黑龍江江鱈人工繁殖試驗(yàn)研究

宛洪權(quán) 張國(guó)軍 于信勇

摘 要：研究所用的江鱈（Lota lota）親魚(yú)為野生捕獲，對(duì)其進(jìn)行人工繁殖試驗(yàn)，結(jié)果表明，通過(guò)低溫刺激，不經(jīng)激素催產(chǎn)，親魚(yú)可自然產(chǎn)卵和排精，同批捕獲50尾親魚(yú)產(chǎn)卵持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)達(dá)10d，有34尾江鱈產(chǎn)卵，獲受精卵707萬(wàn)粒，孵出魚(yú)苗 630 萬(wàn)尾，其產(chǎn)卵率、受精率、孵化率分別為68%、66%、85%，在水溫為1.0-1.4℃時(shí)，受精卵經(jīng)歷1488hrs.出膜，所需積溫77.5℃·d。成熟系數(shù)雌魚(yú)平均為25.6%，雄魚(yú)平均為15.4%，相對(duì)懷卵量為37.5萬(wàn)粒/kg。

關(guān)鍵詞：江鱈;人工繁殖;孵化

江鱈（Lota lota）屬鱈形目（Gadiformes）、鱈科（Gacloidei）、江鱈屬（Lota），地方名山鯰魚(yú)、花鯰魚(yú)，江鱈為鱈科魚(yú)類中唯一的淡水棲息種，為典型冷水魚(yú)類，棲息江河或通江河的湖泊水域深層，喜生活于水質(zhì)清澈，底質(zhì)為沙礫、最高水溫不超過(guò)23℃水域，夏季多在山溪棲息。分布于北緯45℃的河、湖中，在我國(guó)主要分布在東北的黑龍江、松花江、鴨綠江及和新疆的額爾齊斯河水域（張覺(jué)民，1995;謝玉浩，2007）。近年來(lái)有關(guān)人員對(duì)江鱈生物學(xué)（楊樹(shù)勛，1989;楊麗狀，2002;孟令博，2004）、人工繁殖（錢(qián)龍，2008;殷建國(guó)，2008;李育東，2014;韓驥，2017）、胚胎發(fā)育（高小田，2011;張永泉，2013）、胚后及仔魚(yú)幼魚(yú)發(fā)育（肖國(guó)華，2011）等都做了相關(guān)報(bào)道。人工繁殖多是將10-12月份收到的生殖洄游親魚(yú)經(jīng)人工進(jìn)行短暫的培育，再予以進(jìn)行。2019年末及2020年初，我們對(duì)生殖洄游中后期的江鱈，未經(jīng)培育和人工催產(chǎn)，只經(jīng)低溫刺激進(jìn)行了人工繁殖試驗(yàn)，現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下：

1 材料和方法

1.1親魚(yú)來(lái)源

2019年12月16日到18日，在黑龍江撫遠(yuǎn)江段捕獲的生殖洄游的江鱈中，選取體表無(wú)傷，身體健壯的成熟個(gè)體作為試驗(yàn)用魚(yú)，雌魚(yú)規(guī)格為500～2500g，平均960g，雄魚(yú)規(guī)格150～1500g，平均500g，共收集親魚(yú)500kg，于12月19日運(yùn)到牡丹江東京城渤海冷水魚(yú)發(fā)展有限公司繁育基地，放于直徑2m，注水深度30cm的玻璃鋼盆中暫養(yǎng)，每缸放魚(yú)在100尾以內(nèi)，雌雄混養(yǎng)，同時(shí)給以流水刺激。

1.2 試驗(yàn)地點(diǎn)及條件

牡丹江東京城渤海冷水魚(yú)發(fā)展有限公司繁育基地，繁育車間為鋼筋骨架的塑料薄膜大棚，棚外有3層蓋高密度遮陽(yáng)網(wǎng)遮光，棚內(nèi)無(wú)陽(yáng)光直射，處于弱光狀態(tài);棚內(nèi)有直徑2m高50cm的玻璃鋼盆30個(gè)，用于孵化漂浮性卵的孵化缸4個(gè)，直徑2m，高0.7m;水源為地下泉水，水質(zhì)清潔，無(wú)污染，溶解氧10mg/L以上;水溫，夜間1.0℃～1.1℃，白天1.2℃～1.4℃， 整個(gè)孵化期間水溫幅度在1.0℃～1.4℃。親魚(yú)進(jìn)入車間后每天早晚定時(shí)測(cè)定水溫、溶氧，觀察水體交換、親魚(yú)活動(dòng)情況，做好相關(guān)記錄。

1.3 親魚(yú)分組與檢查

2019年12月20日，在暫養(yǎng)的親魚(yú)中選擇雌魚(yú)50尾，平均體重960g/尾，放在5個(gè)玻璃鋼盆中，能擠出精液的雄魚(yú)80尾，平均體重500g/尾，分放在4個(gè)玻璃鋼盆中，親魚(yú)分組后，進(jìn)行流水刺激，每3d檢查一次雌魚(yú)成熟情況，方法為用手沿著雌魚(yú)卵巢向泄殖孔方向輕輕擠壓，觀察是否有卵粒流出。在第一尾雌魚(yú)檢查出有卵粒游離后，每天檢查一次，查看雌魚(yú)排卵情況，對(duì)于排卵的雌魚(yú)及時(shí)進(jìn)行人工采卵授精。雄魚(yú)可重復(fù)使用。在進(jìn)行親魚(yú)試驗(yàn)分組前，選擇雌雄親魚(yú)數(shù)尾進(jìn)行解剖測(cè)量，測(cè)量魚(yú)的體重和性腺重量，進(jìn)行成熟系數(shù)統(tǒng)計(jì)（張覺(jué)民，1991）。

1.4 采卵和人工授精

江鱈雌魚(yú)的成熟度個(gè)體差異很大，不能同時(shí)排卵，同批洄游的雌魚(yú)排卵延續(xù)時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)一周以上，因此每次檢查時(shí)，要把已經(jīng)排卵，能進(jìn)行采卵的雌魚(yú)集中到一起，放到一個(gè)玻璃鋼內(nèi)，進(jìn)行批量操作。采卵用擠壓法，人工授精采用干法授精，先把3尾～5尾雌魚(yú)的卵子擠在一個(gè)干凈的塑料盆內(nèi)，然后把2尾～3尾雄魚(yú)精液擠到卵上，用干凈羽毛攪拌1分鐘左右，使精卵充分接觸，慢慢加一點(diǎn)清水，繼續(xù)攪拌1mins.，靜止1mins.～2mins.使卵受精，用清水漂洗2次～3次，洗去殘余精液和污物，加入備好的黃泥漿脫粘3min～5min，將泥漿連同受精卵一起用網(wǎng)箱過(guò)濾，洗去多余泥漿，篩出魚(yú)卵，放于孵化器中進(jìn)行流水孵化。

2 結(jié)果

我們對(duì)4尾雌魚(yú)和4尾雄魚(yú)進(jìn)行了性腺和體重測(cè)量，測(cè)量結(jié)果如表1。本次試驗(yàn)共選雌魚(yú)50尾，平均體重960g，雄魚(yú)80尾，平均體重500g，在水溫為1.0℃～1.4℃的條件下，從12月20日試驗(yàn)開(kāi)始，到12月27日經(jīng)7天流水刺激，開(kāi)始有雌魚(yú)排卵，到1月6日取卵結(jié)束，產(chǎn)卵持續(xù)時(shí)間歷時(shí)10d，產(chǎn)雌魚(yú)34尾，采卵807萬(wàn)粒，產(chǎn)卵情況如表2;孵化用孵化缸流水孵化，平均水溫1.25℃，受精卵從2019年12月27日開(kāi)始到孵化到2020年2月27日開(kāi)始破膜孵出仔魚(yú)，歷時(shí)62d，孵化積溫77.5℃·d，具體孵化情況如表3。

3 小結(jié)和討論

3.1水溫和江鱈產(chǎn)卵的關(guān)系

溫度與魚(yú)類排卵、產(chǎn)卵有密切關(guān)系，即使魚(yú)的性腺發(fā)育成熟，但溫度達(dá)不到產(chǎn)卵或排卵閾值也不能完成生殖活動(dòng)。每種魚(yú)開(kāi)始在某一地區(qū)的產(chǎn)卵溫度是一定的，產(chǎn)卵溫度的到來(lái)，是產(chǎn)卵行為的有利信號(hào)（麥賢杰等，2005）。江鱈是典型的冷水性魚(yú)類，需很低的水溫環(huán)境下進(jìn)行繁殖，冬季在冰封前后溯入江河，進(jìn)行生殖洄游，產(chǎn)卵期多在12月和次年2月，產(chǎn)卵水溫接近0℃～0.2℃（張覺(jué)民，1995）。對(duì)于冷水魚(yú)類，低溫刺激是其產(chǎn)卵的必要條件，水溫低時(shí)，產(chǎn)卵期就提前。2018年我們對(duì)12月末捕獲的黑龍江江鱈曾經(jīng)進(jìn)行過(guò)避光暫養(yǎng)試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)在5-8度下暫養(yǎng)數(shù)天的雌魚(yú)未見(jiàn)產(chǎn)卵，在其它條件相同的情況下，一旦當(dāng)水溫降到3度以下，經(jīng)2d～3d就有雌魚(yú)排卵，而那些未降溫的親魚(yú)，仍然不見(jiàn)產(chǎn)卵，說(shuō)明低溫對(duì)江鱈的產(chǎn)卵有明顯的刺激作用。本試驗(yàn)中，我們12月16日到12月18捕獲的親魚(yú)，運(yùn)輸?shù)皆囼?yàn)地點(diǎn)，將親魚(yú)分組后，直接放入水溫為1.0℃～1.4℃玻璃鋼盆中，在弱光條件下進(jìn)行流水刺激，50尾雌魚(yú)，未經(jīng)人工催產(chǎn)，12月27日開(kāi)始產(chǎn)卵，到1月6日結(jié)束，有34尾產(chǎn)卵，說(shuō)明成熟江鱈給以足夠長(zhǎng)時(shí)間的低溫刺激，不需催產(chǎn)，可以自產(chǎn)。本試驗(yàn)也說(shuō)明江鱈自然產(chǎn)卵開(kāi)始于每年的12月末，持續(xù)到第二年1月份以后。

3.2 成熟情況和雌雄外觀區(qū)別

江鱈人繁試驗(yàn)結(jié)果表明，親魚(yú)產(chǎn)卵不集中、產(chǎn)卵率不高、受精率不穩(wěn)定。與錢(qián)龍（2008）和李育東（2014）所作江鱈人工繁殖試驗(yàn)結(jié)果接近，分析原因是：同批洄游的親魚(yú)的成熟度個(gè)體差別很大，無(wú)論是否進(jìn)行人工催產(chǎn)，親魚(yú)產(chǎn)卵都不會(huì)同步，導(dǎo)致產(chǎn)卵持續(xù)時(shí)間很長(zhǎng)。當(dāng)有親魚(yú)見(jiàn)卵以后，每天都要檢查親魚(yú)成熟情況，因魚(yú)體黏滑，操作不便，頻繁的檢查操作、強(qiáng)烈的應(yīng)激反應(yīng)，使部分成熟度不佳的魚(yú)體不同程度受傷，最后導(dǎo)致卵質(zhì)下降，甚至難產(chǎn)。最后的結(jié)果是使整體產(chǎn)卵率及受精率下降，這是產(chǎn)卵率和受精率不高的主要原因。另外，取卵火候掌握不準(zhǔn)，使親魚(yú)體中未游離的卵粒和游離的卵粒一同被擠出體外，導(dǎo)致受精率降低。因此準(zhǔn)確把握取卵時(shí)機(jī)非常重要。只有準(zhǔn)確掌握排卵時(shí)間，適時(shí)采卵，才能得到優(yōu)質(zhì)卵粒，從而使受精率得以提高。以輕壓腹部卵粒順利成股流出作為取卵標(biāo)準(zhǔn)，難以順利擠出卵粒的雌魚(yú)先放到池中，待下次進(jìn)行檢查再予以判定是否可以取卵。為便于檢查，減少親魚(yú)受傷，可在檢查前用200mg/L的MS-222對(duì)親魚(yú)進(jìn)行麻醉（李育東，2014）。

3.3 生殖期江鱈親魚(yú)成熟度與操作方法

生殖期是雌雄親魚(yú)性腺發(fā)育最好的時(shí)期， 成熟系數(shù)是衡量性腺發(fā)育的指標(biāo)之一，成熟系數(shù)越高，表明性腺發(fā)育越好，在其系數(shù)最大時(shí)，則為其繁殖的高峰期（麥賢杰等，2005）。本次繁殖試驗(yàn)的親魚(yú)，捕獲于江鱈生殖洄游的高峰時(shí)期，雌魚(yú)的成熟系數(shù)平均為25.6%，最高27.1%，雄魚(yú)平均為15.4%，最高16.7%，說(shuō)明這時(shí)親魚(yú)成熟度很好，條件適合，很快就會(huì)自然產(chǎn)卵。董崇智（2008年）對(duì)呼瑪河江鱈捕撈群體成熟系數(shù)進(jìn)行過(guò)統(tǒng)計(jì)，雌魚(yú)23.52%，雄魚(yú)18.75%，和我們的測(cè)量數(shù)據(jù)比較接近。可見(jiàn)，生殖期雄魚(yú)精巢占體重比較高，可高達(dá)18%，占體腔體積不亞于卵占體腔的體積 ，又因江鱈肝臟肥大，因此生殖期間生殖洄游的親魚(yú)，雌雄外形上很難區(qū)別，除性腺處于Ⅳ末的雌雄親魚(yú)從生殖能擠出卵粒和精液外，而性腺處于第Ⅴ期的雌魚(yú)肛門(mén)有3個(gè)孔、雄魚(yú)有2個(gè)是唯一可以辨認(rèn)的特征（董崇智等，2008）。

3.4 催產(chǎn)和自產(chǎn)結(jié)果比較

對(duì)于在10～12月洄游早期成熟度不夠的額爾齊斯河江鱈和黑龍江江鱈進(jìn)行短期的產(chǎn)前培育，之后進(jìn)行了催產(chǎn)和自產(chǎn)的比較（錢(qián)龍，2008;李育東，2014），除產(chǎn)卵持續(xù)時(shí)間催產(chǎn)組比自產(chǎn)組略短或略集中外，其余在產(chǎn)卵率、受精率、孵化率等方面均未發(fā)現(xiàn)明顯區(qū)別，兩者差別不大，其原因是激素在低溫下作用時(shí)間長(zhǎng)，注射時(shí)水溫在3℃以內(nèi)，效應(yīng)時(shí)間明顯延長(zhǎng)，外加親魚(yú)發(fā)育不同步，成熟度差別很大，結(jié)果使催產(chǎn)和自產(chǎn)結(jié)果區(qū)別不明顯。本試驗(yàn)所用親魚(yú)是生殖洄游盛期捕撈的個(gè)體，未經(jīng)親魚(yú)培育，直接進(jìn)行低溫刺激，也可達(dá)到一樣的產(chǎn)卵效果。說(shuō)明此時(shí)親魚(yú)已經(jīng)成熟，具備了產(chǎn)卵的生理?xiàng)l件，只要?jiǎng)?chuàng)造適宜條件便可產(chǎn)卵，因此，采用野生親魚(yú)進(jìn)行人工繁殖，可在生殖洄游最集中的時(shí)期進(jìn)行親魚(yú)采捕，不會(huì)因收魚(yú)過(guò)早，還要進(jìn)行短期的培育，再進(jìn)行人工繁殖，同樣能達(dá)到規(guī)模生產(chǎn)的效果。但因江鱈集中洄游的時(shí)間較短，一定要時(shí)刻關(guān)注生殖洄游群體捕撈情況，確保及時(shí)選購(gòu)足量的親魚(yú)用于繁殖。

3.5 孵化管理的相關(guān)事項(xiàng)

江鱈受精卵孵化時(shí)間漫長(zhǎng)，在水溫1.2℃時(shí)孵化期長(zhǎng)達(dá)62d（表3），需在無(wú)光或弱光條件下孵化，水溫在1℃時(shí)孵化率最高，畸形率最?。ǜ邥蕴铮?011），整個(gè)孵化期間要保持長(zhǎng)期恒定的低溫和弱光條件，因此，和加強(qiáng)孵化管理，保持孵化環(huán)境穩(wěn)定，是提高發(fā)孵化率的關(guān)鍵。具體孵化過(guò)程中要做到如下事項(xiàng)：①要有完善的遮蔭設(shè)施，確保整個(gè)孵化過(guò)程在無(wú)光或在弱光下進(jìn)行;②確保水溫穩(wěn)定，最高不能高于3℃，最好保持在2℃以內(nèi)，有條件的水溫最好保持在1℃左右。③要確保水質(zhì)要清潔，溶氧充足，孵化水應(yīng)經(jīng)過(guò)濾再進(jìn)入車間;④孵化中要根據(jù)需要，及時(shí)調(diào)節(jié)孵化缸水流速度，經(jīng)常刷洗紗窗或缸罩上粘附的污物，魚(yú)苗出膜時(shí)應(yīng)加強(qiáng)管理，防止卵膜粘附紗窗或缸罩，引起溢水逃苗事故，魚(yú)苗出膜后應(yīng)該加大水流，防止魚(yú)苗下沉，窒息死苗。

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（責(zé)任編輯：常 順）