Sysmex-XN WDF 通道散點(diǎn)圖對急性早幼粒細(xì)胞白血病的價(jià)值

周杰，楊小理，李嬌麗，文婭，張迅

（1.遵義醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，貴州 遵義 563000；2.遵義醫(yī)科大學(xué) 醫(yī)學(xué)與科技學(xué)院，貴州 遵義 563000）

0 引言

白血病是造血組織惡性增生或淋巴結(jié)組織單克隆性增生并累及血液和（或）骨髓為主的高度異質(zhì)性腫瘤，主要表現(xiàn)為貧血、出血、發(fā)熱及髓外浸潤。白血病由于發(fā)現(xiàn)晚，進(jìn)展快，近年在腫瘤排行中呈現(xiàn)逐漸上升。其中急性早幼粒細(xì)胞白血病，進(jìn)展快，出血傾向較明顯，目前臨床治療主要是全反式維甲酸誘導(dǎo)成熟分化，三氧化二砷殺滅，臨床治愈率較高[1-2]。針對急性早幼粒細(xì)胞白血病最有效方式就是盡早發(fā)現(xiàn)，盡早治療，才能夠提升患者生存率。隨著全自動(dòng)五分類血液分析儀的普及檢測血常規(guī)項(xiàng)目的白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖廣泛運(yùn)用，使白血病篩查廣泛開展，通過，對于急性早幼粒細(xì)胞白血病診療具有重要的臨床意義。本研究通過分析骨髓形態(tài)學(xué)及免疫分型確診的急性早幼粒細(xì)胞白血病患者血常規(guī)提供的白細(xì)胞散點(diǎn)信息圖，尋找這些散點(diǎn)圖的特點(diǎn)。

1 資料與方法

1.1 一般資料。收集我院2017 年10 月至2019 年8 月以來47 例通過骨髓形態(tài)學(xué)及免疫分型確診的急性早幼粒細(xì)胞白血病患者，其中男27 人，女20 人；年齡6-75 歲，平均（38.48±18.9）歲，符合急性早幼粒細(xì)胞白血病的發(fā)病特點(diǎn)。依據(jù)白細(xì)胞計(jì)數(shù)進(jìn)行分類分析，將白細(xì)胞計(jì)數(shù)小于4.0×109/L 分為共計(jì)25 人，將白細(xì)胞計(jì)數(shù)介于4-10×109/L 分共計(jì)7 人，將白細(xì)胞計(jì)數(shù)大于10.0×109/L 分15 人。

1.2 儀器與試劑。SysmexXN9000 系列全自動(dòng)血液分析儀和原廠配裝配套（簡稱XN9000）由希森美康公司提供；奧林巴斯CX41 顯微鏡；瑞氏-姬姆薩染色液依據(jù)《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第4 版）的要求進(jìn)行配制；EDTA-K2 真空抗凝管。

1.3 血常規(guī)檢測。采集上述確證患者未經(jīng)過化療后的肘靜脈血2 mL，應(yīng)用sysmex 的XN9000 血細(xì)胞分析儀進(jìn)行血液分析，半小時(shí)內(nèi)完成檢測。利用射頻、電阻抗和細(xì)胞化學(xué)染色法原理進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)及分類，通過Lysercell WDF 中的表面活性劑溶解血小板和紅細(xì)胞，再次通過Lysercell WDF 的熒光染料進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，對核酸級(jí)細(xì)胞器染色。通過白細(xì)胞的熒光強(qiáng)度差異及軟件算法形成白細(xì)胞散點(diǎn)圖。對外周血涂片染色鏡檢，以找到異常早幼粒細(xì)胞后進(jìn)行白細(xì)胞WDF 通道散點(diǎn)圖進(jìn)行分析。

2 散點(diǎn)圖分析

2.1 XN9000 正常白細(xì)胞WDF 通道血細(xì)胞散點(diǎn)圖特征如圖1。橫坐標(biāo)是側(cè)向散射光SCC 反映細(xì)胞內(nèi)顆粒物質(zhì)的大小和多少，縱坐標(biāo)是側(cè)向熒光SFL，反映細(xì)胞內(nèi)核酸含量的多少。依據(jù)細(xì)胞核的大小及細(xì)胞內(nèi)顆粒程度展示的為正常外周血五分類白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖如圖1。注：圖1 中紫色區(qū)域代表淋巴細(xì)胞，依次出現(xiàn)的綠色代表單核細(xì)胞群，淡藍(lán)色代表中性粒細(xì)胞，紅色代表嗜酸性粒細(xì)胞。

圖1 XN9000 正常白細(xì)胞WDF 通道白細(xì)胞散點(diǎn)圖

2.2 白細(xì)胞計(jì)數(shù)大于10.0×109/L 白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖。本群的白細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增加，白細(xì)胞計(jì)數(shù)介于（53.57±45.20）109/L，儀器分類出現(xiàn)大量單核細(xì)胞，粒細(xì)胞區(qū)域和單核細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量異常分布均勻的灰色散點(diǎn)，呈橢圓形（如圖2中的圈中部分所指），粒細(xì)胞區(qū)域明顯上移，至中部最為密集，淋巴細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞所在區(qū)域未出現(xiàn)明顯異常。

圖2 白細(xì)胞計(jì)數(shù)大于10.0×109/L 白細(xì)胞散點(diǎn)圖

2.3 白細(xì)胞計(jì)數(shù)介于4-10×109/L白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖如圖3，本群白細(xì)胞平均為（6.41±1.67）109/L。在幼稚粒細(xì)胞區(qū)域大量出現(xiàn)灰色散點(diǎn)，大量聚集于成熟中性粒細(xì)胞上方，幼稚粒細(xì)胞區(qū)域散點(diǎn)大量聚集，呈灰色散點(diǎn)，部分與單核細(xì)胞區(qū)域有融合（如圖3 中的圈中部分所指）。淋巴細(xì)胞區(qū)域分界明顯。

圖3 白細(xì)胞計(jì)數(shù)介于4-10×109/L 白細(xì)胞散點(diǎn)圖

2.4 白細(xì)胞計(jì)數(shù)小于4.0×109/L 白細(xì)胞分類散點(diǎn)圖如圖4。本群白細(xì)胞平均計(jì)數(shù)（1.59±1.05）109/L。該群的特點(diǎn)是白細(xì)胞計(jì)數(shù)較少，粒細(xì)胞區(qū)域明顯上移，幼稚粒細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量雜亂的散點(diǎn)，部分可見與單核細(xì)胞區(qū)域模糊融合（如圖4 中的圈中部分所指）。成熟粒細(xì)胞區(qū)域可見散在的散點(diǎn)。淋巴細(xì)胞區(qū)域分界明顯。

圖4 白細(xì)胞計(jì)數(shù)小于4.0×109/L 白細(xì)胞散點(diǎn)圖

3 討論

五分類血液分析儀采用WDF 通道對白細(xì)胞進(jìn)行分類，主要是通過大分子有機(jī)酸的特殊溶血?jiǎng)┖途鄞渭谆鶡晒馊玖细鶕?jù)細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度、酸堿特性和核酸熒光強(qiáng)度的差異性分類。通過流式細(xì)胞術(shù)及半導(dǎo)體激光照射將反映細(xì)胞內(nèi)顆粒物質(zhì)的大小和多少的側(cè)向散射光SCC 投射于橫坐標(biāo)，將反映細(xì)胞內(nèi)核酸含量的側(cè)向熒光SFL 投射于縱坐標(biāo)，從而將不同種類的白細(xì)胞細(xì)胞生物特性轉(zhuǎn)化為光學(xué)信號(hào)和電信號(hào)。儀器的數(shù)據(jù)處理軟件將散射光信號(hào)和熒光信號(hào)綜合處理可區(qū)分出淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞，對幼稚細(xì)胞，幼稚粒細(xì)胞及異常淋巴細(xì)胞等具有很好的提示作用[3-4]。分析外周血白細(xì)胞WDF 通道的散點(diǎn)圖，結(jié)合外周血涂片染色鏡檢對初篩診急性早幼粒細(xì)胞白血病的具有重要意義[4]。

通過分析本次收集的初診為急性早幼粒細(xì)胞白血病外周血的WDF 散點(diǎn)圖，發(fā)現(xiàn)在粒細(xì)胞散點(diǎn)圖明顯有大量散在的散點(diǎn)出現(xiàn)，具體體現(xiàn)在幼稚粒細(xì)胞區(qū)域大量出現(xiàn)灰色散點(diǎn)，大量聚集于成熟中性粒細(xì)胞上方，幼稚粒細(xì)胞區(qū)域散點(diǎn)大量聚集，呈灰色散點(diǎn)，部分與單核細(xì)胞區(qū)域有融合。

綜上所述，全自動(dòng)血液分析儀中白細(xì)胞WDF 通道散點(diǎn)圖對白血病的初篩具有一定的價(jià)值。通過觀察儀器對白細(xì)胞WDF 散點(diǎn)圖的差異性結(jié)合涂片鏡檢對檢出白血病初診患者并輔助判斷白血病類型的重要意義[5-9]。檢驗(yàn)人員通過對散點(diǎn)圖分布特征配合必要的手工鏡檢，避免急性早幼粒細(xì)胞白血病患者病理標(biāo)本的漏檢，為臨床診療工作提供準(zhǔn)確可靠的檢測依據(jù)。通過散點(diǎn)圖的初篩過程后進(jìn)行鏡檢復(fù)查，對于確診急性早幼粒細(xì)胞白血病具有重要意義。