一起哺乳仔豬肺部奇異變形桿菌的初步分離鑒定

柯海華，張 軼，高義平

（彭澤縣畜牧獸醫(yī)局，江西九江，332700）

變形桿菌是一種人和動物的寄生菌和病原菌。廣泛分布在自然界中，如土壤、水、垃圾、腐敗有機(jī)物及人或動物的腸道內(nèi)。根據(jù)生化反應(yīng)的不同，可分為普通、奇異、潘尼和產(chǎn)粘液變形桿菌四類。變形桿菌在食物中能產(chǎn)生腸毒素，并且可以使蛋白質(zhì)中的組氨酸脫羧而形成組胺，從而引起胃腸炎或過敏性反應(yīng)。大量變形桿菌在人體內(nèi)生長繁殖也是構(gòu)成食物中毒的主要因素。變形桿菌一般不致病。夏、秋季節(jié)溫度高，變形桿菌在被污染的食物中大量繁殖。食用被污染的食物后2～30h出現(xiàn)上腹部刀絞樣痛和急性腹瀉，伴有惡心、嘔吐、頭痛、發(fā)熱。病程較短，一般1～3d可恢復(fù)，很少有死亡。筆者從一例患病仔豬肺部分離到一株具有遷徙生長現(xiàn)象的菌株，經(jīng)鑒定初步判斷為奇異變形桿菌，現(xiàn)匯報如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 病料。彭澤縣某豬場患病哺乳仔豬，剖檢無菌采集肺臟。

1.1.2 常用設(shè)備。生化培養(yǎng)箱、無菌操作臺、顯微鏡、酒精燈、接種（棒）環(huán)、培養(yǎng)皿、載玻片等。

1.1.3試劑。革蘭氏染色液：草酸銨結(jié)晶紫溶液、碘液、95%酒精溶液、沙黃溶液。微量生化發(fā)酵管：硫化氫溶液、甘露糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、阿拉伯糖、乳糖、枸櫞酸鈉、木糖、吲哚、鳥氨酸脫羧酶等。

1.2 實驗方法

1.2.1 細(xì)菌的分離培養(yǎng)。用接種環(huán)從無菌采集的病料肺臟中鉤菌，劃線接種于血平板，置37℃培養(yǎng)24～48h，觀察并記錄結(jié)果。

1.2.2 細(xì)菌染色鏡檢。用接種環(huán)鉤取可疑菌落，涂片，革蘭氏染色，油鏡鏡檢，觀察并記錄結(jié)果。

1.2.3 細(xì)菌的遷徙實驗。取兩套普通固體瓊脂培養(yǎng)基，在其表面等距滴幾滴無菌蒸餾水，再用無菌接種環(huán)將細(xì)菌接種到清水中，置37℃的恒溫箱中培養(yǎng)18～24h，觀察并記錄菌落的形態(tài)。

1.2.4 細(xì)菌的生化鑒定。將分離純化的可疑變異桿菌菌株，培養(yǎng)16～18h新鮮菌落，用接種環(huán)鉤取單個菌株，分別接種到含有硫化氫溶液、甘露糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、阿拉伯糖、乳糖、枸櫞酸鈉、木糖、吲哚、鳥氨酸脫羧酶的微量生化試驗發(fā)酵管中，置37℃的恒溫箱中培養(yǎng)18～24h，觀察并記錄結(jié)果。

2 試驗結(jié)果

2.1 細(xì)菌分離結(jié)果

普通培養(yǎng)基中長出淡黃色的菌落，且菌落呈擴(kuò)散狀態(tài)生長。沒有劃線的地方也有菌苔形成，同時發(fā)生了溶血現(xiàn)象，打開平皿時有臭味。

2.2 可疑菌株鏡檢結(jié)果

可疑菌落經(jīng)涂片染色鏡檢，均為兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌，多散在，無芽胞和莢膜（見圖1）。

圖1 可疑菌落革蘭氏染色（10×100倍顯微鏡觀察）

2.3 可疑菌株遷徙生長實驗結(jié)果

在固體普通培養(yǎng)基上呈擴(kuò)張性生長，布滿整個平板表面，形成以菌種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的灰白色波紋狀菌苔，呈典型的遷徙生長現(xiàn)象（見圖 2）。

圖2 可疑菌株的遷徙生長現(xiàn)象

2.4 分離細(xì)菌的生長鑒定結(jié)果（見表1）

表1 生化反應(yīng)管實驗結(jié)果

3 小結(jié)與討論

本菌從實驗的結(jié)果推測是奇異變形桿菌，屬于腸桿菌科的變形桿菌屬，為革蘭氏陰性、無芽胞、無莢膜、周身鞭毛、運動活潑、兩端鈍圓的小桿菌。兼性厭氧。在自然界中存在極廣，水、泥土、陰溝及各種腐敗的動、植物中最多，也存在于健康人和動物的腸道中。它們是條件致病菌，在特殊情況下對人致病。如食物中毒、尿路感染、夏季腹瀉或其他混合感染。

由變形桿菌引起的食物中毒一般不必服抗生素，僅需補液、解癥等對癥處理，重癥患者可用氯霉素、諾氟沙星等抗菌藥物。預(yù)防的重點在于加強食品管理，注意飲食和環(huán)境的衛(wèi)生。糞便培養(yǎng)可檢得變形桿菌。血清凝集抗體有助于診斷。本病需與霍亂及副霍亂、急性細(xì)菌性痢疾、病毒性胃腸炎、非細(xì)菌性食物中毒等疾病相鑒別。