不規(guī)則抗體檢測在預(yù)防疑難血型產(chǎn)婦輸血不良反應(yīng)的效果觀察

張照陽，何亞楠

(河南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450000)

不規(guī)則抗體指人體血漿中除抗A、B外其他血型抗體，一般為IgG型，會導(dǎo)致新生兒溶血癥、溶血性輸血等不良反應(yīng)，目前主要采用O型試劑紅細(xì)胞進(jìn)行檢測[1]。根據(jù)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》中規(guī)定在進(jìn)行輸血前應(yīng)進(jìn)行不規(guī)則抗體檢測，孕婦在孕檢時(shí)通常會檢測該項(xiàng)[2]。對產(chǎn)婦而言，不規(guī)則抗體不僅導(dǎo)致新生兒溶血癥，還會影響新生兒臟器、智力發(fā)育，嚴(yán)重影響新生兒健康[3]。目前不規(guī)則抗體檢測方法主要有鹽水法、酶法、抗人體球蛋白法、微柱凝膠法等，各有優(yōu)缺點(diǎn)?；诖?，本文通過在產(chǎn)婦輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，以期在減少疑難血型產(chǎn)婦輸血發(fā)生輸血不良反應(yīng)上作出指導(dǎo)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從2014年2月開始在河南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科產(chǎn)婦輸血前進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，選擇2014年2月～2018年5月需輸血治療500名產(chǎn)婦作為觀察組，2010年2月～2014年2月需輸血治療530名產(chǎn)婦作為對照組。對照組年齡24～30歲，平均(26.17±1.63)歲；觀察組年齡23～31歲，平均(27.25±1.48)歲。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

納入標(biāo)準(zhǔn)：產(chǎn)婦為疑難血型，有過妊娠史及輸血史；產(chǎn)婦及家屬知情并簽署知情同意書；醫(yī)院倫理委員會同意本研究；排除標(biāo)準(zhǔn)：胎膜早破、前置胎盤等妊娠并發(fā)癥者；心腦血管疾病；糖尿?。恢匾K器嚴(yán)重功能障礙者；精神疾病患者；高血壓患者。

1.2 方法

在輸血前給予所有孕婦注射地塞米松(成都天臺山制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H51020514)5 mg防止產(chǎn)生輸血不良反應(yīng)，篩選紅細(xì)胞由濟(jì)南萬德廣聯(lián)醫(yī)療公司提供，抗體篩查細(xì)胞懸液由上海血液生物公司提供，微柱凝膠檢測卡由長春博迅生物公司提供。

1.2.1 不規(guī)則抗體篩查 觀察組采用微柱凝膠法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，產(chǎn)婦取靜脈血在37℃水域保溫10 min后離心并分離血清，將紅細(xì)胞配成懸液。在微柱凝膠抗人球蛋白卡上進(jìn)行標(biāo)記1、2、3號，分別加入抗體篩查細(xì)胞懸液及產(chǎn)婦血清，在37℃溫度下孵育15 min并離心觀察結(jié)果。若觀察到凝膠卡中上段出現(xiàn)紅細(xì)胞聚集表明產(chǎn)婦為陽性，若紅細(xì)胞沉積在凝膠卡底部表明產(chǎn)婦為陰性。

1.2.2 不規(guī)則抗體特異性鑒定 在微柱凝膠抗人球蛋白卡中分別加入產(chǎn)婦血清與抗體鑒定譜細(xì)胞、產(chǎn)婦血清與自身細(xì)胞，在37℃下孵育15 min并離心觀察結(jié)果，若產(chǎn)婦血清與鑒定譜細(xì)胞凝集而不與自身細(xì)胞凝集表明為特異性抗體，若反之則為非特異性抗體。

1.2.3 Ig類型檢測 分別將產(chǎn)婦血清與2-Me加入試管，室溫靜置40 min后稀釋，分別在微柱凝膠抗人球蛋白卡中加入產(chǎn)婦血清溶液及相應(yīng)血型抗原紅細(xì)胞在37℃下反應(yīng)，30 min后觀察結(jié)果，若抗體效價(jià)低于加入2-Me前但發(fā)生反應(yīng)表明為IgG-IgM類，抗體效價(jià)不變表明為IgG類，不反應(yīng)為IgM類。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)觀察組不規(guī)則抗體檢出率及抗體分布情況；統(tǒng)計(jì)進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查前后發(fā)生輸血不良反應(yīng)比例。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

本文數(shù)據(jù)采取統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS17.0進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)均采取雙人錄入EXCEl表格，計(jì)數(shù)資料采取%表示，組間比較采取χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不規(guī)則抗體陽性率及抗體特異性分布

觀察組500名產(chǎn)婦中不規(guī)則抗體陽性人數(shù)6名，比例1.20%；IgG類5名，IgM-IgG類1名。見表1。

表1 兩組檢出率比較 例

2.2 兩組產(chǎn)婦妊娠輸血不良反應(yīng)出現(xiàn)情況比較

對照組發(fā)生輸血后不良反應(yīng)6名，比例1.20%，觀察組輸血后未出現(xiàn)不良反應(yīng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=4.19,P<0.05)。

3 討論

不規(guī)則抗體是與Landsteiner法則不符合抗體，指除ABO三種血型抗體外其他所有紅細(xì)胞血型抗體，一般人群中發(fā)現(xiàn)不規(guī)則抗體陽性比例在0.5%～1.5%左右，而妊娠是產(chǎn)生不規(guī)則抗體重要原因之一[4]。不規(guī)則抗體可分為IgG及IgM兩大類，在孕婦血清中主要是IgG類抗體，此類抗體可經(jīng)過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)中，胎兒體內(nèi)紅細(xì)胞被破壞從而發(fā)生溶血癥，病癥有水腫、貧血及黃疸等，甚至可能引發(fā)膽紅素腦病[5]。Rh血型中不規(guī)則抗體為ABO之外血型抗體中最有臨床意義，若Rh血型發(fā)生不相容會產(chǎn)生不規(guī)則抗體，且會造成嚴(yán)重新生兒溶血癥(HDN)及溶血性輸血不良反應(yīng)(HTR)。張勇萍等[6]研究4 397例孕產(chǎn)婦ABO、RhD血型檢測及不規(guī)則抗體分析中發(fā)現(xiàn)妊娠或輸血次數(shù)增加，不規(guī)則抗體產(chǎn)生及HDN發(fā)生比例越大。對于有數(shù)次輸血史或妊娠史人來說，再次輸入有不規(guī)則抗體血液后，會發(fā)生回憶反應(yīng)，使輸入紅細(xì)胞遭到破壞，抗體與同種異型抗原紅細(xì)胞結(jié)合從而導(dǎo)致免疫性溶血反應(yīng)。輸入人體抗體緩慢增加，紅細(xì)胞也隨之逐漸被破壞，因此發(fā)生溶血癥病癥不明顯，同時(shí)由于進(jìn)程緩慢，不會造成凝血系統(tǒng)明顯激活及引發(fā)血管活性物質(zhì)釋放，常被醫(yī)師忽視，最終導(dǎo)致輸血無效，耽誤病情。

疑難血型屬于血型難以鑒定現(xiàn)象，不僅與樣本本身特殊性相關(guān)，還與試驗(yàn)設(shè)備、人員水平等有關(guān)[7]。疑難血型進(jìn)行正反定型試驗(yàn)時(shí)凝集力較弱或正反定型結(jié)果不一致，年齡、ABO亞型及先天無抗體都會影響血型確認(rèn)。除血型鑒定外，不規(guī)則抗體篩查也是確保安全輸血重要一環(huán)。微柱凝膠法建立在抗人球蛋白法基礎(chǔ)上，采用凝膠介質(zhì)調(diào)節(jié)分子篩孔大小，凝集紅細(xì)胞無法通過篩孔留在凝膠管中上層，重復(fù)性良好，結(jié)果容易判斷，并且所用樣本量少，對于新生兒及樣本難以采集人群適用[8]。

本文發(fā)現(xiàn)500名產(chǎn)婦中不規(guī)則抗體陽性人數(shù)6名，比例1.20%；IgG類5名，IgM-IgG類1名。對照組發(fā)生輸血后不良反應(yīng)6名，比例1.20%，觀察組輸血后未出現(xiàn)不良反應(yīng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。由于有既往妊娠史或輸血史孕婦體內(nèi)存在不規(guī)則抗體比例較高，若不進(jìn)行篩查直接輸血會增加發(fā)生輸血不良反應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)。本研究對照組中發(fā)生6例輸血不良反應(yīng)均為免疫性溶血反應(yīng)，原因?yàn)檩斪⒌奈春Y查血液中存在相應(yīng)不規(guī)則抗體的抗原，與孕婦體內(nèi)不規(guī)則抗體發(fā)生免疫反應(yīng)，并在補(bǔ)體作用下溶解血液中紅細(xì)胞，引起溶血性輸血反應(yīng)，立即停止輸血并監(jiān)控生命體征，給予相應(yīng)對癥治療后好轉(zhuǎn)。進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查者，在篩查結(jié)果呈陽性后，進(jìn)一步進(jìn)行免疫性抗體篩查，從而選擇相應(yīng)陰性抗體且交叉配血符合血液輸血，均未出現(xiàn)輸血不良反應(yīng)。

綜上所述，產(chǎn)婦中不規(guī)則抗體陽性率為1.20%，產(chǎn)婦進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查可減少產(chǎn)婦輸血后不良反應(yīng)發(fā)生概率。