類蛋白反應的作用機制及其對海洋源蛋白修飾的研究進展

朱 磊,張馨心,謝艷英,王 浩,夏秀芳

(東北農(nóng)業(yè)大學食品學院,黑龍江哈爾濱 150030)

多肽的氨基酸殘基和鏈構(gòu)型在物理因素(如熱、射線、機械振蕩等)或生化因素(如酶制劑、化學試劑等)的誘導下發(fā)生改變,導致蛋白分子的空間結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)相應變化,被稱為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)修飾。其中,蛋白質(zhì)在蛋白酶作用下結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的酶法修飾,可能賦予蛋白質(zhì)更好的功能和營養(yǎng)特性[1]。酶法修飾主要分為酶解修飾和聚合酶法修飾,而類蛋白反應(Plastein reaction)屬于后者,是指在合適的條件下,蛋白酶誘導高濃度的蛋白水解物通過縮合、轉(zhuǎn)肽和物理聚集等作用,形成新蛋白(沉淀或凝膠狀物質(zhì))的反應,其中凝膠狀物質(zhì)被稱為類蛋白物(Plastein)。在Plastein反應過程中,還可以在酶促脅迫的作用下,添加理想的外源性氨基酸使其合成到新蛋白質(zhì)中,以提高蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值。此外,蛋白水解物中的疏水性氨基酸殘基可以在Plastein反應中被包埋聚集,從而減少蛋白質(zhì)水解物的苦味[2]。

海洋生物蛋白資源作為一種新型蛋白質(zhì)資源,在活性肽開發(fā)方面具有廣闊的前景[3]。已有研究將Plastein反應應用在海洋源蛋白生產(chǎn)加工上。許多海洋生物包括羅非魚[4]、海地瓜[5]、沙蟄[6]等蛋白可以通過Plastein反應修飾來進行改善。目前,Plastein反應在海洋源蛋白應用方面鮮有綜述性報道。

本文綜述了Plastein反應的過程和機制,并著重闡述了Plastein反應在提高海洋源蛋白的活性肽生物活性、改善蛋白的功能性質(zhì)、減少酶解液的苦味等方面的應用。

1 Plastein反應

1.1 Plastein反應過程

Plastein反應基本過程可分為三個反應階段:a.水解,原料蛋白經(jīng)酶水解成濃度較低的蛋白水解物,一般為3%～5%;b.濃縮,將第一階段的蛋白水解物濃縮成較高濃度30%～50%的蛋白濃縮物,該過程通常使用噴霧干燥、冷凍干燥或蒸發(fā)等物理方法;c.合成反應,調(diào)節(jié)一定的pH、溫度,蛋白濃縮物在酶的誘導下形成類蛋白產(chǎn)物,其合成反應中也可加入外源氨基酸進行反應合成。合成反應所用的酶可以與水解過程的酶相同或者不同,且Plastein反應的條件不同,所得到的類蛋白產(chǎn)物也會不同。

1.2 Plastein反應的作用機制

Plastein反應過程十分復雜,到目前為止類蛋白形成機制尚未完全闡明,初步形成的三種解釋Plastein反應的機理包括:縮合反應、轉(zhuǎn)肽作用以及物理聚集。

1.2.1 縮合反應 縮合反應是指通過共價鍵,蛋白水解物中肽和/或氨基酸形成肽鍵,故該反應涉及到化學變化。小肽和氨基酸在酶的催化下,α-羧基和α-氨基通過脫水發(fā)生縮合反應,伴隨著反應體系中游離氨基酸含量的下降,生成了新的高分子量的蛋白質(zhì)或肽[7]。周春霞等[8]以羅非魚下腳料水解物為原料,在胃蛋白酶誘導作用下進行Plastein反應,高效液相色譜和凝膠電泳分析表明類蛋白的合成是一個提高體系分子量的過程,小分子的多肽和氨基酸縮合形成大分子量的蛋白質(zhì);因此,縮合作用在Plastein反應中起到一定的作用。通過核磁共振技術(shù)和質(zhì)譜技術(shù),也能證明Plastein反應中較小疏水肽在蛋白酶的作用下縮合形成肽鍵,產(chǎn)生類蛋白物寡肽[9]。有研究顯示,在底物濃度較高時,Plastein反應主要依賴于縮合反應,而在底物濃度較低時,縮合作用明顯減弱。此外也有研究表明,阻斷Plastein反應前底物肽的氨基和羧基末端,僅略微降低了Plastein反應物產(chǎn)率[10],說明肽縮合是次要作用,可能存在其他的Plastein形成機制。

1.2.2 轉(zhuǎn)肽作用 轉(zhuǎn)肽作用過程中有肽鍵斷裂與形成,導致氨基酸殘基的重新排列,氨基酸殘基從一個肽序列轉(zhuǎn)移到另一個肽序列,可能導致一些肽中疏水性氨基酸殘基的積累,并隨后形成聚集肽。因此,轉(zhuǎn)肽作用也涉及到肽鏈一級結(jié)構(gòu)的改變。如果Plastein反應僅發(fā)生縮合反應,則反應體系中游離氨基總數(shù)應呈現(xiàn)減少的趨勢。然而,1959年Horowitz等[11]研究發(fā)現(xiàn)在類蛋白物形成過程中,使用三種不同的方法測得的游離氨基含量變化不大,但合成反應并未終止。這也從側(cè)面證明了除了縮合反應之外,Plastein反應還存在著其它機制。1972年,Hofsten等[12]研究得出結(jié)論:Plastein反應是一種分子重排過程,其中轉(zhuǎn)肽和水解比縮合反應起更重要的作用,Plastein反應趨向于形成不溶性復合物。Lozano等[13]用胃蛋白酶酶解白蛋白得到的水解物為底物,再加入胰凝乳蛋白酶催化合成類蛋白,在產(chǎn)物中發(fā)現(xiàn)不同分子量的肽片段均有增加,故該反應中起主導作用可能是轉(zhuǎn)肽機制。而將外源性氨基酸添加到Plastein反應中,主要也是通過轉(zhuǎn)肽作用即通過將氨基?；鶜埢鶑墓w肽轉(zhuǎn)移到受體肽而形成類蛋白產(chǎn)物。

1.2.3 物理聚集作用 除了縮合反應和轉(zhuǎn)肽作用,類蛋白的形成也可能與非共價鍵參與的物理聚集作用包括疏水相互作用、氫鍵等有關,而且疏水相互作用在類蛋白形成中至關重要,酶解產(chǎn)物中的疏水性氨基酸在疏水相互作用下被包埋在蛋白質(zhì)內(nèi)部,疏水相互作用越強則越有利于Plastein反應的進行[14]。在Andrews等[10]通過十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和中子小角散射實驗,證明了酪蛋白水解物的Plastein反應是一個可逆熵驅(qū)動的物理聚合反應。Eriksen等[15]也認為熵驅(qū)動的物理聚合在Plastein反應中起主導作用,由疏水相互作用導致不溶性凝膠產(chǎn)物類蛋白形成。也有研究表明由堿性蛋白酶酶解乳清分離蛋白得到的酶解產(chǎn)物,主要也是通過疏水相互作用誘導底物形成凝膠狀物質(zhì)[16]。Jiang等[17]對海地瓜酶解液進行Plastein反應,通過加入十二烷基硫酸鈉破壞底物分子的疏水相互作用,結(jié)果類蛋白產(chǎn)率降低,再次說明疏水相互作用對于Plastein反應產(chǎn)物的形成起著至關重要的作用。此外,又通過加入尿素破壞反應底物中的氫鍵,結(jié)果類蛋白物產(chǎn)量減少,表明氫鍵也在某種程度上影響類蛋白物的形成。

總之,Plastein反應機制比較復雜,目前主要為縮合反應、轉(zhuǎn)肽作用和物理聚集這三種機制,由于Plastein反應的底物是蛋白水解物,故也有學者將酶解反應歸為Plastein反應機制中。而至于哪一種反應機制在合成Plastein反應中占主導作用則由參與反應的底物[18]、溫度[19]、pH[10]、酶等條件決定。有研究表明Plastein反應需要在多種反應共同作用下生成類蛋白產(chǎn)物,Liu等[20]研究了堿性蛋白酶誘導乳清蛋白水解物進行Plastein反應的過程,表明該條件下的肽聚集遵循兩步機制,如圖1所示。

圖1 轉(zhuǎn)肽和疏水性誘導形成類蛋白示意圖[2]Fig.1 The schematic diagram of plasteinformation involving transpeptidation andhydrophobicity-induced peptide aggregation[2]

2 Plastein反應修飾在海洋源蛋白中的應用

海洋生物蛋白資源豐富,而其副產(chǎn)物加工利用也越來越引起廣泛的關注。海洋源蛋白是理想蛋白的原料來源,其制備的生物活性肽具有安全性高、無毒、無副作用等優(yōu)點。但也存在著一定的不足之處,如活性肽生物活性不強、蛋白功能性質(zhì)不理想、酶解液有明顯的苦味等。而Plastein反應能夠提高活性肽的生物活性、改善蛋白質(zhì)的功能特性、去除水解物苦味等。若能將Plastein反應修飾技術(shù)運用到海洋源蛋白加工上,將會給海洋蛋白資源利用帶來新的前景。

2.1 Plastein反應修飾提高海洋蛋白源活性肽的生物活性

制備海洋生物活性肽的主要方法是酶解法,是因為酶解條件溫和、水解過程易控、安全性高且能定位水解產(chǎn)生特定的肽[21]。然而,酶解不能產(chǎn)生新的氨基酸序列,所得多肽序列來源于蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu),是原蛋白質(zhì)氨基酸序列中肽片段的一部分。因此,肽的活性受到原蛋白序列的限制。在Plastein反應合成過程中,轉(zhuǎn)肽和縮合涉及到蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的變化,會導致肽序列改變,可能改變多肽的生物活性。因Plastein反應修飾技術(shù)在改善蛋白肽生物活性方面具有潛在的價值[2],趙新淮課題組對乳鐵蛋白[22-23]、酪蛋白[24-26]和大豆蛋白[27-28]等水解物進行了Plastein反應修飾研究,發(fā)現(xiàn)經(jīng)過Plastein反應修飾后,蛋白肽在抗癌活性、抑菌性、抗氧化活性以及降血壓活性等方面得到提高。而且,酶解產(chǎn)物進行Plastein反應過程中,可以添加某些外源氨基酸合成到類蛋白中,在一定程度上改善修飾產(chǎn)物的活性。據(jù)此,其提出了Plastein反應修飾改善蛋白質(zhì)水解物活性的反應機制——肽分子結(jié)構(gòu)重組機制,如圖2所示。通過Plastein反應修飾海洋源蛋白以提高ACE抑制肽的活性以及增強抗氧化肽的活性等研究已有報道。

圖2 類蛋白反應修飾提高蛋白質(zhì)水解物ACE抑制活性和抗氧化活性的分子機制——肽分子結(jié)構(gòu)重組[29]Fig.2 Suggested molecular mechanism for plastein reaction to enhance the ACE inhibitory or antioxidantactivities of protein hydrolysates——Structural reconstruction of peptide molecules[29]

2.1.1 Plastein反應在改善海洋源蛋白ACE抑制肽活性中的應用 ACE作為一種含鋅肽酰二肽酶,是含一條肽鏈,受氯離子和鋅離子影響活性的糖蛋白[30]。ACE在人體當中主要起到升高血壓的作用,一方面ACE可催化血管緊張素Ⅰ(十肽)水解成八肽的血管緊張素Ⅱ,使血管進一步收縮,血壓升高;另一方面ACE也可催化水解緩激肽而使其失去降壓活性。而ACE抑制肽是一類能夠抑制ACE活性的多肽,在人體中起到降血壓作用[31]。ACE抑制肽的C-端氨基酸和N-端氨基酸都會對ACE活性造成影響。N-端氨基酸性質(zhì)不明顯,而C-端氨基酸的性質(zhì)較明顯,主要為疏水氨基酸,且C-端氨基酸對ACE抑制肽的活性影響最大[32]。有研究表明從海參性腺中提取并純化得到的ACE抑制肽(NAPHMR)通過氫鍵或π鍵與ACE活性中心S2′結(jié)合位點或Zn2+的結(jié)合位點相互作用,從而達到了抑制ACE的效果[33]。

已有多項研究報道利用Plastein反應修飾的方法改變海洋蛋白源多肽的序列結(jié)構(gòu)以增強多肽的ACE抑制活性,為尋找降血壓藥物替代品提供了新的思路。Li等[5]使用海地瓜蛋白酶解物做為原料,以蛋白水解物中游離氨基酸減少量為指標,探究Plastein反應修飾對相應ACE抑制肽的活性影響,并且通過添加外源氨基酸Tyr、Pro、Trp、Phe和Leu進行Plastein反應修飾,發(fā)現(xiàn)添加Pro效果最佳,能顯著提高ACE抑制活性。體系中游離Pro含量在反應后顯著降低,說明Pro有可能結(jié)合到肽鏈中,將Plastein反應修飾物純化后進行質(zhì)譜檢測以及ACE抑制肽數(shù)據(jù)庫分析,得出肽的N-端Pro可能影響ACE結(jié)合位點,從而降低ACE的活性。Jiang等[17]在此基礎上對海地瓜酶解液的Plastein反應修飾機理進行了探究,認為疏水作用和氫鍵對類蛋白的形成起到了關鍵作用,這也為Plastein反應應用于提高蛋白質(zhì)或肽的ACE抑制活性提供了理論依據(jù)。用Plastein反應改性ACE抑制肽過程中,其酶解底物所用的酶可以與Plastein反應合成中的酶不同,韓青等[34]用木瓜蛋白酶酶解牡蠣,得到的牡蠣酶解產(chǎn)物后,在中性蛋白酶誘導下發(fā)生Plastein反應,最佳反應條件為底物質(zhì)量分數(shù)為40%、加酶量1.0%、反應時間2.5 h、反應溫度30 ℃、pH7.0,反應體系的游離氨基酸含量下降,得到的類蛋白產(chǎn)物ACE抑制率比修飾前提高了19%。原料蛋白種類不同,用于Plastein反應合成的酶也不同。車麗輝[6]以大連沙蜇為研究對象,通過添加堿性蛋白酶對沙蜇物酶解的產(chǎn)物進行6 h的Plastein合成反應,其反應體系中游離氨基酸含量下降,經(jīng)Plastein反應修飾后的沙蜇肽體外ACE抑制率顯著提高。

2.1.2 Plastein反應在改善海洋源蛋白抗氧化肽活性中的應用 自由基是人體進行新陳代謝時必不可少產(chǎn)生的一種氧化產(chǎn)物。一旦體內(nèi)自由基過多,則會損傷機體的組織細胞,從而促進衰老或引起其他各種疾病?？寡趸氖蔷哂休^強抑制、延緩脂質(zhì)氧化和免除自由基侵害的功能的肽類。根據(jù)所涉及的化學反應,抗氧化肽主要通過兩種主要機制發(fā)揮其活性:氫原子轉(zhuǎn)移和電子供給[35]。

許多研究結(jié)果表明,Plastein反應能夠增加抗氧化肽的活性,而且添加的酶的種類與外源性氨基酸對其結(jié)果都有著一定的影響。高丹丹等[36]用中性蛋白酶酶解泥鰍蛋白,在此基礎之上用木瓜蛋白酶對得到的酶解產(chǎn)物抗氧化肽進行Plastein反應修飾,通過響應面優(yōu)化篩選出在酶添加量為1782.49 U/g、底物濃度為40%、His添加量為0.5 mmol/g、pH9.0、溫度35 ℃、時間3 h的條件下,酶解產(chǎn)物反應體系中游離氨酸含量下降,Plastein反應修飾產(chǎn)物對DPPH自由基的清除率高達77.98%。王朋[37]的研究也表明,經(jīng)Plastein反應修飾的蛋白具有較好的抗氧化性,在加入1%的胃蛋白酶(按底物重量計)的條件下,金槍魚酶解液在60 ℃反應24 h后,合成的類蛋白溶液的DPPH自由基清除率、羥自由基清除率以及鐵還原能力都明顯增強。而在Plastein反應過程中添加的外源性氨基酸種類,對類蛋白修飾產(chǎn)物的抗氧化性有一定的影響。劉揚[38]以低廉花甲螺波紋巴非蛤為原料對其酶解,得到的酶解液可以通過添加不同外源性氨基酸進行Plastein反應修飾,發(fā)現(xiàn)按重量比3∶7加入Cys和Lys,Plastein反應產(chǎn)物的羥自由基和DPPH自由基清除率有了顯著的提高。有研究發(fā)現(xiàn)沙蜇蛋白酶解液在20 ℃、酶加量2.5 kU/g,底物濃度35%的條件下,使用堿性蛋白酶進行Plastein反應修飾后,其抗氧化活性明顯提高;在此基礎之上,添加兩種外源氨基酸即Pro和Arg酸對沙蜇酶解肽進行Plastein反應改性,Plastein反應修飾物的DPPH的清除率和羥基自由基清除率都有提高[6]。

2.2 Plastein反應改善海洋源蛋白的食品加工性能

蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物具有凝膠性、熱穩(wěn)定性、溶解性、抗凍結(jié)性和乳化性等性質(zhì),可以賦予它們作為食品成分的多種用途。在Plastein反應過程中蛋白質(zhì)在酶促脅迫的作用下產(chǎn)生交聯(lián),從而增加了溶液的粘稠度,提高了產(chǎn)物的流變學性質(zhì),這在生產(chǎn)質(zhì)構(gòu)化食品中具有應用價值。在一定pH范圍內(nèi),由Plastein反應產(chǎn)生的粘稠溶液具有良好的穩(wěn)定性,可作為食品凝膠。有研究者利用Plastein反應修飾海參蛋白水解物合成類蛋白物,通過差式掃描量熱法發(fā)現(xiàn)在Plastein反應修飾后蛋白的熱穩(wěn)定性增強,并且其熱變性溫度從120 ℃增加到134 ℃[17]。而Ono等[39]使用堿性蛋白酶催化魷魚內(nèi)臟蛋白水解物進行Plastein反應制備的類蛋白物,熱穩(wěn)定性提高的同時,溶解性也得到了一定的提升。Kolakowski等[40]使用胰蛋白酶催化歐鳊魚的酶解物,合成的類蛋白物具有凝膠能力以及良好的抗凍性等特點。蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物用作沙拉醬、涂抹醬、冰淇淋、咖啡增白劑和肉制品中的乳化劑,而Plastein反應是一種蛋白酶催化過程,能夠改善蛋白水解產(chǎn)物的乳化能力[41]。Kim等[42]以沙丁魚為研究對象,在沙丁魚水解物中添加外源性氨基酸異亮氨酸,通過木瓜蛋白酶的催化下進行Plastein反應,得到的類蛋白其乳化活性顯著提高。此外,在Plastein反應中通過添加谷氨酸二乙酯,可以提高蛋白水解物的水分散能力和持水能力。

2.3 Plastein反應減少海洋源蛋白酶解液的苦味

海洋生物蛋白質(zhì)水解成小分子多肽,而得到的酶解產(chǎn)物產(chǎn)生的苦味對加工食品風味影響很大,會降低消費者對食品的接受度。目前蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物脫苦的方法,包括外肽酶處理、美拉德反應、Plastein反應和包埋[43]。蛋白水解物肽會在Plastein反應中通過物理聚合作用下發(fā)生聚集,在疏水性誘導下疏水性氨基酸富集在一起以構(gòu)建“疏水核”。疏水性殘基與味蕾上的味覺接收器在空間上存在一定距離,從而達到了脫苦的效果。Plastein反應可以有效減少蛋白水解產(chǎn)物的苦味,且不會對蛋白結(jié)構(gòu)和功能造成破壞。Sukarno等[44]研究發(fā)現(xiàn)虎蝦副產(chǎn)物水解物通過天然酶催化進行Plastein反應,作為引起肽苦味的苯丙氨酸含量從蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物的22.5%下降到14.9%,另外,在固定化酶催化進行Plastein反應后蛋白產(chǎn)物苯丙氨酸含量極低。周春霞等[8]以羅非魚副產(chǎn)物用堿性蛋白酶酶解,得到的酶解液為底物,在胃蛋白酶的作用下進行Plastein反應修飾后,得到的類蛋白產(chǎn)物與未修飾的酶解液相比,風味得到了明顯改善,基本沒有苦味。Suh等[45]將鏈霉蛋白酶水解阿拉斯加鱈魚作為底物,再利用菠蘿蛋白酶催化進行Plastein反應合成,結(jié)果顯示Plastein合成反應顯著降低了鏈霉蛋白酶水解產(chǎn)物的苦味。在底物濃度為30%、pH為6～9范圍內(nèi),魷魚肝胰腺內(nèi)臟蛋白水解物在堿性蛋白酶催化下進行Plastein合成反應修飾后苦味減少,而且不影響烏賊蛋白水解液原有的抗氧化能力[39]。此外,Zhao等[46]在單因素實驗的基礎上運用正交試驗優(yōu)化確定不同的Plastein反應條件對黃鰭金槍魚內(nèi)臟蛋白的苦味影響,確定最佳條件為pH5、底物濃度40%、溫度為42 ℃,黃鰭金槍魚內(nèi)臟蛋白的苦味值顯著降低,并且電子鼻系統(tǒng)測試發(fā)現(xiàn)Plastein反應修飾也能在一定程度上去除腥味。因此,Plastein反應可以用來去除蛋白質(zhì)水解物苦味。

2.4 Plastein反應的其他作用

Plastein反應還具有從漁業(yè)廢物中回收蛋白質(zhì)的潛力。Madzlan等[47]以對蝦加工廠廢水為原料,經(jīng)菠蘿蛋白酶水解24 h后,再經(jīng)Plastein反應合成蛋白產(chǎn)品。以三氯乙酸為沉淀劑時,木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶的類蛋白生成率分別為27.35%和26.77%;而以乙醇沉淀后,木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶的類蛋白率分別為47.46%和45.19%,說明用乙醇沉淀得到的類蛋白率更高。Raghunath等[48]對魚制品廢棄物的進行Plastein反應,用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和糜蛋白酶分別在pH5.0、6～7和8.0下合成類蛋白,其中胃蛋白酶生產(chǎn)類蛋白效率最高,產(chǎn)率可達19.88%。Ooshiro等[49]將Plastein反應應用于沙丁魚的副產(chǎn)物中,對蛋白質(zhì)資源進行回收,其廢棄蛋白回收率為28%,且類蛋白產(chǎn)物經(jīng)乙醇和正己烷處理烘干后,具有良好的蛋白質(zhì)消化率。在Plastein反應中也可添加其他的氨基酸酯,從而改善類蛋白物的氨基酸組成成分,提高食物蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價值。

3 總結(jié)與展望

Plastein反應是蛋白質(zhì)修飾中一種重要的酶促反應,主要通過縮合反應、轉(zhuǎn)肽作用和物理聚集作用對蛋白質(zhì)進行改造。Plastein反應最早是應用于提高食品營養(yǎng)價值和減少酶解液苦味方面,近年來,利用Plastein反應修飾活性肽改善蛋白功能特性的研究興起。Plastein反應過程中需要的溫度和能量比較低,所用試劑都是食品級,因此要優(yōu)于其他蛋白質(zhì)化學改性方法。

海洋功能性多肽食品的發(fā)展,可以提高海洋來源蛋白質(zhì)產(chǎn)品的附加值,并帶動新興功能保健品快速發(fā)展。Plastein反應作為綠色酶法修飾技術(shù),可以應用到海洋功能性多肽食品加工生產(chǎn)中,在功能性食品方面具有良好的應用前景。然而,目前仍然需要對于Plastein反應修飾機理等問題進行深入研究和補充,以期為制備理想型生物活性肽的工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。其次,Plastein反應投入高,但產(chǎn)量低,限制了Plastein反應的商業(yè)應用。需要在工業(yè)規(guī)模上控制該過程,以降低類蛋白的商業(yè)生產(chǎn)應用成本。如了解蛋白酶在Plastein反應形成過程中的特殊作用,設計更有效的蛋白酶(通過改造其結(jié)構(gòu)的特定功能區(qū)域),不僅可以提高Plastein反應產(chǎn)物的產(chǎn)量、降低生產(chǎn)成本,也為固定化蛋白酶進行蛋白質(zhì)水解和類蛋白產(chǎn)物工業(yè)化生產(chǎn)提供依據(jù)。