勢，試驗(yàn)結(jié)果具有參考性。其原因可能是散養(yǎng)條件下寧都黃雞容易接觸到多種外源污染物，尤其是體重高、體型大的雞群野外活動(dòng)范圍更廣泛，具有更大的污染物接觸空間，說明在寧都黃雞飼養(yǎng)中為保障機(jī)體健康必須注意環(huán)境衛(wèi)生，防治污染。同時(shí)，由于硒是GSH-Px的活性中心，低硒狀態(tài)可以降低機(jī)體抗氧化能力。因此，在寧都黃雞飼料中可以合理添加硒，以保障機(jī)體的抗氧化酶活性。

大量研究[10-12]表明，相同飼養(yǎng)條件下體重顯著差異的肉雞腸道菌群有著明顯變化。由于發(fā)酵主要發(fā)生在微生物密集的盲腸，而腸道內(nèi)容物中未被吸收的營養(yǎng)物質(zhì)隨糞便排出體外，在散養(yǎng)雞群中可通過采食被再次攝取利用[5]。該研究從3類主要營養(yǎng)物質(zhì)分解代謝相關(guān)消化酶的角度，分析了盲腸消化酶活性與體重的相關(guān)性。該研究結(jié)果表明，盲腸中三類消化酶活性在各體重組差異不顯著，且胰蛋白酶和AMS活性與體重不存在顯著相關(guān)性。此次檢測中僅盲腸段LPS活性與體重呈顯著負(fù)相關(guān)，據(jù)此推測體重較輕組雞群的脂代謝能力相對(duì)較強(qiáng)，但肉雞體重增加緩慢的原因還需要更深入的研究。

4 結(jié)論

70日齡散養(yǎng)寧都黃雞血清TP、ALB、葡萄糖、TG等營養(yǎng)物質(zhì)的含量與體重變化無顯著相關(guān)性，以上各項(xiàng)血清生化指標(biāo)不能直接反映寧都黃雞的生長狀況。

寧都黃雞不同體重組血清GSH-Px活性有極顯著差異，且與體重呈極顯著負(fù)相關(guān)。根據(jù)寧都黃雞體重的變化，在飼養(yǎng)過程中添加可以提高GSH-Px活性的添加劑，可以改善肉雞的生長性能。

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