子宮內(nèi)膜異位癥患者凝血指標(biāo)、炎性因子和氧化應(yīng)激指標(biāo)表達(dá)水平的價值

龍寧 劉躍輝 徐凡 羅岳西 林川 蔣海霞

子宮內(nèi)膜異位癥是一種復(fù)雜綜合征，是育齡女性中非常普遍的疾病，其特征在于雌激素依賴性慢性炎性過程，其主要影響包括卵巢在內(nèi)的盆腔組織，當(dāng)脫落的子宮內(nèi)膜組織逆行進(jìn)入下腹腔時引起[1]。子宮內(nèi)膜異位癥是女性慢性盆腔疼痛的最常見原因，并與不孕癥有關(guān)。有證據(jù)表明，腹膜異位子宮內(nèi)膜病灶可能誘發(fā)局部炎性反應(yīng)，巨噬細(xì)胞的募集，細(xì)胞因子的釋放和活性氧的產(chǎn)生，導(dǎo)致促氧化劑腹膜微環(huán)境[2,3]。這些改變可以系統(tǒng)地反映并且還影響卵泡微環(huán)境。子宮內(nèi)膜異位癥的晚期可能導(dǎo)致婦科惡性腫瘤，如卵巢癌，以及其他并發(fā)癥[4，5]。最近的研究表明，炎性可能與氧化應(yīng)激一起在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮作用[6,7]。本研究對子宮內(nèi)膜異位癥患者的凝血指標(biāo)、炎性因子和氧化應(yīng)激指標(biāo)進(jìn)行檢測，探討其表達(dá)的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年至2019年3月在我院就診的120例子宮內(nèi)膜異位癥患者作為異位癥組，患者均經(jīng)病理檢查確診，其中Ⅰ期35例，Ⅱ期47例，Ⅲ期22例，Ⅳ16例。選取盆腔炎且子宮內(nèi)膜正常患者120例作為對照組。2組平均年齡、體重指數(shù)、經(jīng)量、月經(jīng)周期、經(jīng)期、痛經(jīng)、孕次、產(chǎn)次比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 2組患者一般資料比較 n=120,例(%)

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：①子宮內(nèi)膜異位癥患者均符合“子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南”[8]的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②就診前1個月內(nèi)未進(jìn)行激素或免疫抑制劑治療；③患者神志清楚，無精神疾患；④月經(jīng)規(guī)律；⑤患者和(或)家屬知情同意，并簽署知情同意書。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：①子宮、卵巢先天發(fā)育異常者；②患者懷孕或處于絕經(jīng)期；③有其他重要臟器器質(zhì)性病變：如腫瘤，嚴(yán)重的心臟疾患，肝腎功能障礙，貧血、凝血功能障礙等血液疾病者；④患者有精神疾患，不能配合診療者；⑤患者和(或)家屬不同意進(jìn)行試驗者。

1.3 觀察指標(biāo) 抽取患者清晨空腹肘靜脈血5 ml，置于抗凝管內(nèi)，采用離心機進(jìn)行離心，3 000 r/min，離心10 min，取上清液置于-70℃冰箱內(nèi)保存。

1.3.1 凝血指標(biāo)：采用CS全自動凝血分析儀CS-2100i(希森美康集團(tuán))檢測患者凝血酶原時間(PT)、活化部分凝血酶原時間(APTT)、凝血酶時間(TT)、纖維蛋白原(FIB)和D-二聚體(D-D)水平。

1.3.2 炎性因子：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測2組受檢者白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、糖類抗原125(CA125)水平。試劑盒購自上海酶聯(lián)生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

1.3.3 氧化應(yīng)激：采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測2組受檢者脂質(zhì)過氧化特異性產(chǎn)物8-異前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、人活性氧自由基(ROS)、對氧磷酶-1(PON-1)水平。試劑盒購自上海酶聯(lián)生物技術(shù)有限公司，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 2組凝血指標(biāo)比較 異位癥組PT低于對照組，ATPP、FIB和D-D高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，2組TT水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2.2 2組炎性因子水平比較 異位癥組IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

2.3 2組氧化應(yīng)激水平比較 異位癥組8-iso-PGF2α、ROS水平高于對照組，GSH-Px、PON-1水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表2 2組凝血指標(biāo)比較

組別IL-6(pg/ml)IL-8(pg/ml)MCP-1(pg/ml)TNF-α(pg/ml)CA125(U/ml)對照組 16.92±4.9619.72±5.2622.52±4.1512.45±5.2323.97±13.31異位癥組30.34±5.4328.84±3.7237.27±6.2525.73±3.3873.41±20.34t值19.99015.50721.53723.36222.280P值0.0000.0000.0000.0000.000

組別8-iso-PGF2α(ng/ml)GSH-Px(U/L)ROS(pg/ml)PON-1(pg/ml)對照組 166.73±14.84311.97±12.79328.80±29.05212.13±8.10異位癥組211.89±17.53258.59±16.60484.61±31.29150.54±8.28t值21.53927.90439.97658.247P值0.0000.0000.0000.000

2.4 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥凝血指標(biāo)比較 子宮內(nèi)膜異位癥Ⅲ、Ⅳ期組FIB水平高于Ⅰ、Ⅱ期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期組PT、ATPP、TT水平低于Ⅰ、Ⅱ期組,D-D水平高于Ⅰ、Ⅱ期組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表5。

組別PT(s)ATPP(s)TT(s)FIB(g/L)D-D(mg/L)Ⅰ、Ⅱ期組(n=82)13.37±4.0036.01±6.2315.65±5.083.09±1.001.03±0.42Ⅲ、Ⅳ期組(n=38)12.97±3.5335.16±6.0915.13±5.803.54±1.121.13±0.54t值0.5280.7000.4982.2071.105P值0.5980.4850.6190.0290.271

2.5 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥炎性因子水平比較 Ⅲ、Ⅳ期組IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于Ⅰ、Ⅱ期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表6。

組別IL-6(pg/ml)IL-8(pg/ml)MCP-1(pg/ml)TNF-α(pg/ml)CA125(U/ml)Ⅰ、Ⅱ期組(n=82)17.25±2.5623.62±3.0332.49±2.6321.56±2.6461.23±6.17Ⅲ、Ⅳ期組(n=38)32.37±2.5529.58±3.1539.34±2.8529.74±2.9380.26±13.41t值30.1349.89919.34915.24510.114P值0.0000.0000.0000.0000.000

2.6 不同分期氧化應(yīng)激水平比較 Ⅲ、Ⅳ期組8-iso-PGF2α、ROS水平高于Ⅰ、Ⅱ期組，GSH-Px、PON-1水平低Ⅰ、Ⅱ期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表7。

組別8-iso-PGF2α(ng/ml)GSH-Px(U/L)ROS(pg/ml)PON-1(pg/ml)Ⅰ、Ⅱ期組(n=82)197.89±12.42253.59±12.26419.54±27.34163.21±9.28Ⅲ、Ⅳ期組(n=38)219.49±10.68248.50±11.34501.25±26.58125.67±7.13t值9.2482.16515.36222.081P值0.0000.0320.0000.000

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥是一種常見的婦科疾病，影響著全世界數(shù)百萬女性，其癥狀包括痛經(jīng)，慢性盆腔疼痛和不孕癥[9]。理論上，由于月經(jīng)逆行現(xiàn)象，子宮內(nèi)膜異位癥的診斷通常會延遲8～10年，因為青少年女孩和年輕女性的癥狀經(jīng)常被誤診[10]。一項薈萃分析發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜異位癥在健康相關(guān)生活質(zhì)量評分(QoL)的所有領(lǐng)域都有負(fù)面影響，，其還對睡眠質(zhì)量和感知壓力產(chǎn)生負(fù)面影響[11]。隨著早期月經(jīng)初潮相關(guān)的年輕女孩子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病率增加，診斷生物標(biāo)志物的開發(fā)對于診斷和治療子宮內(nèi)膜異位癥患者是必不可少的。本研究對子宮內(nèi)膜異位癥患者的凝血指標(biāo)、炎性因子和氧化應(yīng)激指標(biāo)進(jìn)行檢測，探討其表達(dá)的臨床意義。

3.1 凝血指標(biāo) 子宮內(nèi)膜異位癥患者被改變凝血因子、激活血小板處于高凝狀態(tài)[12]。Wu等[13]研究發(fā)現(xiàn)，與對照組比較，子宮內(nèi)膜異位癥患者的APTT和TT明顯縮短，纖維蛋白原水平升高，它們還具有顯著更高的循環(huán)脫粒血小板百分比，并且在手術(shù)切除子宮內(nèi)膜異位病變后1個月顯著降低百分比，這些發(fā)現(xiàn)提供了子宮內(nèi)膜異位癥女性高凝狀態(tài)的證據(jù)，反映凝血和炎性之間的密切關(guān)系，同時他們還建議這些凝血參數(shù)如APTT和纖維蛋白原等可用于診斷或預(yù)后。本研究發(fā)現(xiàn)，異位癥組PT低于對照組，ATPP、FIB和D-D高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，2組TT水平比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。子宮內(nèi)膜異位癥Ⅲ、Ⅳ期組FIB水平高于Ⅰ、Ⅱ期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期組PT、ATPP、TT水平低于Ⅰ、Ⅱ期組,D-D水平高于Ⅰ、Ⅱ期組，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。說明，子宮內(nèi)膜異位癥患者處于高凝狀態(tài)，但除外FIB外，其余指標(biāo)在不同分期間無明顯差別，這可能與局部凝血系統(tǒng)發(fā)揮作用有關(guān)[14]。

3.2 炎性因子 炎性在子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機制中起作用。盡管在許多病例對照研究中的研究人員發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥患者的炎性標(biāo)志物升高，但結(jié)果并不一致，并且沒有先前的前瞻性研究存在[2,3]。Mu等[15]對350例子宮內(nèi)膜異位癥患者和694例健康對照患者進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病與可溶性腫瘤壞死因子α受體2水平的顯著非線性關(guān)聯(lián)，在濃度>3 400 pg/ml時子宮內(nèi)膜異位癥的風(fēng)險升高。Fan等[16]研究發(fā)現(xiàn)，IL-37、IL-17A、IL-10和IL-2可能在子宮內(nèi)膜異位癥的免疫應(yīng)答中起重要作用。本研究發(fā)現(xiàn)，異位癥組IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期組IL-6、IL-8、MCP-1、TNF-α和CA125水平均高于Ⅰ、Ⅱ期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。說明炎性可能與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

3.3 氧化應(yīng)激 ROS的過量釋放通過調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)活性和基因表達(dá)誘導(dǎo)細(xì)胞損傷并改變細(xì)胞功能，導(dǎo)致有害作用。氧化應(yīng)激目前被認(rèn)為是子宮內(nèi)膜異位癥相關(guān)炎性的主要參與者，通過月經(jīng)回流和巨噬細(xì)胞移植到腹膜腔中的紅細(xì)胞，凋亡子宮內(nèi)膜組織和細(xì)胞碎片都被認(rèn)為是氧化應(yīng)激的潛在誘導(dǎo)劑，在此期間過量產(chǎn)生活性氧物質(zhì)(繼發(fā)于血紅素和鐵等促氧化劑的腹膜內(nèi)流)可通過核因子-κB活化誘導(dǎo)細(xì)胞損傷和增加的促炎基因表達(dá)[17，18]。研究發(fā)現(xiàn)，在子宮內(nèi)膜異位癥的嚴(yán)重階段，SOD和谷胱甘肽過氧化物酶的中位活性最低，而在血液和腹膜液樣品中子宮內(nèi)膜異位癥的嚴(yán)重階段，脂質(zhì)過氧化物的中值活性最高，隨著子宮內(nèi)膜異位癥的嚴(yán)重程度增長，氧化應(yīng)激水平在統(tǒng)計學(xué)上顯著增加[19]。本研究發(fā)現(xiàn)，異位癥組8-iso-PGF2α、ROS水平高于對照組，GSH-Px、PON-1水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Ⅲ、Ⅳ期組8-iso-PGF2α、ROS水平高于Ⅰ、Ⅱ期組，GSH-Px、PON-1水平低Ⅰ、Ⅱ期組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。說明氧化應(yīng)激反應(yīng)參與了疾病的發(fā)生發(fā)展。

本研究發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜異位癥患者血液呈高凝狀態(tài)，機體出現(xiàn)炎性表達(dá)和氧化應(yīng)激反應(yīng)，且隨著臨床分期增加而相應(yīng)變化，說明炎性因子和氧化應(yīng)激可能參與到子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展過程中。