196例血清意外抗體的特點分析

董 林 包 進 趙昕亞 張瑞生 徐 菲

(南京醫(yī)科大學(xué)附屬南京醫(yī)院/江蘇省南京市第一醫(yī)院輸血科，南京市 210006，電子郵箱：1262725610@qq.com)

輸血是臨床疾病治療的重要手段之一，在輸血之前需要進行相應(yīng)的交叉配血，以檢驗患者和供血者雙方的血型以及兩者的血液成分相容性，這也是輸血科或者血庫的主要工作，理論上需要供受雙方的紅細胞和血清完全相容才可以進行輸注。而在實際工作中，因患者輸血次數(shù)增加、病情變化等因素，會造成意外抗體的出現(xiàn)，從而導(dǎo)致血型鑒定以及交叉配血困難，進而延遲患者輸注血制品的時間，對患者的治療造成很大的影響。意外抗體，即不符合傳統(tǒng)的ABO血型Landsteiner規(guī)則的血型抗體，也被稱為意外抗體[1]，主要為血清中抗A和抗B以外的抗體，此種抗體可能會導(dǎo)致患者發(fā)生溶血性輸血不良反應(yīng)，從而對患者的生命造成威脅[2]。本研究總結(jié)196例血清意外抗體的特點，以探討意外抗體檢測的意義，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 病例來源 2017年7月至2019年7月我院輸血科收到的存在意外抗體的標(biāo)本共196例，均為交叉配血不合(包括主側(cè)和/或次側(cè)凝集)、血型正反定型不符或意外抗體篩查陽性，且經(jīng)南京市紅十字血液中心鑒定出意外抗體。交叉配血供血者血液來自南京市紅十字血液中心。

1.2 方法

1.2.1 儀器和試劑： 血型儀及配套ABO正反定型、Rh血型鑒定卡購自強生公司；反定型細胞、抗人球蛋白檢測卡(意外抗體篩檢卡、交叉配血卡)、意外抗體篩檢試劑(人紅細胞)均購自長春博迅生物科技有限公司；意外抗體鑒定細胞譜試劑購自荷蘭Sanquin公司；37℃孵育器和抗人球蛋白檢測相應(yīng)離心機均購自長春博研科學(xué)儀器責(zé)任有限公司；標(biāo)本離心機購自北京白洋醫(yī)療器械有限公司；生理鹽水(0.9%氯化鈉注射液)購自安徽雙鶴藥業(yè)有限責(zé)任公司。

1.2.2 血型鑒定： 將患者全血標(biāo)本以3 500 r/min離心4 min后，放入血型儀進行全自動血型鑒定。

1.2.3 意外抗體篩查： 將患者全血標(biāo)本以3 500 r/min離心4 min，分離血清，將血清和意外抗體檢測試劑(人紅細胞)各50 μL加入抗人球蛋白檢測卡中，37℃孵育15 min，900 r/min離心2 min、1 500 r/min離心5 min后讀取結(jié)果。

1.2.4 交叉配血： 將患者和供血者的全血標(biāo)本分別以3 500 r/min離心4 min，分離血清，并取壓積紅細胞用生理鹽水配置成1%紅細胞懸液。分別將患者血清和供血者1%紅細胞加入抗人球蛋白檢測卡(交叉配血卡)一孔中，另一孔加入患者1%紅細胞和供血者血清，37℃孵育15 min，900 r/min離心2 min、1 500 r/min離心5 min后讀取結(jié)果。

1.2.5 意外抗體的鑒定：出現(xiàn)血型鑒定正反定型不符、意外抗體篩檢陽性、交叉配血不符中的任一種情況，均需重新抽血送至南京市紅十字血液中心進行意外抗體的具體鑒定，方法同意外抗體的篩查，細胞譜試劑為荷蘭Sanquin公司產(chǎn)品。

2 結(jié) 果

2.1 意外抗體的病區(qū)分布 196例意外抗體病例中，來自血液科和ICU的病例最多，其次為心臟科，見表1。

表1 196例意外抗體病例的病區(qū)分布

2.2 意外抗體病例的血型分布 196例意外抗體病例中，B型血型病例最多，占32.1%(63/196)，其次為O型及A型，分別占28.6%(56/196)、24.0%(47/196)，最少為AB型，占15.3%(30/196)。

2.3 意外抗體種類 自身抗體最為常見，其次為自身IgG抗體及Rh類抗體，見表2。

表2 意外抗體種類

3 討 論

輸血已經(jīng)成為一種重要的臨床治療手段，而輸血前的血型鑒定和交叉配血是最為關(guān)鍵的操作，只有患者和供血者的血型和交叉配血相合才可以進行輸注。而輸血也被認(rèn)為是造成意外抗體出現(xiàn)的最主要原因[3]。意外抗體會導(dǎo)致血型鑒定或者交叉配血等疑難情況的出現(xiàn)，只有對患者血清中意外抗體的類型進行確認(rèn)，血液中心才能夠提供相合的血液給患者進行輸注，以避免不良反應(yīng)的發(fā)生。

本研究的196例意外抗體病例中，血液科和ICU的病例最多，其次為心臟科。有研究表明,輸注1個單位紅細胞會導(dǎo)致1%的紅細胞致敏，而多次輸血后意外抗體的發(fā)生率也會提高5%～20%[4]。血液科患者由于原發(fā)疾病而出現(xiàn)不同程度的貧血、ICU和心臟科患者由于基礎(chǔ)疾病較為復(fù)雜，通常均需要輸血進行治療，因此以上病區(qū)的患者出現(xiàn)意外抗體的概率較大。196例意外抗體病例中，AB型血型的病例最少，其余3種血型相差不大，這可能與人群中AB型血型比例較低有關(guān)。

意外抗體主要是由于免疫刺激所致，大部分屬于IgG，此類抗體在鹽水中不容易出現(xiàn)凝集，而采用微柱凝膠法可以產(chǎn)生凝集現(xiàn)象[5]。有研究表明，意外抗體的類型主要是IgG類和Rh類[6]。本研究結(jié)果顯示，IgG和Rh類抗體也是較為常見的意外抗體類型，分別占31.1%、21.4%。在Rh類抗體中，以抗E抗體最為常見，有研究顯示抗E抗體在Rh類抗體中約占57%[7]。本研究中抗E抗體在Rh系統(tǒng)中的比例為50%，與該結(jié)果相近。而抗E抗體陽性通常被認(rèn)為主要出現(xiàn)在多次輸血的患者中[8]，對于血液科、ICU等需要反復(fù)輸血的科室，可以增加對此類患者進行Rh系統(tǒng)抗原表型測定的頻率，從而保障其在緊急用血時可以快速提供相應(yīng)的血液，以挽救生命。

本研究中，Rh、MNS、Kidd、Lewis系統(tǒng)抗體所占比例依次降低，其中以Rh系統(tǒng)的抗E抗體出現(xiàn)的比例最高，而MNS、Lewis、Kidd系統(tǒng)抗體所占比例較低，均不足10%，這與相關(guān)文獻[9-10]報告的結(jié)果類似。MNS系統(tǒng)復(fù)雜性僅次于Rh系統(tǒng)，也是第二個被發(fā)現(xiàn)的血型系統(tǒng)。MNS系統(tǒng)的抗M抗體有IgM和IgG兩種類型，較為多見的是IgM，它是一種天然抗體，在4℃以下會激活補體導(dǎo)致變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生，而在37℃無凝集現(xiàn)象的出現(xiàn)，通常被認(rèn)為沒有臨床意義，因為在交叉配血過程中有37℃孵育的操作，因此會造成漏檢，雖然其陽性率較低，但是在輸血檢驗的過程中也需要加以重視；IgG類抗M抗體較為少見，其通常與IgM類抗M抗體同時混合存在于血漿中，在37℃溫度下有較強的活性，可以與紅細胞上的M抗原反應(yīng)，因此其對于臨床輸血有著明顯的意義。此外，Kidd系統(tǒng)的抗JK抗體是免疫抗體，通常是由于受到JK抗原刺激產(chǎn)生，在中國人群中較少，在體外和體內(nèi)的活性較弱[11]?？筁ea抗體是Lewis系統(tǒng)最為常見的抗體，和MNS系統(tǒng)抗體一樣，多數(shù)為IgM型，其系統(tǒng)抗原在組織液中可以大量的存在，也可以中和部分抗體，因此抗Lea抗體極少引起輸血不良反應(yīng)。抗P1抗體也屬于冷抗體系列，在30℃以上一般不會出現(xiàn)凝集反應(yīng)。

隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，以及病情的不斷變化，臨床對于輸血的需求也越來越大，對于血型鑒定的困難也逐漸增多。目前，很多醫(yī)院包括筆者所在醫(yī)院的輸血科，用于意外抗體鑒定的標(biāo)準(zhǔn)細胞僅為三種一組，細胞譜較窄，多數(shù)情況下無法確定血型抗體的類別，只能送到血液中心進行具體確定，使臨床用血不能及時到位。而在交叉配血過程中，傳統(tǒng)的聚凝胺方法時間較短，但是出錯的可能性較大；微柱凝膠法時間雖長，但可以大大提高配血的安全性。在我院，除了特殊緊急情況下進行聚凝胺法檢測外，其余均采用微柱凝膠法進行配血。在輸血前對于意外抗體的篩查十分必要，特別是對于反復(fù)輸血或者有妊娠史的患者更加需要重視，及早發(fā)現(xiàn)相應(yīng)的意外抗體，選擇對應(yīng)抗原陰性的血液進行輸注，可以有效避免輸血不良反應(yīng)的發(fā)生。而血型系統(tǒng)的復(fù)雜性，也對輸血科的人員技能和設(shè)備提出了更高的要求，配備更多更有效的譜細胞，可以及早檢測出相應(yīng)的血型抗體，減少了配血所需時間，確保了臨床用血的合理、有效、安全。