化學(xué)發(fā)光免疫試驗(yàn)篩查147 385例患者的梅毒血清學(xué)結(jié)果分析

石正琪， 伍啟康， 李煒煊

佛山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科(廣東佛山 528000)

梅毒是由梅毒螺旋體(Treponemapallidum, TP)感染引起的一種慢性傳染病，具有復(fù)雜的臨床表現(xiàn)，能侵犯神經(jīng)、心血管、眼甚至骨骼等并引起相應(yīng)的疾病，可通過(guò)性接觸、血液和母嬰三種途徑傳播[1]。隨著梅毒血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，社會(huì)經(jīng)濟(jì)水平的提高和人們對(duì)梅毒等性病認(rèn)知的增加，梅毒篩查越來(lái)越普及，梅毒檢出者也越來(lái)越多?；瘜W(xué)發(fā)光免疫試驗(yàn)(CLIA)是綜合醫(yī)院用于梅毒篩查的常用檢測(cè)方法，具有高通量，操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)時(shí)間短等特點(diǎn)[2]。現(xiàn)對(duì)我院147 385例就診者梅毒血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果分析報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源 標(biāo)本來(lái)自2017年2月至2018年5月佛山市第一人民醫(yī)院門(mén)診及住院患者梅毒檢測(cè)病例，共147 385例，門(mén)診患者67 364例，住院患者80 021例，重復(fù)檢測(cè)者僅收集第一次結(jié)果。

1.2 儀器與試劑 梅毒抗體篩查試驗(yàn)采用美國(guó)雅培i2000SR全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光分析儀及配套的梅毒抗體檢測(cè)試劑、包括定標(biāo)物和質(zhì)控品；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(yàn)(TPPA)采用日本富士瑞必歐株式會(huì)社生產(chǎn)的檢測(cè)試劑，甲苯胺紅不加熱血清試驗(yàn)(TRUST)采用上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的診斷試劑，嚴(yán)格按照儀器和試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，同時(shí)進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。

1.3 方法及判斷標(biāo)準(zhǔn) 雅培i2000SR檢測(cè)梅毒抗體，S/CO≥1.0，判斷為有反應(yīng)性，S/CO<1.0，判斷為無(wú)反應(yīng)性，TPPA試驗(yàn)以≥1∶80判斷為陽(yáng)性，TRUST定量試驗(yàn)采用倍比稀釋后出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)的最高稀釋度為結(jié)果。雅培i2000SR檢測(cè)出的陽(yáng)性標(biāo)本再使用TPPA和TRUST檢測(cè)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 基本情況 梅毒抗體篩查147 385例，陽(yáng)性2 168例，陽(yáng)性率1.47%。其中門(mén)診患者和住院患者陽(yáng)性率分別為1.37%(921/67 364)、1.56%(1 247/80 021)，男性患者和女性患者陽(yáng)性率分別為1.74%(1 260/72 445)、1.21%(908/74 940)，門(mén)診患者與住院患者，男性患者與女性患者之間陽(yáng)性率均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。

2.2 初篩陽(yáng)性病例年齡分布 >16歲患者隨年齡增大陽(yáng)性率隨之升高，最高的是>80歲組，陽(yáng)性率為2.73%，1～15歲患者未檢出梅毒陽(yáng)性，<1歲患者檢出梅毒陽(yáng)性15例，且其母親均為陽(yáng)性，在隨訪中TRUST滴度均有降低。詳見(jiàn)表1。

表1 梅毒初篩陽(yáng)性病例年齡分布情況 例(%)

2.3 初篩陽(yáng)性病例科室分布 梅毒初篩陽(yáng)性病例最多的5個(gè)科室分別是婦科、腫瘤科、胃腸外科、皮膚科和體檢中心，而陽(yáng)性率最高的5個(gè)科室分別是皮膚科、重癥醫(yī)學(xué)科、血液淋巴科、神經(jīng)內(nèi)科和感染科。詳細(xì)情況見(jiàn)表2。

2.4 初篩陽(yáng)性標(biāo)本TRUST和TPPA檢測(cè)結(jié)果 2 168例初篩陽(yáng)性標(biāo)本中有1 796例同時(shí)用TRUST和TPPA檢測(cè)，其中男性831例，女性965例。TRUST和TPPA雙陽(yáng)性143例，TRUST陰性TPPA陽(yáng)性病例1 534例，TRUST和TPPA均陰性107例，另有12例TRUST陽(yáng)性TPPA陰性。TPPA與化學(xué)發(fā)光結(jié)果的符合率為93.37%(1 677/1 796)。在不同年齡段中，≥80歲的雙陽(yáng)性率最高，為14.74%(14/95)。不同年齡段TRUST和TPPA結(jié)果見(jiàn)表3。

2.5 化學(xué)發(fā)光法不同S/CO值與TPPA結(jié)果的符合率 2 168例化學(xué)發(fā)光法初篩陽(yáng)性標(biāo)本，有2 062例完成TPPA檢測(cè)，兩者總的符合率為93.21%(1 922/2 062)。根據(jù)S/CO值的大小將其分成1.0～5.0、>5.0～10.0、>10.0～20.0和>20.0四組，當(dāng)S/CO值>10.0時(shí)，與TPPA結(jié)果符合率為100%。各組數(shù)據(jù)見(jiàn)表4。

表2 梅毒初篩陽(yáng)性病例科室分布情況 例(%)

表3 不同年齡段梅毒初篩陽(yáng)性標(biāo)本TRUST和TPPA檢測(cè)結(jié)果分布 例

表4 化學(xué)發(fā)光法不同S/CO值時(shí)與TPPA試驗(yàn)結(jié)果比較例

3 討論

梅毒是由梅毒螺旋體感染引起的一種性傳播疾病，根據(jù)病程和臨床表現(xiàn)不同有一期梅毒、二期梅毒、隱性梅毒、神經(jīng)梅毒和胎傳梅毒等。據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，每年約有1 200萬(wàn)新發(fā)梅毒病例，其中超過(guò)90%發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家[3]。近年來(lái)，梅毒在我國(guó)的發(fā)病率也呈上升趨勢(shì)[4]。經(jīng)過(guò)規(guī)范化驅(qū)梅治療的患者大多數(shù)可以血清治愈[5]，因此梅毒的早診斷早治療對(duì)梅毒的防治極其重要。梅毒血清學(xué)檢測(cè)是診斷梅毒的一種最快捷有效的手段，根據(jù)所用抗原的不同可分為非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)和梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)兩大類(lèi)。目前常用的非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)有RPR和TRUST，梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗(yàn)有TPPA、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)和CLIA。ELISA和CMIA適合用于大樣本量的篩查，而TPPA具有較高的特異性和敏感性，是公認(rèn)的梅毒抗體確證試驗(yàn)，對(duì)早期梅毒和潛伏梅毒的診斷具有重要的臨床意義[6]；而RPR和TRUST檢測(cè)的是類(lèi)脂質(zhì)抗體，該抗體的產(chǎn)生比梅毒特異性抗體晚2周左右，且經(jīng)治療后其血清效價(jià)可下降并轉(zhuǎn)陰，可作為療效觀察、預(yù)后判斷或再感染的指征[7]。梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)要求確診病例必須滿足非梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)和梅毒螺旋體血清學(xué)試驗(yàn)雙陽(yáng)性。本研究CLIA篩查陽(yáng)性病例中有372例沒(méi)有做TPPA試驗(yàn)和TRUST試驗(yàn)，這些患者是否為現(xiàn)癥梅毒患者無(wú)法診斷，同時(shí)影響梅毒病例報(bào)告質(zhì)量。因此要加強(qiáng)與臨床溝通，普及梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)，提高醫(yī)務(wù)人員認(rèn)識(shí)，要求CLIA篩查陽(yáng)性時(shí)，要同時(shí)做TRUST和TPPA試驗(yàn)，以幫助診斷梅毒，減少梅毒的漏診誤診。

本研究結(jié)果顯示，本院就診者梅毒總的陽(yáng)性率為1.47%，低于海口、南京等城市的2.10%～2.98%[8-9]，與西安相當(dāng)1.65%[10]，高于全國(guó)術(shù)前/受血前患者梅毒陽(yáng)性率(1.1%)[11]。引起陽(yáng)性率差異的因素較多，可能與地區(qū)人群分布，經(jīng)濟(jì)條件及醫(yī)院的梅毒診療方案有關(guān)。不同性別之間，男性陽(yáng)性率顯著高于女性，與其他學(xué)者[4, 8]的研究結(jié)果一致。在年齡差異上，≥16歲人群中梅毒陽(yáng)性率隨年齡增長(zhǎng)而升高。年齡≥60歲患者梅毒陽(yáng)性率明顯高于16～39歲性活躍年齡組，與林永前等[8]報(bào)道的一致，一部分原因可能與老人對(duì)性病相關(guān)知識(shí)了解較少，性生活中很少使用安全套，且老年人免疫力偏低，使得梅毒感染率增加，也可能是患者年輕時(shí)感染沒(méi)有徹底治愈，感染TP后，梅毒抗體可存在于人體數(shù)年乃至終生，或是由于所患的基礎(chǔ)疾病使機(jī)體誘導(dǎo)產(chǎn)生類(lèi)脂質(zhì)抗體或抗TP的交叉抗原引起的假陽(yáng)性[12]。有研究顯示，自身免疫性疾病、麻風(fēng)、萊姆病、結(jié)腸癌、生殖器皰疹等疾病可導(dǎo)致梅毒螺旋體抗原血清試驗(yàn)的假陽(yáng)性[13]。在1～15歲的青少年人群中未檢出梅毒陽(yáng)性病例，而在小于1歲的嬰兒中，檢出15例陽(yáng)性，且其母親血清學(xué)檢查均為陽(yáng)性，在隨訪中此15例TRUST滴度均有降低至陰性，提示嬰兒血清中檢測(cè)出的抗體來(lái)源于母體。有研究顯示[14]如果活動(dòng)性孕婦梅毒經(jīng)規(guī)范驅(qū)梅治療的，可使胎傳梅毒發(fā)生率減少97%，新生兒死亡率減少80%。不同科室梅毒陽(yáng)性病例分布情況顯示，全院所有科室均有發(fā)現(xiàn)梅毒陽(yáng)性患者，檢出最多的5個(gè)科室分別是婦科、腫瘤科、胃腸外科、皮膚科、體檢中心，而陽(yáng)性率最高的5個(gè)科室是皮膚科、重癥醫(yī)學(xué)科、血液淋巴科、神經(jīng)內(nèi)科和感染科。梅毒的科室分布與其他地區(qū)綜合醫(yī)院均有不同[8, 15]。陽(yáng)性率最高的科室不是發(fā)現(xiàn)最多的科室，一部分原因可能跟科室門(mén)診量有關(guān)，也可能跟臨床醫(yī)生開(kāi)醫(yī)囑時(shí)的經(jīng)驗(yàn)判斷有關(guān)。因此，認(rèn)為在所有臨床科室進(jìn)行梅毒篩查是很有必要的，不僅可以減少醫(yī)務(wù)人員職業(yè)暴露的風(fēng)險(xiǎn)，而且能及時(shí)地檢出無(wú)癥狀梅毒感染者，有助于及時(shí)診斷治療，減少醫(yī)療糾紛[16]。

化學(xué)發(fā)光法以自動(dòng)化，靈敏度高，操作簡(jiǎn)便，檢測(cè)時(shí)間短，高通量等優(yōu)點(diǎn)在綜合醫(yī)院廣泛使用[2]，但其在檢測(cè)灰區(qū)和低S/CO值時(shí)的假陽(yáng)性也困擾臨床診斷，為避免假陽(yáng)性的出現(xiàn)，對(duì)檢出的S/CO低值樣本需做TPPA確證試驗(yàn)[6, 17]。本研究結(jié)果顯示當(dāng)S/CO在 1.0～5.0時(shí)，TPPA與CLIA結(jié)果的符合率僅78.32%，當(dāng)S/CO>10.0時(shí)，符合率100%。張立娟[18]報(bào)道S/CO在1.0～5.0時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值62.09%，在>5.0～10.0時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值90.08%，當(dāng)S/CO>10. 0時(shí)陽(yáng)性預(yù)測(cè)值100%，與本研究結(jié)果一致。有研究資料顯示，CLIA檢測(cè)梅毒抗體的S/CO值與TPPA的滴度呈正相關(guān)[19]。因此建議將CLIA和TPPA兩種方法結(jié)合使用，特別是在S/CO值≤10.0時(shí)，要用TPPA進(jìn)行確證，避免漏診和誤診，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性，減少醫(yī)療隱患和醫(yī)療糾紛，為患者的診斷治療及健康保駕護(hù)航。

綜上所述，梅毒在不同性別、不同年齡中表現(xiàn)出不同特點(diǎn)，醫(yī)療機(jī)構(gòu)要積極開(kāi)展梅毒的主動(dòng)檢測(cè)和擴(kuò)大篩查。梅毒防治工作不僅要放在性活躍的青壯年群體，同時(shí)要關(guān)注老年人和妊娠婦女，美國(guó)CDC建議所有孕婦在第一次產(chǎn)前檢查時(shí)進(jìn)行篩查，并建議在妊娠晚期和分娩時(shí)對(duì)感染風(fēng)險(xiǎn)增加的婦女進(jìn)行重復(fù)篩查[20]。梅毒血清學(xué)篩查時(shí)，建議結(jié)合兩種方法的檢測(cè)結(jié)果綜合判斷，并結(jié)合臨床癥狀，流行病學(xué)史等進(jìn)行梅毒診斷，做好梅毒的早診斷、早治療，以控制梅毒的流行傳播。