廣東省人類精子庫(kù)捐精志愿者TORCH檢測(cè)結(jié)果分析

鐘愷欣 張欣宗 葉桂芳 伍欣 林維新 錢(qián)潔友 王奇玲

TORCH是可引起宮內(nèi)感染而導(dǎo)致新生兒畸形或發(fā)育異常的一組病原體的英文名稱縮寫(xiě)，其中T(Toxoplasma，TOX)是弓形蟲(chóng)，O(Other)是其它病原體，R(Rubella virus，RV)是風(fēng)疹病毒，C(Cytomegalovirus，CMV)是巨細(xì)胞病毒，H(Herpes simplex virus，HSV)是單純皰疹病毒[1]。孕婦感染TORCH后，病原體可通過(guò)胎盤(pán)及產(chǎn)道進(jìn)入胎兒身體，引起宮內(nèi)感染和新生兒感染，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、胎兒畸形及胎兒發(fā)育障礙等各種結(jié)果[2]。人體感染TORCH后能產(chǎn)生特異性抗體，IgM抗體陽(yáng)性提示機(jī)體近期感染，而IgG抗體陽(yáng)性是既往感染的標(biāo)志，表明機(jī)體有一定免疫力，傳播感染的風(fēng)險(xiǎn)較小。因此，為做好優(yōu)生優(yōu)育工作，降低新生兒的出生缺陷率，提高人口素質(zhì)，TORCH的檢測(cè)十分必要。TORCH相關(guān)病原體可通過(guò)多種方式傳播，如飛沫傳播、接觸傳播等[3]，在臨床實(shí)踐中，男性也會(huì)感染TORCH。按照《人類精子庫(kù)基本標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范》中的健康檢查標(biāo)準(zhǔn)，人類精子庫(kù)必須對(duì)捐精志愿者進(jìn)行TORCH檢測(cè)?，F(xiàn)對(duì)廣東省人類精子庫(kù)2 808例捐精志愿者的TORCH檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析。

對(duì)象與方法

一、研究對(duì)象

研究對(duì)象來(lái)源于2016年1月至2018年6月在廣東省人類精子庫(kù)接受捐精篩查的2 808例捐精志愿者。入選標(biāo)準(zhǔn)是精液篩查結(jié)果達(dá)到人類精子庫(kù)捐精標(biāo)準(zhǔn)，后抽血進(jìn)行傳染病、性傳播性疾病、優(yōu)生四項(xiàng)和遺傳性疾病等檢測(cè)。本研究通過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)審查后開(kāi)展。

二、方法

1.TORCH檢測(cè)方法：采集志愿者靜脈血5 ml，3000 r/min離心10 min，取血清；未及時(shí)檢測(cè)的標(biāo)本置-20℃保存。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)TORCH相應(yīng)特異性抗體IgM。

2.儀器和試劑：所用儀器為T(mén)ECAN全自動(dòng)酶標(biāo)儀；試劑由亞特斯生物醫(yī)學(xué)技術(shù)(無(wú)錫)有限公司生產(chǎn)，實(shí)驗(yàn)步驟均嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

3.志愿者TORCH篩查方案：根據(jù)人類精子庫(kù)采集部門(mén)相關(guān)SOP，如果捐精志愿者初次TORCH檢查結(jié)果異常，則根據(jù)以下原則進(jìn)行處理： HSV-IgM抗體陽(yáng)性的志愿者直接淘汰；其余三項(xiàng)陽(yáng)性者在不用藥干預(yù)的情況下，一個(gè)月后抽血復(fù)查。復(fù)查結(jié)果再次陽(yáng)性者，一個(gè)月后還可再次復(fù)查。針對(duì)兩次復(fù)查陽(yáng)性的志愿者，我們會(huì)建議其去男科門(mén)診咨詢醫(yī)師。復(fù)查結(jié)果陰性且其他結(jié)果正常者可合格捐精。

4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用 SPSS 21.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。TORCH感染情況計(jì)算陽(yáng)性率，復(fù)查后轉(zhuǎn)陰情況計(jì)算自然轉(zhuǎn)陰率。率的比較采用卡方檢驗(yàn)，P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

18例HSV陽(yáng)性志愿者直接淘汰，占比15.3%(18/118)；另有17例TORCH抗體陽(yáng)性志愿者因G6PD缺乏、肝炎病毒或地中海貧血篩查等結(jié)果異常而淘汰，占比14.4%(17/118)；25例志愿者不愿回來(lái)復(fù)查，放棄捐精，占比21.2%(25/118)。其中55例志愿者(TOX 11例、RV 18例、CMV 23例、TOX和RV兩項(xiàng)陽(yáng)性3例)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)回來(lái)復(fù)查，另外有3例志愿者(TOX 1例、CMV 1例、TOX和CMV兩項(xiàng)陽(yáng)性1例)在初次抽血檢測(cè)半年后回來(lái)復(fù)查。

一、志愿者初次TORCH感染情況

共2 808例志愿者抽血檢測(cè)了TORCH IgM抗體，118例檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性，陽(yáng)性率為4.2%。其中有16例兩項(xiàng)同時(shí)陽(yáng)性， TOX、RV、CMV、HSV的感染率分別為0.9%、1.3%、1.9%、0.6%。TORCH各病原體的感染情況見(jiàn)表1，RV、CMV感染率相對(duì)較高。

表1 篩選期2 808例志愿者TORCH感染情況Table 1 TORCH infection in 2808 volunteers in the screening period

二、志愿者復(fù)查T(mén)ORCH感染情況

有58例初次TORCH抗體陽(yáng)性的志愿者一個(gè)月后參加第一次復(fù)查，復(fù)查比例分別為T(mén)OX 61.5%、RV 58.3%、CMV 46.3%。志愿者第一次復(fù)查T(mén)ORCH結(jié)果如表2所示。TOX、RV、CMV抗體的自然轉(zhuǎn)陰率分別為50.0%、42.9%、20.0%。有16例志愿者第一次復(fù)查結(jié)果陽(yáng)性后進(jìn)行了第二次復(fù)查。結(jié)果如表2所示，TOX、RV、CMV抗體的轉(zhuǎn)陰率分別為0、16.7%(1/6)、0。

經(jīng)過(guò)兩次復(fù)查后，總自然轉(zhuǎn)陰率分別為T(mén)OX 50.0%、RV 47.6%、CMV 20.0%。最終有15例志愿者因TORCH陽(yáng)性淘汰。

表2 初次檢測(cè)抗體陽(yáng)性后復(fù)查情況Table 2 Reexamination after initial antibody test

各項(xiàng)目第二次復(fù)查轉(zhuǎn)陰率與第一次復(fù)查相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

討 論

有研究報(bào)道TORCH多為隱性感染，感染時(shí)人體常無(wú)明顯臨床癥狀。但TORCH病原體可通過(guò)胎盤(pán)和產(chǎn)道傳染給胎兒和新生兒，可能導(dǎo)致早產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、胎兒畸形、胎兒發(fā)育異常等多種不良妊娠結(jié)局[4,5]。母親孕期感染TORCH后有幸存活下來(lái)的新生兒，也常出現(xiàn)生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、神經(jīng)缺陷、先天性心臟病、視力、聽(tīng)力障礙、智力發(fā)育不全及皰疹等疾病[6]。TORCH四種常見(jiàn)病原體均可寄宿于孕婦體內(nèi)，通過(guò)干擾細(xì)胞遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定性產(chǎn)生致畸效果[7]。妊娠期婦女由于內(nèi)分泌改變和免疫功能減弱，容易受到病原體感染。另外，對(duì)于曾經(jīng)感染過(guò)TORCH的孕婦來(lái)說(shuō)，其體內(nèi)潛伏的病毒更容易被激活而導(dǎo)致復(fù)發(fā)感染[8]。CMV可通過(guò)各種途徑傳播，在包括精液等多種體液中可檢測(cè)到病原體[3]。有研究報(bào)道，TORCH感染會(huì)使男性患者精液質(zhì)量下降以及損傷精子DNA的完整性[9-11]。TORCH檢測(cè)是優(yōu)生優(yōu)育的重要檢測(cè)項(xiàng)目之一，在降低胎兒感染率和出生缺陷率等方面具有重要意義[2]。因各地區(qū)的經(jīng)濟(jì)、文化和生活環(huán)境不同，TORCH感染率存在地區(qū)差異，文獻(xiàn)報(bào)道成都地區(qū)感染率為12.02%[12]，包頭地區(qū)為5.38%[13]，天津地區(qū)為5.84%[14]。作為供精輔助生殖技術(shù)精源的提供者，人類精子庫(kù)常規(guī)對(duì)志愿者進(jìn)行TORCH篩查。廣東省人類精子庫(kù)捐精志愿者TORCH感染率為4.2%，與江西省人類精子庫(kù)報(bào)道的3.9%相近[15]。

隨著輔助生殖技術(shù)的不斷發(fā)展，臨床對(duì)供精精液的需求不斷增加，但近年不少報(bào)道顯示人類精子庫(kù)捐精志愿者合格率逐漸降低，志愿者招募困難，出現(xiàn)了供精精液供不應(yīng)求的局面[16-17]。湖南省人類精子庫(kù)志愿者精液篩查合格率僅為21.3%[18]。捐精志愿者精液、血液各項(xiàng)檢查均須達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)才能合格捐精。張欣宗等[19]研究結(jié)果顯示，廣東省人類精子庫(kù)精液質(zhì)量篩查合格的志愿者占所有志愿者的32.1%，而本研究結(jié)果顯示TORCH感染占精液質(zhì)量篩查合格志愿者的4.2%，對(duì)于僅TOX、RV、CMV等一過(guò)性感染的志愿者，在抗體轉(zhuǎn)陰后可捐精。

本研究對(duì)廣東省人類精子庫(kù)捐精志愿者TORCH IgM抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果顯示經(jīng)兩次復(fù)查后TOX、RV、CMV分別有50.0%、47.6%、20.0%自然轉(zhuǎn)陰，總轉(zhuǎn)陰率為37.1%，考慮可能為本研究復(fù)查人數(shù)較少，比劉善忠[20]報(bào)道的9.8%高。有研究表明，對(duì)TOX感染的病人使用乙酰螺旋霉素，RV感染使用病毒靈，CMV感染使用更昔洛韋治療后，復(fù)查T(mén)ORCH IgM抗體總轉(zhuǎn)陰率有98.9%[20]，甚至可達(dá)100%[21]。用藥治療一療程為7-14d，停藥兩周后復(fù)查，與本精子庫(kù)現(xiàn)行復(fù)查方案相比，復(fù)查間隔時(shí)間為一個(gè)月，兩種方案所需時(shí)間一樣，但用藥治療的抗體轉(zhuǎn)陰率比自然轉(zhuǎn)陰率高很多。由此看出，對(duì)TORCH感染的患者進(jìn)行抗病毒治療，可起到很好的效果。

綜上所述，建議人類精子庫(kù)可考慮對(duì)第一次復(fù)查T(mén)ORCH IgM抗體陽(yáng)性的捐精志愿者給予相應(yīng)藥物治療，以提高捐精志愿者的合格率，減少志愿者流失。