中藥材陽(yáng)雀花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

劉 艷 張 慧 曲曉明 晏祥杰

貴州省六盤水市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)所，貴州 六盤水 553001

陽(yáng)雀花為豆科錦雞兒屬植物錦雞兒Caraganasinica(Buc’hoz.)Rehd.的干燥根[1]。別名：金雀花、土黃芪、黃棘等。其味甘、辛、微苦，性平，具補(bǔ)肺健脾、活血祛風(fēng)的功效，主治高血壓、虛勞倦怠、肺虛久咳、婦女血崩、白帶、乳少、風(fēng)濕骨痛、痛風(fēng)、半身不遂、跌打損傷。生于山坡、路旁、林下或灌木叢中，分布于河北、新疆、山東、江蘇、浙江、江西、福建、河南、湖南、四川、云南和貴州等地[2]。文獻(xiàn)報(bào)道該植物中主要含有黃酮、二苯乙烯、萜類、甾體等化學(xué)成分[3-5]，臨床主要用于治療高血壓、乳腺增生及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等[6-8]，為貴州民族藥，侗族人稱尚怒陽(yáng)雖[9]。收載于《上海市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1994年版及《湖南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》2009年版，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚不完善。《中國(guó)藥典》2015年版及《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版中均未收載。按照《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2013版標(biāo)準(zhǔn)研究課題的要求，對(duì)該品種分別從藥材性狀、顯微特征、薄層鑒別、檢查等方面進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，為陽(yáng)雀花的合理應(yīng)用和質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 材料與儀器

1.1 藥材 陽(yáng)雀花藥材采自貴州省六盤水市、安順市、興義市、畢節(jié)市、貴陽(yáng)市、銅仁、凱里、都勻、遵義、威寧等地，經(jīng)貴陽(yáng)中醫(yī)藥大學(xué)周漢華副教授鑒定為豆科錦雞兒屬植物錦雞兒Caraganasinica(Buc’hoz)Rehd.的干燥根。

1.2 試藥與試劑 β-谷甾醇對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)110851-200403)，試劑均為分析純，實(shí)驗(yàn)用水均為自制二級(jí)純凈水。

1.3 儀器 LEICA DM500生物顯微鏡(德國(guó)萊卡儀器公司),電子天平(梅特勒托利多儀器(上海)有限公司)，SB-5200DTDN超聲波清洗器(寧波新芝生物科技有限公司)，HGZH-H-138電熱恒溫干燥箱(上海躍進(jìn)醫(yī)療器械有限公司)，ZF-2型暗箱式紫外分析儀(上海安亭電子儀器廠)。

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀 本品呈圓柱形，有時(shí)稍彎曲，長(zhǎng)短不一，直徑0.5～2.0 cm，表面紅棕色或紫棕色，有不規(guī)則縱溝和橫裂紋，并有棕色橫長(zhǎng)皮孔，其長(zhǎng)可達(dá)1.5 cm，根兩端有棉毛樣纖維束外露，較細(xì)的有須狀支根。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，不易折斷，折斷面纖維性強(qiáng)，橫切面黃白色，皮部寬，木部較小，射線細(xì)密。有豆腥氣，味微苦。如圖1所示。

2.2 顯微鑒別

2.2.1 根橫切面顯微特征 橫切面呈圓形，木栓層由數(shù)列排列緊密的木栓細(xì)胞組成，黃棕色。皮層較窄，外側(cè)薄壁細(xì)胞常含草酸鈣方晶。韌皮部較寬，韌皮部纖維成束，呈層狀排列，微木化或木化，周圍的薄壁細(xì)胞含草酸鈣方晶。木質(zhì)部導(dǎo)管與木纖維相間呈環(huán)狀排列。射線明顯，呈放射狀排列。如圖2所示。

2.2.2 粉末特征 本品粉末呈淡黃色。淀粉粒眾多，復(fù)粒由2～4粒組成，圓形、類圓形、臍點(diǎn)明顯，有條形、人字形、三叉狀，層紋不明顯。晶纖維多見，常成束或2～3條并列，多已碎斷。單條纖維細(xì)長(zhǎng)，平直或彎曲，壁厚，胞腔細(xì)??；纖維束周圍的薄壁細(xì)胞含有大量的草酸鈣方晶。草酸鈣方晶，除上述晶纖維中的方晶外，尚有散落的單個(gè)方晶，呈方形或多面體狀。導(dǎo)管有具緣紋孔導(dǎo)管、螺紋導(dǎo)管、網(wǎng)紋導(dǎo)管。木栓細(xì)胞類方形或多角形，黃棕色。木薄壁細(xì)胞長(zhǎng)方形或類方形，細(xì)胞壁呈念珠狀增厚。如圖3所示。

2.3 薄層色譜鑒別 分別取10批陽(yáng)雀花藥材粉末各2 g，加石油醚(60～90℃)20 mL，冷浸過夜，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)邮兔?60～90℃)2 mL使溶解，作為供試品溶液。另取β-谷甾醇對(duì)照品，加石油醚(60℃～90℃)制成每1 mL含1 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。 照薄層色譜法試驗(yàn)(《中國(guó)藥典》2015年版四部通則0502)，吸取供試品溶液和對(duì)照品溶液各5 μL點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿-丙酮(25∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，置于105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。置紫外燈(365 nm)下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。如圖4所示。

2.4 檢查

2.4.1 水分 參照《中國(guó)藥典》2015年版通則0832第二法，10批陽(yáng)雀花藥材水分測(cè)定結(jié)果為9.6%～12.3%，平均值11.4%。見表1。

2.4.2 總灰分、酸不溶性灰分 參照《中國(guó)藥典》2015版通則2302，總灰分測(cè)定結(jié)果為2.0%～3.3%，平均值2.5%，酸不溶性灰分測(cè)定結(jié)果為0.2%～1.0%，平均值0.6%。見表1。

2.4.1 浸出物測(cè)定 參照醇溶性浸出物測(cè)定法《中國(guó)藥典》2015版通則2201項(xiàng)下熱浸法，以50%乙醇作溶劑進(jìn)行測(cè)定。測(cè)定結(jié)果為12.2%～22.3%，平均值18.2%。見表1。

表1 陽(yáng)雀花藥材水分、總灰分、酸不溶性灰分及醇溶性浸出物測(cè)定結(jié)果 (%)

3 討論

在薄層色譜鑒別中，分別以石油醚(30～60℃)、石油醚(60～90℃)、甲醇、75%乙醇、無水乙醇、乙酸乙酯、氯仿、乙腈為溶劑進(jìn)行提取溶劑的考察，以回流提取、超聲提取、冷浸提取方法進(jìn)行比較，結(jié)果顯示以石油醚(60～90℃)為提取溶劑，采用冷浸提取時(shí)斑點(diǎn)清晰分離度好；吸取供試品溶液2、3、5、10、15 μL，對(duì)照品5 μL進(jìn)行點(diǎn)樣量考察，結(jié)果顯示點(diǎn)樣量為5 uL時(shí)斑點(diǎn)清晰，分離度好；以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5∶1∶0.06)、甲苯-乙酸乙酯(4∶1)、氯仿-丙酮(25∶1)、正己烷-乙酸乙酯(6∶5)等展開系統(tǒng)進(jìn)行展開系統(tǒng)考察，結(jié)果表明陽(yáng)雀花藥材在以氯仿-丙酮(25∶1)展開下效果較好、斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好；分別在0-4℃(冰水浴)、25℃(室溫)、40℃(高溫)下展開溫度考察，結(jié)果表明溫度為25℃時(shí)分離效果好，斑點(diǎn)清晰；在濕度為32%、56%、72%等條件下進(jìn)行濕度考察，結(jié)果表明濕度為56%時(shí)分離效果好，斑點(diǎn)清晰。按上述試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行10批陽(yáng)雀花藥材薄層鑒別，結(jié)果顯示供試品色譜中，在與β-谷甾醇對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

在浸出物測(cè)定中，分別用95%乙醇、75%乙醇、50%乙醇、30%乙醇、水作溶劑，熱浸法測(cè)定浸出物含量，測(cè)定結(jié)果依次為12.3%、14.8%、17.0%、16.5%及16.9%，因此用50%乙醇作溶劑，按《中國(guó)藥典》2015版通則2201)熱浸法，測(cè)定了10批陽(yáng)雀花藥材樣品。

通過藥材性狀的描述、顯微特征的鑒定、薄層色譜方法的鑒別、水分、灰分、酸不溶性灰分及浸出物的測(cè)定，更好的制定陽(yáng)雀花藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為今后陽(yáng)雀花藥材的開發(fā)應(yīng)用提供了更有力的科學(xué)依據(jù)。