郭建茹 賴小平 李煥彬
摘要:目的 研制含鮮鐵皮石斛、苦杏仁與烏梅的保健食品并評(píng)價(jià)其清咽功能。 方法:用鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片灌胃SD大鼠30 d。以大鼠棉球植入實(shí)驗(yàn)、足趾腫脹實(shí)驗(yàn),小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)對(duì)產(chǎn)品的清咽功效進(jìn)行評(píng)價(jià)。 結(jié)果:該保健食品各項(xiàng)指標(biāo)均符合相關(guān)規(guī)定,其中、高劑量組能夠明顯降低肉芽腫凈量和抑制Dextran T-40引起的大鼠足趾腫脹。 結(jié)論:鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片具有良好的清咽作用,可用于咽喉類疾病的輔助治療。
關(guān)鍵詞:鮮鐵皮石斛;苦杏仁;烏梅;咽喉
咽痛 、咽癢 、干咳等是一種常見的癥候,引起這些癥狀的主要原因是細(xì)菌的侵入或在呼吸系統(tǒng)的內(nèi)部有炎癥發(fā)生[1]。臨床上經(jīng)常應(yīng)用消炎藥和中成藥治療。但對(duì)于許多如吸煙、飲酒導(dǎo)致慢性咽喉炎以及特殊職業(yè)如教師、播音員、導(dǎo)游等職業(yè)患者, 更需采取一定的預(yù)防和保健措施。為了解“鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片”的清咽潤喉作用的效果和安全性,對(duì)其進(jìn)行了動(dòng)物功能試驗(yàn) ,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。
1材料與方法
1.1受試物:鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片,其主要原料為鮮鐵皮石斛、苦杏仁、烏梅(配比為7:2:1),規(guī)格為2.5g/片,樣品置密封陰涼干燥處,供試驗(yàn)備用。人體推薦攝入量為7.5g/人/日,折合到其原料日服用量共為10g/人。
1.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:選用中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心[許可證號(hào)SCXK-(軍)2012-0004]繁殖的180~220gSPF級(jí)SD健康雄性大鼠80只,按體重隨機(jī)分為8組,每組10只,分別進(jìn)行棉球植入實(shí)驗(yàn)(40只)和足趾腫脹實(shí)驗(yàn)(40只);選用北京華卓康生物科技股份有限公司[許可證號(hào)SCXK-(京)2009-0007]繁殖的清潔級(jí)BALB/C健康雄性小鼠50只,按體重隨機(jī)分為5組,每組10只,進(jìn)行小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)。
1.3 劑量選擇與受試物給予方式:受試樣品的人體推薦劑量為7.5g/人/日 (按60kg體重計(jì)),進(jìn)行試驗(yàn)時(shí)去輔料,設(shè)低、中、高三個(gè)劑量組即0.625g/kg·bw/d、1.25g/kg·bw/d、1.875g/kg·bw/d,分別相當(dāng)于人體推薦攝入量2.5倍、5倍、15倍,另設(shè)0g/kg·bw/d組以無菌水代替受試物。受試樣品經(jīng)粉碎后用無菌水配制,低、中、高劑量配制濃度分別為62.5mg/mL、125mg/mL、187.5mg/mL,按1.0mL/100g·bw灌胃。經(jīng)口每日一次給予大、小鼠相應(yīng)濃度的受試樣品,連續(xù)灌胃一個(gè)月后進(jìn)行指標(biāo)測定。
1.4 主要儀器與試劑:HZF-B3000電子天平、BS223S電子天平、BP211D電子天平、恒溫干燥箱、PV-200足趾容積測量儀、打孔器、微量注射器。乙醚、Dextran T-40、二甲苯。
1.5 試驗(yàn)方法:根據(jù)國食藥監(jiān)?;痆2012]107號(hào):清咽功能評(píng)價(jià)方法。
大鼠適應(yīng)環(huán)境3天,按體重隨機(jī)分為Ⅰ、Ⅱ兩個(gè)大組,每個(gè)大組分為4個(gè)劑量組,每個(gè)劑量組10只大鼠。Ⅰ組大鼠進(jìn)行棉球植入實(shí)驗(yàn),Ⅱ組大鼠進(jìn)行足趾腫脹實(shí)驗(yàn)。
小鼠適應(yīng)環(huán)境3天,按體重隨機(jī)分為4個(gè)劑量組,每個(gè)劑量組10只小鼠,進(jìn)行小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)。
1.6試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì):用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。計(jì)量資料采用方差分析,需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn),滿足方差齊要求的數(shù)據(jù),用多個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)對(duì)照組間均數(shù)的兩兩比較方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì);對(duì)非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換,待滿足正態(tài)或方差齊要求后,用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì);若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的,改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
2結(jié)果與分析
2.1對(duì)大、小鼠體重的影響
給予受試物前后,大鼠的體重在受試物組與空白對(duì)照組間比較差異均無顯著性(P>0.05)。小鼠體重在受試物組與模型對(duì)照組間比較及在模型對(duì)照組與空白對(duì)照組間比較,差異均無顯著性(P>0.05)。即鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片對(duì)大、小鼠體重?zé)o不良影響。
2.2對(duì)大鼠肉芽腫形成的影響
由表1可知,經(jīng)口給予大鼠不同劑量的鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片30天后,與空白對(duì)照組比較,受試物中、高劑量組組肉芽腫凈量降低,差異有顯著性(P<0.05)。即鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片在1.25g/kgBW、1.875g/kgBW組能降低棉球植入導(dǎo)致的肉芽腫凈量。
2.3 ?對(duì)大鼠足趾腫脹情況的影響
由表2可見,經(jīng)口給予大鼠不同劑量的鐵皮石斛復(fù)方咀嚼30d后,受試物1.875g/kgBW組與空白對(duì)照組比較,注射Dextran T-40后1h、2h、4h和6h大鼠足趾腫脹率降低,差異均有顯著性(P<0.05)。1.25g/kgBW組與空白對(duì)照組比較,注射Dextran T-40后4h、6h大鼠足趾腫脹率降低,差異均有顯著性(P<0.05)。0.625g/kgBW組與空白對(duì)照組比較,注射Dextran T-40后6h大鼠足趾腫脹率降低,差異均有顯著性(P<0.05)。
2.4 ?對(duì)小鼠耳腫脹實(shí)驗(yàn)的影響
由表3可見,經(jīng)口給予小鼠不同劑量的鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片30d后,模型對(duì)照組與空白對(duì)照組比較,滴加二甲苯30分鐘后耳廓腫脹率顯著提高(P<0.01),即實(shí)驗(yàn)造模成功。受試物1.875g/kgBW組與模型對(duì)照組比較,滴加二甲苯30分鐘后耳廓腫脹率與模型對(duì)照組兩兩比較P值為0.041(P<0.05),但受試物0.625g/kgBW、1.25g/kgBW、1.875g/kgBW與模型對(duì)照組方差分析的P值為0.101(P>0.05),即各組均屬間差異無顯著性。
3結(jié)論
經(jīng)口給予小鼠不同劑量的鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片30d后,與空白對(duì)照組比較,該受試物1.875g/kgBW組能降低肉芽腫凈量(P<0.05),降低注射Dextran T-40后1h、2h、4h和6h大鼠足趾腫脹率(P<0.05);1.25g/kgBW組能降低肉芽腫凈量(P<0.05),降低注射Dextran T-40后4h、6h大鼠足趾腫脹率(P<0.05);0.625g/kgBW組降低注射Dextran T-40后6h大鼠足趾腫脹率(P<0.05)。經(jīng)口給予小鼠不同劑量的鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片30d后,受試物1.875g/kgBW組與模型對(duì)照組比較,滴加二甲苯30分鐘后耳廓腫脹率與模型對(duì)照組兩兩比較P值為0.041(P<0.05),但受試物0.625g/kgBW、1.25g/kgBW、1.875g/kgBW與模型對(duì)照組方差分析的P值為0.101(P>0.05),即各組均屬間差異無顯著性。即鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片未能減少小鼠耳廓腫脹率。該受試物對(duì)大小鼠體重增長均無不良影響。根據(jù)國家食品藥品監(jiān)督管理局國食藥監(jiān)?;痆2012]107號(hào)附件9對(duì)清咽功能評(píng)價(jià)方法的判定標(biāo)準(zhǔn)可知,鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。證實(shí)鐵皮石斛復(fù)方咀嚼片具有抗炎清咽功能,為其抗炎清咽的實(shí)驗(yàn)研究奠定了基礎(chǔ)。
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