食品添加劑葡萄糖醇含量的測定方法研究

趙順新

（南京康寧司法鑒定中心，江蘇南京 210000）

葡萄糖醇，又稱山梨糖醇，可由葡萄糖還原而制取，作為保濕劑和界面活性劑應用廣泛。日本最早允許葡萄糖醇作為食品添加劑使用，用于提高食品保濕性，或作為稠化劑使用，或可作甜味劑，制造無糖口香糖。

目前國內(nèi)外研究中多采用高效液相色譜測定葡萄糖醇的含量，本研究以A公司失水葡萄糖醇溶液成品為供試品，采用高效液相色譜法測定其中的葡萄糖醇含量。

1 儀器與試藥

1.1 色譜系統(tǒng)及色譜條件

儀器：高效液相色譜儀；色譜柱：賽分Carbomix （7.8*300mm，10μm）；檢測器：示差（40℃）；流動相：純化水；流速：0.6mL/min；柱溫：55℃；進樣量：20μL；稀釋劑：水；

1.2 樣品信息

一失水葡萄糖醇標準品，Sigma試劑，R0200Y0；葡萄糖醇標準品，Sigma試劑，G145145；失水葡萄糖醇溶液成品，A公司，20190901/20190902/20191001批。

2 物質(zhì)測定方法的建立

系統(tǒng)適用溶液的制備：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇，二失水葡萄糖醇和甘露醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg、二失水葡萄糖醇4mg和甘露醇1mg的溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。

供試品溶液的制備：取失水葡萄糖醇溶液樣品適量，精密稱定，加水溶解并制成每1mL含20mg的溶液，作為供試品溶液。

對照品溶液的制備：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg的溶液，作為對照品溶液。

失水葡萄糖醇溶液含量按以下公式計算：

一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）含量%=Cs*At/As*Ct*100

式中Cs、As分別作為對照品溶液圖譜中一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）的濃度、峰面積。Ct和At分別作為供試品液圖譜中一失水葡萄糖醇（葡萄糖醇）的濃度、峰面積。

限度：按外標法以峰面積計算，一失水葡萄糖醇不得少于15%，葡萄糖醇不得少于25%。

3 結果與討論

3.1 線性范圍

取一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇對照品適量，加水配制成葡萄糖醇濃度20mg/mL和一失水葡萄糖醇濃度8mg/mL的標準品混合溶液。分別取標準品混合溶液適量，加水稀釋至葡萄糖醇濃度分別為20、16、8、4、3.2、1.6mg/mL的溶液，一失水葡萄糖醇濃度分別為8、6.4、3.2、1.6、1.28、0.64mg/mL的溶液作為不同濃度的對照液，分別取20μL注入液相色譜儀，以濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標進行直線回歸，結果表明一失水葡萄糖醇濃度0.64～8mg/mL和葡萄糖醇濃度在1.6～20mg/mL時，峰面積與濃度線性關系良好。

3.2 進樣精密度試驗

對照品準備：取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg的溶液，作為對照品溶液（20191211）。取對照品溶液，連續(xù)進樣6針，對比峰面積的變化，結果表明一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇進樣的相對標準偏差RSD小于2.0%，說明測定數(shù)據(jù)間的波動性小，即本方法精密度試驗符合要求。

3.3 重復性

取批號20191001失水葡萄糖醇溶液樣品適量，精密稱定，加水溶解并制成每1mL含20mg的溶液，作為供試品溶液平行測定6份，實驗結果說明6份供試品測定的含量基本一致，RSD%為0.3%左右，該方法的重復性良好。

3.4 中間精密度試驗

不同儀器測算同一批樣品中一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇含量，考察中間精密度。RSD%均不超過0.3%，實驗結果說明該方法的精密度良好。

3.5 回收率試驗

精密稱取失水葡萄糖醇溶液（20191001）0.32g、0.40g、0.48g各3份，每份稱3次，共稱9份，用純化水定容至20ml。取供試品溶液20μL，注入液相色譜儀，按外標法計算含量，計算RSD%均在0.5%左右。實驗結果表明該方法測定失水葡萄糖醇溶液含量，回收率良好。

3.6 耐用性試驗

取20191001批失水葡萄糖醇溶液樣品適量，加水溶解配制成濃度為20mg/mL的供試品溶液。選用賽分的不同編號的Ca-NP柱，按照測定方法進行測定，實驗結果表明本方法在同一型號不同批號的色譜柱上可以得到重現(xiàn)，有較好的耐用性。

3.7 專屬性和系統(tǒng)適用試驗

3.7.1 系統(tǒng)適用性

取葡萄糖醇、一失水葡萄糖醇，二失水葡萄糖醇和甘露醇適量，加水溶解并稀釋成1mL含葡萄糖醇10mg、一失水葡萄糖醇4mg、二失水葡萄糖醇4mg和甘露醇1mg的溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液。進樣1針，主峰的RSD小于2.0%，三個峰之間的分離度符合要求，實驗結果表明該色譜條件下系統(tǒng)適用。

3.7.2 專屬性

取失水葡萄糖醇溶液供試品適量，加水溶解成20mg/mL的溶液，作為未破壞樣品；取本品400mg，置20mL量瓶中，加適量水使溶解，加入3%雙氧水1mL，25℃放置60min，取出，加水稀釋至刻度，作為氧化破壞樣品；取本品400mg，置20ml量瓶中，加適量水使溶解，加入1mol/L鹽酸1mL，25℃放置60min，取出，加1mol/L氫氧化鈉溶液1mL中和，加水稀釋至刻度，作為酸破壞樣品；取本品400mg，置20mL量瓶中，加適量水使溶解，加入1mol/L氫氧化鈉1mL，25℃放置60min，取出，加入1mol/L鹽酸中和，加水稀釋至刻度，作為堿破壞樣品；取本品置于80℃放置1h，取出，按照供試品配制方法配制，作為高溫破壞樣品；取上述未破壞供試品和破壞供試品20μl，注入液相色譜儀，考察降解雜質(zhì)峰，并計算失水葡萄糖醇溶液含量，實驗結果說明該色譜條件下，無降解雜質(zhì)產(chǎn)生，樣品經(jīng)破壞后與未破壞的含量基本一致，破壞對結果無干擾，本法專屬性良好。

3.8 樣品中含量檢測結果

對樣品進行含量檢測，實驗結果說明三批失水葡萄糖醇溶液的一失水葡萄糖醇和葡萄糖醇含量符合規(guī)定，為合格品（如表1）。

表1 失水葡萄糖醇溶液樣品測定結果

4 結論

通過對供試品中葡萄糖醇的含量進行分析，本文所述分析方法得到多批次檢測結果，數(shù)據(jù)準確可靠。本檢測方法在含量的測定中的專屬性、定量限、適應性、線性、重復性、精密度、回收率等在所用色譜設備上均表現(xiàn)出較好水平。