肺泡灌洗液LDH、CYfra21-1、PCT水平聯(lián)合檢測(cè)診斷肺癌臨床價(jià)值探討

楊國(guó)彪 徐萌敏 徐亮 孫小軍 張聰雪 楊飛燕

[摘要] 目的 探討肺泡灌洗液（BALF）中乳酸脫氫酶（LDH）、細(xì)胞角蛋白19片段（CYfra21-1）、降鈣素原（PCT）水平聯(lián)合檢測(cè)診斷肺癌的臨床價(jià)值。 方法 選取2017年7月～2018年7月我院門(mén)診及住院行電子支氣管鏡檢查的患者98例為疾病組，分為肺癌組（58例）和肺部良性病變組（40例）為研究對(duì)象，選取同期收治的體檢健康者100例作為健康組，采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）檢測(cè)所有入組對(duì)象術(shù)前血清LDH、CYfra21-1和PCT水平，檢測(cè)疾病組肺泡灌洗液中LDH、CYfra21-1和PCT水平，分析肺泡灌洗液中的LDH、CYfra21-1和PCT單獨(dú)和聯(lián)合檢測(cè)在診斷肺癌中的意義。 結(jié)果 疾病組血清LDH、CYfra21-1和PCT水平均高于健康組（P<0.05）;肺癌組血清LDH、CYfra21-1和PCT水平高于肺部良性病變組（P<0.05）;肺癌組BALF中LDH、CYfra21-1和PCT水平均高于肺部良性病變組。ROC曲線分析顯示，BALF的LDH、CYfra21-1和PCT聯(lián)合檢測(cè)肺癌的曲線下面積（AUC）為0.866，高于血清中LDH、CYfra21-1和PCT三者聯(lián)合檢測(cè)AUC為0.753。 結(jié)論 相比于血清指標(biāo)，BALF中的LDH、CYfra21-1和PCT聯(lián)合可以為肺癌患者提供更準(zhǔn)確的診斷。

[關(guān)鍵詞] 肺癌;乳酸脫氫酶;細(xì)胞角蛋白19片段;降鈣素原;肺泡灌洗液

[中圖分類(lèi)號(hào)] R563.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-9701（2020）09-0111-04

[Abstract] Objective To investigate the clinical value of combined test of the levels of lactic dehydrogenase （LDH）， cytokeratin fragment 19 （CYfra21-1） and procalcitonin （PCT） in bronchoalveolar lavage fluid （BALF） in the diagnosis of lung cancer. Methods 98 patients who came to the Outpatient Department and hospitalized for electronic bronchoscopy from July 2017 to July 2018 were selected as the disease group， which were divided into the lung cancer group （58 patients） and the benign lung lesions group（40 patients） as the study objects， while 100 healthy examined subjects admitted and treated during the same period were selected as the healthy group. The preoperative serum LDH， CYfra21-1 and PCT levels of all the included subjects were detected by euzymelinked immunosorbent assay（ELISA）， and the levels of LDH， CYfra21-1 and PCT in bronchoalveolar lavage fluid in the disease group were detected to analyze the significance of LDH， CYfra21-1 and PCT in bronchoalveolar lavage fluid alone and in combination in the diagnosis of lung cancer. Results The serum LDH， CYfra21-1 and PCT levels in the disease group were higher than those in the healthy group（P<0.05）; the serum LDH， CYfra21-1 and PCT levels in the lung cancer group were higher than those in the benign lung lesions group（P<0.05）; the levels of LDH， CYfra21-1 and PCT in BALF in the lung cancer group were higher than those in the benign lung lesions group. ROC curve analysis showed that the area under the curve（AUC） for the combined test of LDH， CYfra21-1 and PCT in BALF was 0.866， which was higher than that for the combined test of LDH， CYfra21-1 and PCT in serum（0.753）. Conclusion The combination of LDH， CYfra21-1 and PCT in BALF can provide a more accurate diagnosis for patients with lung cancer than serum indexes.

[Key words] Lung cancer; Lactic dehydrogenase; Cytokeratin fragment 19; Procalcitonin; Bronchoalveolar lavage fluid

肺癌是一種死亡率極高的惡性腫瘤，每年因肺癌死亡的患者占世界腫瘤死亡患者的17%，早期肺癌患者行根治術(shù)后，存活率達(dá)到70%，但晚期肺癌患者的存活率不足20%[1-2]。肺癌的篩查多采用影像學(xué)手段，據(jù)統(tǒng)計(jì)，只有16%的肺癌患者在早期被診斷，因此，開(kāi)發(fā)生化指標(biāo)篩查早期肺癌患者是有臨床價(jià)值的[3]。肺泡灌洗液（BALF）中富含小分子代謝物，直接反映了肺泡的生理及病理生理狀態(tài)，可能對(duì)早期肺癌的診斷提供思路[4]。本研究討論了BALF中乳酸脫氫酶（LDH）、細(xì)胞角蛋白19片段（CYfra21-1）、降鈣素原（PCT）聯(lián)合診斷肺癌的臨床價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年7月～2018年7月紹興文理學(xué)院附屬醫(yī)院門(mén)診及住院行電子支氣管鏡檢查的患者98例為疾病組，經(jīng)術(shù)后病理診斷確診為肺癌患者（58例）和肺部良性病變患者（40例）為研究對(duì)象，肺癌組中：男38例，女20例，年齡35～75歲，平均（59.15±7.16）歲，鱗癌15例，腺癌36例，其他7例;臨床分期：Ⅰ期10例，Ⅱ期24例，Ⅲ期17例，Ⅳ期7例;合并淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15例，淋巴結(jié)無(wú)轉(zhuǎn)移43例。肺部良性病變組中：男25例，女15例，年齡38～75歲，平均（58.79±7.25）歲，急性支氣管炎20例，肺部感染9例，支氣管肺炎11例。（3）選取同期就診的年齡匹配的健康體檢者100例作為健康組：男58例，女42例，年齡36～75歲，平均（58.29±6.98）歲。三組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 納入及排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 疾病組? 納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)病理診斷確診為肺癌患者或聯(lián)合影像學(xué)、生化指標(biāo)確診為肺部良性病變;病例資料完整;本研究入組患者均自愿簽署知情同意書(shū)，且經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：嚴(yán)重肝、腎、心功能障礙者;合并癲癇、腦出血等腦血管疾病者;合并其他系統(tǒng)原發(fā)性惡性腫瘤者。

1.2.2 健康組? 納入標(biāo)準(zhǔn)：體檢各指標(biāo)均正常;體檢資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并心肝腎等重要器官疾患者;家族中有腫瘤史者。

1.3 檢驗(yàn)方法

1.3.1 血清標(biāo)志物檢測(cè)? 采取所有入組者空腹靜脈血3 mL，3000 r/min離心10 min分離血清，-70℃保存待查。采用Maglumin 2000 plus型全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、貝克曼全自動(dòng)生化分析儀5800，使用化學(xué)發(fā)光免疫分析法和速率法檢測(cè)所有入組者血清中PCT、CYfra21-1、LDH水平，試劑盒由深圳市新產(chǎn)業(yè)生物醫(yī)學(xué)工程股份有限公司提供。

1.3.2 BALF標(biāo)志物檢測(cè)? 疾病組均行支氣管鏡檢查，纖維支氣管鏡由遠(yuǎn)端插入可能病變位置支氣管，良性病變者選取可見(jiàn)病變位置最嚴(yán)重部位做灌洗，由活檢孔注入1～2 mL的利多卡因（濃度為20 g/L）進(jìn)行灌洗前麻醉，后從分檢孔注入37℃無(wú)菌生理鹽水30～50 mL后負(fù)壓吸引收回，然后抽吸3～5 mL，1500 r/min離心10 min，取上清液檢送檢，檢驗(yàn)方式同1.3.1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS19.0中處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用（x±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn)，P<0.05提示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，診斷效能的評(píng)估采用ROC曲線。

2 結(jié)果

2.1 疾病組和健康組血清LDH、CYfra21-1和PCT水平比較

疾病組血清LDH、CYfra21-1和PCT水平均高于健康組（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 肺癌組和肺部良性病變組血清LDH、CYfra21-1和PCT水平比較

肺癌組血清LDH、CYfra21-1和PCT水平均高于肺部良性病變組（P<0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 肺癌組和肺部良性病變組BALF中LDH、CYfra21-1和PCT水平比較

肺癌組BALF中LDH、CYfra21-1和PCT水平均高于肺部良性病變組（P<0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 血清中LDH、CYfra21-1和PCT及三者聯(lián)合肺癌的診斷效能

ROC曲線分析顯示，血清中LDH、CYfra21-1和PCT三者聯(lián)合診斷肺癌的曲線下面積（AUC）為0.753，高于單一指標(biāo)檢測(cè)，取血清中LDH>182.62U/L、CYfra21-1>9.82 ng/mL、PCT>0.07 ng/mL，傾向于肺部惡性腫瘤，以此診斷肺癌的敏感度為70.7%，特異度為76.9%。見(jiàn)表4、封三圖2。

結(jié)果分析

2.5 BALF中LDH、CYfra21-1和PCT水平及三者聯(lián)合肺癌的診斷效能

患者BALF中LDH、CYfra21-1和PCT三者聯(lián)合診斷肺癌的AUC為0.866，取BALF中LDH>260.31 U/L、CYfra21-1>44.46 ng/mL、PCT>8.77 ng/mL，傾向于肺部惡性腫瘤，以此診斷肺癌的敏感度為87.9%，特異度為80.2%。見(jiàn)表5、封三圖3。

3 討論

肺癌是當(dāng)今世界死亡率最高的惡性腫瘤之一，受吸煙、環(huán)境等因素影響，肺癌發(fā)病率逐年上升，而早期肺癌無(wú)明顯臨床癥狀常被漏診[5]。肺癌的篩查常依賴(lài)于影像學(xué)手段，但診斷率有待提高，腫瘤標(biāo)志物是一類(lèi)參與腫瘤發(fā)生，由腫瘤細(xì)胞分泌和生成的蛋白，反映了疾病的變化，可以在患者血液和體液中被檢測(cè)到，對(duì)腫瘤的篩查和治療都有很重要的意義[6-7]。支氣管肺泡灌洗術(shù)是依托于支氣管鏡發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)，可以直接取得病變區(qū)域的標(biāo)本或分泌物進(jìn)行檢測(cè)[8]。本研究利用了支氣管肺泡灌洗術(shù)，檢驗(yàn)了肺癌患者BALF中LDH、CYfra21-1、PCT的水平，研究三者對(duì)肺癌的診斷價(jià)值。

LDH是一種參與糖酵解途徑的酶，腫瘤組織缺氧會(huì)使LDH含量增加，催化丙酮酸生成乳酸，為癌細(xì)胞提供能量，是一種廣泛應(yīng)用的標(biāo)志腫瘤組織缺氧和預(yù)后不良的指標(biāo)[9-10]。既往研究指出，LDH在肺癌患者血清中的表達(dá)高于良性病變患者，可以作為肺癌早期診斷的標(biāo)志物之一[11]。張舒等[12]發(fā)現(xiàn)肺泡灌洗液中LDH的陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果可能和肺結(jié)核的發(fā)生有關(guān)，可以作為診斷肺結(jié)核的參考指標(biāo)。本研究中，疾病組患者血清LDH水平高于健康組;肺癌組患者血清和BLAF中LDH水平均高于肺良性病變組（P<0.05），提示肺癌患者的LDH在血清和BLAF中均呈現(xiàn)高表達(dá)，預(yù)計(jì)既往研究類(lèi)似[13]。

CYfra21-1是上皮細(xì)胞CK19的片段，在多種惡性腫瘤中檢測(cè)到過(guò)表達(dá)情況，也是現(xiàn)在臨床較為常用的診斷鱗癌的腫瘤標(biāo)志物[14]。另有研究表明，血清中CYfra21-1的水平與肺癌分化程度，病理類(lèi)型均有相關(guān)性，在早期肺癌患者體內(nèi)的表達(dá)低于晚期肺癌患者[15]。任芳萍等[16]對(duì)比了肺癌患者血清和BLAF中CYfra21-1的濃度，發(fā)現(xiàn)BALF中CYFRA21-1檢測(cè)對(duì)肺癌的早期診斷優(yōu)于血清，對(duì)于推測(cè)病理類(lèi)型、判斷臨床分期及預(yù)后有一定臨床價(jià)值。本研究中也發(fā)現(xiàn)，疾病組患者血清CYFRA21-1水平高于健康組;肺癌組患者血清和BLAF中CYFRA21-1水平均高于肺良性病變組（P<0.05），CYFRA21-1水平的變化與肺癌的發(fā)生發(fā)展有一定的關(guān)系。

PCT是一種降鈣素的前肽物，與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，在病理狀態(tài)下多臟器均可產(chǎn)生[17]。血清中PCT可以被用于診斷肺癌伴感染患者，BLAF中的PCT水平常被用于聯(lián)合檢測(cè)肺炎，在肺癌檢測(cè)中應(yīng)用較少[18-20]。本研究發(fā)現(xiàn)肺癌患者BLAF中的PCT水平高于肺良性病變患者（P<0.05），提示BLAF中的PCT水平也有潛力作為肺癌診斷的標(biāo)志物之一。

本研究中，肺癌患者血清LDH、CYfra21-1和PCT水平均高于肺良性病變組，ROC分析三者對(duì)肺癌患者的檢測(cè)能力，發(fā)現(xiàn)三者聯(lián)合檢測(cè)的準(zhǔn)確性更高。同時(shí)，通過(guò)對(duì)兩組患者BLAF中腫瘤標(biāo)志物的分析，發(fā)現(xiàn)肺癌患者的LDH、CYfra21-1和PCT水平均呈過(guò)表達(dá)，三者聯(lián)合檢測(cè)的診斷符合率高于單一檢測(cè)，同時(shí)BLAF中三者聯(lián)合檢測(cè)的曲線下面積大于血清中三者聯(lián)合，提示患者BLAF中LDH、CYfra21-1和PCT水平三者聯(lián)合可以為肺癌患者提供更準(zhǔn)確的診斷。

綜上所述，肺癌患者BLAF中LDH、CYfra21-1和PCT顯著高于肺良性疾病患者和健康人，三指標(biāo)聯(lián)合可以更準(zhǔn)確的預(yù)測(cè)肺癌，但本研究選取的樣本少，有待擴(kuò)充樣本并延長(zhǎng)隨訪時(shí)間，進(jìn)一步探討三個(gè)指標(biāo)在肺癌患者的診斷和治療中的作用。

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（收稿日期：2019-11-20）