急性腦梗死患者血漿CD147水平與神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系

鄭海建 劉廣嵐 秦華 王麗 李玉芹

急性腦梗死(acute cerebral infarction，ACI)又稱急性缺血性腦卒中，是常見(jiàn)和多發(fā)的血栓性疾病，具有高發(fā)病率、高病死率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率的特點(diǎn)，給社會(huì)和家庭帶來(lái)巨大的壓力和沉重的負(fù)擔(dān)。目前研究證實(shí)免疫應(yīng)答/炎性反應(yīng)貫穿于缺血性腦卒中的整個(gè)發(fā)病過(guò)程，在其發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著雙刃劍的作用[1]。CD147是一種細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子，它作為炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)的主要介質(zhì)，在腦缺血發(fā)生后大腦中CD147表達(dá)增加，并且通過(guò)驅(qū)動(dòng)血栓形成和炎性反應(yīng)，促進(jìn)缺血性腦卒中病情進(jìn)展[2]。已有研究認(rèn)為血CD147水平可反映動(dòng)脈粥樣硬化病變的嚴(yán)重程度，與腦梗死的發(fā)生和進(jìn)展程度有關(guān)[3]。本研究通過(guò)觀察分析ACI患者血漿CD147水平及其與神經(jīng)功能缺損嚴(yán)重程度的相互關(guān)系，評(píng)價(jià)血漿CD147檢測(cè)在ACI中的臨床意義，為腦梗死的早期診斷、治療及預(yù)后判斷提供參考。

1 對(duì)象和方法

1.1 觀察對(duì)象選擇2015年6月至2016年6月贛榆區(qū)人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院治療的ACI患者79例(ACI組)，其中男45例、女34例，年齡范圍34～91歲，平均年齡(65.39±12.02)歲。此組患者均有高血壓病病史，無(wú)吸煙及飲酒史；納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往無(wú)腦卒中病史；(2)發(fā)病72h內(nèi)就診；(3)急性ACI診斷均符合中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2014的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。入選者均為大動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)存在急性炎性反應(yīng)、腫瘤、糖尿病、嚴(yán)重心、肝、腎及血液系統(tǒng)疾?。?2)手術(shù)及外傷史；(3)彌漫性肌肉疾病史；(4)自身免疫性疾病。

對(duì)照組：選自同期門診體檢者37例，男19例、女18例，年齡范圍44～92歲，平均年齡(57.32±11.67)歲。納入及排除標(biāo)準(zhǔn)：體格檢查中無(wú)腦血管病證據(jù)和(或)頭顱MRI/CT檢測(cè)正常者，須排除患冠心病、糖尿病、腫瘤、嚴(yán)重肝、腎疾病及自身免疫性疾病，但允許有高血壓病史。

1.2 方法

1.2.1標(biāo)本采集：受試者均隔夜禁食12 h，于清晨安靜狀態(tài)下留取空腹靜脈血共取血10 mL。5 mL用EDTA抗凝靜置，1 h內(nèi)以3000 r/min離心10 min，保留血漿并放入-80℃冰箱保存；5 mL注入生化專用的試管，分離血清，以西門子ADvia2400全自動(dòng)生化分析儀同批測(cè)定血清三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)水平。

1.2.2血漿CD147水平測(cè)定：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血漿CD147水平，試劑盒由上海吉爾頓生物科技有限公司提供，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書操作，使用芬蘭雷勃MK3酶標(biāo)儀檢測(cè)。

1.2.3神經(jīng)功能缺損程度評(píng)估：根據(jù)美國(guó)國(guó)立衛(wèi)生研究院腦卒中量表(National Institute of Health Stroke Scale，NIHSS)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)估[5]。參考Brott等[6]的標(biāo)準(zhǔn)，按入院NIHSS評(píng)分分為輕度神經(jīng)功能缺損組(NIHSS評(píng)分<8 分)和重度神經(jīng)功能缺損組(NIHSS評(píng)分≥8分)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS19.0軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)；符合正態(tài)分布的計(jì)量資料(年齡、TC、LDL、CD147)采用Pearson相關(guān)分析，非正態(tài)分布計(jì)量資料(TG)采用Spearman相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料及ACI患者危險(xiǎn)因素比較具體見(jiàn)表1。與對(duì)照組比較，ACI組性別、高血壓病史患者以及TC、TG水平兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，ACI組的年齡、LDL、CD147水平均高于其對(duì)照組(P=0.001、0.009、0.000)。

2.2 ACI組患者NIHSS評(píng)分與血漿CD147水平的比較NIHSS評(píng)分<8分組血漿CD147水平明顯低于NIHSS評(píng)分≥8分組〔(526.48±143.02)pg/mL比(761.02±150.56)pg/mL，t=-7.103，P=0.000〕。

2.3 ACI組患者CD147水平與一般資料及NIHSS評(píng)分的相關(guān)性CD147水平與NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)(r=0.749，P=0.000)，與年齡(r=0.087，P=0.447)、LDL水平(r=0.135，P=0.234)、TC水平(r=0.092，P=0.420)、TG水平(r=-0.063，P=0.480)均無(wú)相關(guān)性。

表1 兩組一般資料及ACI危險(xiǎn)因素比較

注：ACI：急性腦梗死；TG：三酰甘油；TC：總膽固醇；LDL：低密度脂蛋白

3 討論

ACI是腦血管病中最主要的類型，約占全部腦血管病的75%左右。ACI主要因腦部供血?jiǎng)用}發(fā)生粥樣硬化與血栓形成，導(dǎo)致血管管腔狹窄或者閉塞，造成局灶性腦供血不足，從而引發(fā)神經(jīng)功能損傷，造成殘疾和死亡[7]。NIHSS可以評(píng)估語(yǔ)言、認(rèn)知、視野、共濟(jì)、運(yùn)動(dòng)及感覺(jué)等神經(jīng)功能的變化，是一種廣泛應(yīng)用于評(píng)估急性缺血性卒中的嚴(yán)重程度的神經(jīng)損害評(píng)估量表[5]?，F(xiàn)有研究已證實(shí)，急性缺血性卒中患者NIHSS評(píng)分在一定程度上與血管閉塞密切相關(guān)[8]。國(guó)內(nèi)許曉敬等[9]研究表明，在考慮臨床評(píng)估時(shí)間的基礎(chǔ)上，NIHSS評(píng)分作為近端大動(dòng)脈閉塞的一種預(yù)測(cè)工具具有較高的有效性。國(guó)外Sato等[10]研究提示，與后循環(huán)急性卒中相比NIHSS評(píng)分預(yù)測(cè)前循環(huán)急性卒中動(dòng)脈閉塞更有效。

ACI的確切發(fā)病機(jī)制尚不明確，近年來(lái)研究證實(shí)，血中多項(xiàng)炎性反應(yīng)標(biāo)志物水平檢測(cè)可用于ACI的早期診斷、病情評(píng)估以及預(yù)后判斷[11]。研究發(fā)現(xiàn)，急性ACI患者中，炎性指標(biāo)和頸動(dòng)脈粥樣硬化存在相關(guān)性，外周血中高濃度的炎性標(biāo)記物能促使局部血栓形成，并且腦缺血事件的發(fā)生與特定時(shí)間點(diǎn)的炎性水平密切相關(guān)[12]。

血脂代謝異常在動(dòng)脈硬化形成的過(guò)程中具有重要作用，與ACI的發(fā)病有密切的關(guān)系。研究表明血LDL水平不但與動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的發(fā)生及發(fā)展有關(guān)，而且在ACI的發(fā)生和發(fā)展中扮演了重要的作用[13]。本研究結(jié)果顯示ACI組LDL水平高于對(duì)照組，與以往研究結(jié)果一致。

目前研究證據(jù)表明，炎性反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死中有著重要的作用，過(guò)多的炎性細(xì)胞大量分泌金屬基質(zhì)蛋白，參與動(dòng)脈粥樣斑塊破潰后急性并發(fā)癥的形成，成為動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死發(fā)生的重要原因。國(guó)內(nèi)研究報(bào)道CD4+CD28-T細(xì)胞作為炎性細(xì)胞參與了ACI急性期炎性反應(yīng)，且在一定程度上反映病情的嚴(yán)重程度[14]。而作為本研究中的主要炎性指標(biāo)，CD147為細(xì)胞外金屬基質(zhì)蛋白的誘導(dǎo)物，它廣泛表達(dá)在多種細(xì)胞類型中，包括造血細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、白細(xì)胞、角化細(xì)胞、血小板等，并在血栓形成和炎性反應(yīng)中扮演了重要角色。近年來(lái)研究表明，CD147在單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞過(guò)程中表達(dá)上調(diào)，誘導(dǎo)分泌基質(zhì)金屬蛋白酶，促進(jìn)單核細(xì)胞的分化和遷移，并介導(dǎo)動(dòng)脈硬化進(jìn)程中的細(xì)胞激活和分化，血小板活化、粥樣斑塊不穩(wěn)定、血管新生等多種病理過(guò)程，從而促使斑塊不穩(wěn)定，導(dǎo)致ACI的發(fā)生[15]。國(guó)內(nèi)尹澤黎等[16]研究報(bào)道CD147在ACI患者表達(dá)增高，并可能成為進(jìn)展型腦梗死的檢驗(yàn)預(yù)測(cè)靶點(diǎn)。本研究分析顯示ACI患者血漿中CD147水平明顯高于對(duì)照組，表明ACI患者體內(nèi)血漿中CD147表達(dá)明顯增加，此指標(biāo)的高表達(dá)提示其可能參與了ACI的發(fā)生和發(fā)展。此外，國(guó)外研究報(bào)道，在短暫的腦動(dòng)脈阻塞后，缺血性腦內(nèi)內(nèi)皮細(xì)胞中CD147的表達(dá)迅速增加，并且通過(guò)抑制CD147水平從而可降低梗死面積，改善神經(jīng)功能缺失程度[2]。抑制CD147水平可通過(guò)以下機(jī)制發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用：(1)阻止血腦屏障損傷，(2)減少血管內(nèi)的纖維蛋白和血小板沉積，從而減少血栓形成和增加腦灌注，(3)減少腦部炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)。本研究將ACI組患者進(jìn)行NIHSS評(píng)分，比較不同評(píng)分組別的血漿CD147水平變化，NIHSS評(píng)分≥8分組的血漿CD147水平明顯高于NIHSS評(píng)分<8分組(P>0.05)。相關(guān)分析結(jié)果顯示CD147水平與NIHSS評(píng)分呈正相關(guān)，提示血漿中的CD147水平越高，神經(jīng)功能缺損越重，表明血漿中CD147水平升高與ACI的病情發(fā)展及炎性反應(yīng)程度相關(guān)，血漿中CD147水平越高，ACI患者病情越重，兩者在ACI評(píng)估病情嚴(yán)重程度方面具有一致性。

綜上所述，ACI患者血漿中的CD147水平與神經(jīng)功能缺損程度密切相關(guān)，檢測(cè)其水平對(duì)于病情評(píng)估和預(yù)后判斷具有重要的意義。由于本研究未對(duì)ACI患者的CD147水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)觀察，有關(guān)的確切發(fā)病機(jī)制及與其他急性期蛋白的關(guān)系需在今后進(jìn)一步研究。