冠心寧注射液配伍穩(wěn)定性研究

張睿智，丁艷譜，李響明*，宋娜娜，張 旭，郝欣嶺，孫勝斌

(1.神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司，河北 石家莊 051430；2.中藥注射劑新藥技術(shù)開發(fā)國家地方聯(lián)合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

冠心寧注射液是由丹參、川芎提取精制而成的無菌水溶液，具有活血化瘀、通脈養(yǎng)心的功效。臨床上發(fā)現(xiàn)冠心寧注射液對心血管疾病、腦血管疾病、呼吸系統(tǒng)疾病、腎病有一定的治療效果[1]。冠心寧注射液中主要含有丹參酚酸類成分和糖類成分[2]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，冠心寧注射液具有擴(kuò)張冠狀動脈、增加冠脈血流量、改善心肌缺血、改善微循環(huán)、抑制血液凝固、促進(jìn)纖溶、改善血流變指標(biāo)的作用。

隨著冠心寧注射液在臨床上的廣泛應(yīng)用，因配伍引發(fā)的不良反應(yīng)時有發(fā)生，其配伍研究也逐漸引起重視。目前冠心寧注射液的配伍研究中稀釋劑的選擇，除了說明書中已經(jīng)明確的5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液外，文獻(xiàn)報道的還有10%葡萄糖注射液、葡萄糖氯化鈉注射液、復(fù)方氯化鈉注射液[3]，其配伍穩(wěn)定性研究的監(jiān)測項目主要有外觀性狀、pH值、紫外吸光度、不溶性微粒[4-5]、細(xì)菌內(nèi)毒素[6]。黃良永等[7]發(fā)現(xiàn)冠心寧注射液與5%葡萄糖注射液配伍后不溶性微粒數(shù)量與配伍液的放置時間和兩者配伍的比例有關(guān)?，F(xiàn)在關(guān)于配伍的研究中，冠心寧注射液中有效物質(zhì)酚酸類成分的變化鮮有報道，因此本研究中除了性狀、pH值、不溶性微粒、紫外吸光度等的監(jiān)測外，還增加了滲透壓摩爾濃度比、酚酸類成分的含量測定。

1 試藥與儀器

1.1 試藥

冠心寧注射液(神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供)；5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液(石家莊四藥有限公司)；丹參素鈉對照品(110855-201614，98.1%)、原兒茶醛對照品(110810-201608，99.3%)、迷迭香酸對照品(111871-201706，90.5%)、丹酚酸B對照品(111562-201716，94.1%)、阿魏酸對照品(110773-201614，99.0%)，以上對照品均購自中國食品藥品檢定研究院。乙腈為色譜純；三氟乙酸為分析純。

1.2 儀器

U3000高效液相色譜儀(戴安公司)；CPA225D電子天平(Sartorius)；FE20酸度計(梅特勒-托利多)；不溶性微粒測定儀(天津市天大天發(fā)科技有限公司)；紫外可見分光光度計(日本島津公司)；電熱恒溫水浴鍋(北京科偉永興儀器有限公司)；滲透壓摩爾濃度測定儀(天津天河醫(yī)療器械有限公司)。

2 方法

2.1 配伍方法

冠心寧注射液質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[8]中[用法與用量]中已明確“靜脈滴注。一次20～40 mL，用5%葡萄糖注射液或0.9%氯化鈉注射液250～500 mL稀釋后使用，一日1次”[6]。為了提高滴注的順應(yīng)性，降低疼痛反應(yīng)的發(fā)生率，我公司在產(chǎn)品說明書中“建議滴速小于40滴/分，一般控制在15～30滴/分”。

因此本研究確定冠心寧注射液的稀釋液為5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液，分別考察最小濃度、最大濃度時的配伍穩(wěn)定性。結(jié)合滴速，可計算出最長滴注時間為11.6 h，最短滴注時間為2.4 h。綜上，本研究分別取20 mL冠心寧注射液與500 mL稀釋液(5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液)在超凈臺下配伍，取40 mL冠心寧注射液與250 mL稀釋液(5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液)在超凈臺下配伍，配伍后在室溫下靜置12 h，分別在0、1、2、4、6、12 h觀察配伍液的性狀，測定配伍液的pH值、不溶性微粒、摩爾滲透壓比、吸光度。

2.2 檢測方法

2.2.1 性狀 目視，靜置一定時間后觀察配伍液的顏色，是否有氣體產(chǎn)生，有無渾濁或沉淀。

2.2.2 pH值 取配伍液，按《中國藥典》2015年版四部通則0631測定pH值。

2.2.3 不溶性微粒 取配伍液，按《中國藥典》2015年版四部通則0903測定不溶性微粒。

2.2.4 滲透壓摩爾濃度 取配伍液，按《中國藥典》2015年版四部通則0631測定滲透壓摩爾濃度比。

2.2.5 吸光度 精密量取配伍后的藥液，加水稀釋至每1 mL相當(dāng)于丹參2 mg的溶液。照紫外-可見分光光度法《中國藥典》2015年版四部通則 0401)，取相應(yīng)濃度的配伍稀釋液同法稀釋相同的倍數(shù)后作為空白，在200～600 nm波長范圍內(nèi)掃描。

2.2.6 總酚酸 參照冠心寧注射液現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(WS3-B-3267-98-2012)中[含量測定]總酚酸的方法測定。取低濃度的配伍液用水稀釋20倍，高濃度的配伍液用水稀釋50倍后，搖勻即得供試品溶液。分別以相應(yīng)的配伍稀釋劑稀釋相同倍數(shù)后為空白，測定其在280 nm處的吸光度。分別以相應(yīng)的配伍稀釋劑稀釋相同倍數(shù)后作為空白溶液，測定其在280nm處的吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計算。

2.2.7 丹參素鈉、原兒茶醛、阿魏酸、迷迭香酸和丹酚酸B 參照冠心寧注射液現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(WS3-B-3267-98-2012)中[含量測定]丹參素鈉、原兒茶醛、阿魏酸、迷迭香酸和丹酚酸B的方法測定。取配伍后的稀釋液，過濾，取續(xù)濾液即得供試品溶液。分別精密吸取供試品溶液10～25 μL注入液相色譜儀，測定，即得。

3 結(jié)果

根據(jù)“2.1”項下方法配伍后，分別于放置0、1、2、4、6、12 h后按照“2.2”項下方法檢測，得出試驗結(jié)果。見表1、表2、表3。

表1 配伍液的性狀及pH值的變化

表2 配伍液的不溶性微粒及滲透壓摩爾濃度的變化

續(xù)表2

配伍方式冠心寧注射液批號/用量(mL)不溶性微粒(粒/mL)粒徑01h2h4h6h12h滲透壓摩爾濃度比01h2h4h6h12h0.9%氯化鈉注射液500mLGXN-1/20≥10μm≥25μm4181713140911.11.01.11.01.11.0GXN-2/20≥10μm≥25μm4191516180711.01.01.01.01.21.0GXN-3/20≥10μm≥25μm4150803191601.01.11.11.01.11.15%葡萄糖注射液250mLGXN-1/40≥10μm≥25μm3120213140411.11.11.11.11.11.1GXN-2/40≥10μm≥25μm3131413040511.11.11.11.11.11.1GXN-3/40≥10μm≥25μm1131415031411.01.01.11.11.01.10.9%氯化鈉注射液250mLGXN-1/40≥10μm≥25μm5170816140711.11.01.11.11.11.1GXN-2/40≥10μm≥25μm81419161100501.21.11.21.11.01.1GXN-3/40≥10μm≥25μm5171508131601.21.11.11.01.11.2

表3 配伍液的吸光度變化

表4 配伍液的含量變化

續(xù)表4

配伍方式冠心寧注射液批號/用量(mL)含量測定(mg/mL)總酚酸丹參素鈉原兒茶醛阿魏酸迷迭香酸丹酚酸B0h12h0h12h0h12h0h12h0h12h0h12h0.9%氯化鈉注射液500mLGXN-1/200.740.700.0560.0550.0150.0140.0020.0020.0080.0080.0150.015GXN-2/200.750.730.0570.0590.0150.0150.0020.0020.0090.0090.0160.016GXN-3/200.630.600.0540.0510.0140.0130.0020.0020.0080.0070.0120.0115%葡萄糖注射液250mLGXN-1/402.602.590.2030.2000.0520.0510.0080.0080.0300.0300.0550.054GXN-2/402.722.620.2080.2060.0540.0520.0080.0080.0320.0300.0570.057GXN-3/402.272.220.1940.1930.0500.0480.0070.0060.0280.0280.0410.0400.9%氯化鈉注射液250mLGXN-1/402.642.630.1970.1970.0510.0510.0080.0080.0300.0300.0540.054GXN-2/402.662.630.1960.1990.0510.0520.0080.0080.0300.0300.0540.057GXN-3/402.292.220.1930.1930.0500.0480.0060.0060.0280.0280.0410.041

從以上3個表中的數(shù)據(jù)可知，將冠心寧注射液分別與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液配伍成兩種濃度后，在超凈臺下室溫連續(xù)放置12 h，配伍液未發(fā)生變色、產(chǎn)氣、渾濁或沉淀的現(xiàn)象，配伍液始終呈微黃色、淺黃色的澄明液體；pH值、摩爾滲透壓比穩(wěn)定，12 h內(nèi)幾乎無變化。與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液配伍后，相同濃度的配伍液pH值、摩爾滲透壓比稍有差異，這與所用的稀釋劑不同有關(guān)。不溶性微粒數(shù)目主要取決于稀釋劑中不溶性微粒的水平，放置過程中配伍液不溶性微粒數(shù)目無顯著變化。配伍液在200～600nm波長范圍內(nèi)掃描，發(fā)現(xiàn)在(283±2)nm處有最大吸收，且在12 h內(nèi)吸收度值穩(wěn)定。本研究還測定了配伍液中有效成分的含量，放置12 h后總酚酸、丹參素鈉、原兒茶醛、阿魏酸、迷迭香酸、丹酚酸B含量相對穩(wěn)定。本次研究表明冠心寧注射液與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液配伍穩(wěn)定。

4 討論

不溶性微粒可引起肉芽腫、肺水腫、靜脈炎、變態(tài)反應(yīng)、熱原樣反應(yīng)、血栓、組織壞死、腫瘤樣反應(yīng)等，還可能沉積在肝、脾與骨髓中對人體造成危害。因此不溶性微粒成為配伍穩(wěn)定性研究的重點監(jiān)測項目。在本研究中發(fā)現(xiàn)配伍液的不溶性微粒測定時容易受微小氣泡“假?！钡母蓴_，尤其是配伍混合初期容易出現(xiàn)不溶性微粒偏多的結(jié)果。參考文獻(xiàn)中[9]的方法超聲、真空脫氣，均可有效排除“假?！保岣邷y定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

由于各種藥物的藥理作用不同，臨床上常常聯(lián)合用藥以達(dá)到良好的治療效果，但又因藥物的理化性質(zhì)不同，配伍后可能出現(xiàn)變色、產(chǎn)氣、渾濁甚至沉淀。目前文獻(xiàn)中已經(jīng)明確的與冠心寧注射液有配伍禁忌、不適宜配伍的藥物有甘草酸二胺注射液[10]、鹽酸罌粟堿注射液[11]、喹諾酮類藥物[12-13]乳酸環(huán)丙沙星[14-15]、鹽酸左氧氟沙星[16-17]、氟羅沙星[18]、甲磺酸加替沙星[19]、甲磺酸培氟沙星。臨床醫(yī)護(hù)人員需清楚地了解存在配伍禁忌、不適宜配伍的藥物，科學(xué)配伍，從根源上降低不良反應(yīng)的發(fā)生率；此外制劑生產(chǎn)企業(yè)還應(yīng)根據(jù)目前發(fā)現(xiàn)的配伍禁忌信息及時修訂說明書中用藥注意事項等安全性信息，以指導(dǎo)臨床配伍。