龍血竭化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展

林憶龍 文亦磊 黃 洪 黎 芳 鄧堉琳 奉建芳，5 梁健欽，5

1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200；2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023；3.廣西衛(wèi)生職業(yè)技術(shù)學(xué)院，廣西 南寧 530023；4.廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院，廣西 南寧 530002；5.廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西優(yōu)勢(shì)中成藥與民族藥開(kāi)發(fā)工程技術(shù)研究中心，廣西 南寧 530200

龍血竭為百合科植物劍葉龍血樹(shù)(Dracaenacochinchinensis(Lour.) S.C. Chen)的含脂木材經(jīng)提取得到的樹(shù)脂，主產(chǎn)于我國(guó)廣西、海南、云南等地，具有活血化瘀之“圣藥”的美譽(yù)，同時(shí)還有去腐生肌、止血等功效，臨床上常用于斂瘡生肌、外傷止血和靜脈炎等。研究表明，龍血竭化學(xué)成分以及藥理作用與進(jìn)口血竭接近，其主要成分為黃酮類(lèi)、苯丙素類(lèi)、皂苷類(lèi)、甾醇類(lèi)、木脂素類(lèi)和二苯乙烯類(lèi)等[1]。藥理研究表明，龍血竭具有抗炎、保護(hù)心血管、防輻射、抗纖維化、抑菌、促進(jìn)創(chuàng)面愈合及保護(hù)中樞神經(jīng)等藥理作用。臨床上龍血竭外敷廣泛應(yīng)用于治療各種外傷等疾病所致的出血癥。筆者對(duì)龍血竭化學(xué)成分、藥理活性進(jìn)行綜述，以期為研究人員更清楚地了解龍血竭相關(guān)的研究概況，為龍血竭的開(kāi)發(fā)提供思路。

1 文獻(xiàn)分析

通過(guò)中國(guó)知網(wǎng)(http://www.cnki.net/)，以篇名為“龍血竭”進(jìn)行檢索，搜索2009～2019年間發(fā)表的龍血竭文獻(xiàn)，并對(duì)其進(jìn)行文獻(xiàn)分析。如圖1，圖2所示，2009～2019年(截至2019年10月15日)共發(fā)表龍血竭文獻(xiàn)631篇，其中中文文獻(xiàn)598篇，外文文獻(xiàn)33篇。中文文獻(xiàn)發(fā)表數(shù)量大致呈先升后降趨勢(shì)，2012年發(fā)文最多數(shù)量為66篇，而外文文獻(xiàn)比例增加，但總體數(shù)量上較少。以上提示，從2009年開(kāi)始，對(duì)龍血竭研究趨于穩(wěn)定的狀態(tài)，從外文發(fā)文占比趨勢(shì)提示對(duì)龍血竭的研究深度逐漸加大，故對(duì)龍血竭進(jìn)行綜述有一定的研究意義。

圖1 龍血竭中文文獻(xiàn)發(fā)表數(shù)量時(shí)間分布圖

圖2 龍血竭外文文獻(xiàn)發(fā)表數(shù)量時(shí)間分布圖

2 化學(xué)成分

2.1 黃酮類(lèi) 龍血竭有著豐富的黃酮類(lèi)成分，黃酮類(lèi)化合物是以2-苯基色原酮為母核衍生的一類(lèi)化合物，目前已經(jīng)分離鑒定了83個(gè)化合物。根據(jù)其結(jié)構(gòu)的不同可以大致分為二氫查爾酮類(lèi)、查爾酮類(lèi)、黃烷類(lèi)、黃酮類(lèi)以及其他黃酮類(lèi)，見(jiàn)表1，部分結(jié)構(gòu)如圖3所示。

表1 龍血竭中的黃酮類(lèi)成分

注：二氫查爾酮類(lèi)1～20；查爾酮類(lèi)20～28；黃烷類(lèi)29～54；55～81；二氫查爾烷三聚體82～83。

圖3 新二氫查爾酮化合物

2.2 其他類(lèi) 從龍血竭中還分離鑒定出了很多非黃酮類(lèi)成分，主要包含了木脂素類(lèi)、皂苷類(lèi)、甾醇類(lèi)、二苯乙烯類(lèi)以及其他化合物，見(jiàn)表2。

表2 龍血竭中的其他類(lèi)成分

注：木脂素類(lèi)84～89；皂苷和甾醇類(lèi)90～101；二苯乙烯類(lèi)102～108；其他類(lèi)109～120。

3 龍血竭的藥理作用

3.1 抗炎作用

3.1.1 抗?jié)冃越Y(jié)腸炎作用 潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative Colitis、UC)是一種常發(fā)生于結(jié)腸的慢性腸道非特性炎癥疾病，部分可累及全結(jié)腸粘膜發(fā)生炎性改變。文獻(xiàn)報(bào)道[16-17]，臨床上龍血竭聯(lián)合美沙拉嗪等藥物治療UC獲得良好效果。同時(shí)，通過(guò)葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)的UC小鼠模型，也證實(shí)龍血竭能有效地緩解潰UC小鼠結(jié)腸粘膜損傷。

在龍血竭治療UC的機(jī)制研究方面，本課題組發(fā)現(xiàn)龍血竭通過(guò)黃酮等有效成分調(diào)控ABL1、F2、JAK2等靶點(diǎn)和間接調(diào)控IL-6、PTGS2等疾病蛋白的表達(dá)，從而干預(yù)JAK2/STAT3、PI3k-Akt-mTOR通路，達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)，最終緩解UC小鼠粘膜損傷[18]。龍血竭還能降低三硝基苯磺酸誘導(dǎo)的UC大鼠的促炎因子IL-8和血小板活化趨化物PAF水平，從而抑制炎癥和血小板的活化，改善結(jié)腸粘膜的充血水腫和潰瘍的癥狀[19-20]。

3.1.2 抗急性炎癥作用 采用氣管滴入博來(lái)霉素誘導(dǎo)大鼠肺損傷修復(fù)模型，龍血竭能有效抑制炎癥性肺損傷促進(jìn)修復(fù)，下調(diào)TGFβ1mRNA的表達(dá)，抑制I型膠原的過(guò)度沉積來(lái)調(diào)控肺損傷肺間質(zhì)過(guò)度修復(fù)[21]。在醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管滲透性實(shí)驗(yàn)中，龍血竭噴霧劑可以腹腔抑制毛細(xì)血管的通透性，與地塞米松組效果相當(dāng)，且龍血竭噴霧劑也能顯著的抑制巴豆油引起的小鼠耳殼炎癥[22]。

在脂多糖誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞神經(jīng)炎癥模型中、龍血竭成分7,4′-二羥基-5-甲氧基高異黃酮、4,4′-二羥基-2-甲氧基二氫查爾酮、7,3′-二羥基-4′-甲氧基黃酮、7,4′-二羥基黃酮、7-羥基黃酮通過(guò)降低BV-2細(xì)胞的誘導(dǎo)型一氧化氮合酶mRNA、IL-6和TNF-α的表達(dá)，達(dá)到抑制神經(jīng)炎癥的作用[23]。

3.2 保護(hù)心血管作用 龍血竭對(duì)心血管具有多種保護(hù)作用，且在心肌損傷保護(hù)方面尤為突出。研究證明，龍血竭對(duì)心肌缺血再灌注損傷起到保護(hù)作用。在手術(shù)結(jié)扎器官供血血管造模方法建立的心肌梗死新西蘭兔模型中，龍血竭可以改善心臟功能，可以減少心肌酶CK-MB的釋放，激活JAK2/STAT3信號(hào)通路，抑制細(xì)胞凋亡[24]。使用分離灌注的樹(shù)鼩心臟的離體模型研究龍血竭對(duì)心臟的作用，結(jié)果顯示龍血竭能抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的應(yīng)激，清除自由基，改善細(xì)胞凋亡和調(diào)節(jié)MAPK信號(hào)通路等，發(fā)揮抗心肌缺血再灌注損傷的作用[25]。

3.3 活血止血作用 原發(fā)性高血壓是一種常見(jiàn)的心血管系統(tǒng)疾病，發(fā)病原因尚未明確，常伴隨著脂肪和糖代謝紊亂，以及心、腦、腎和視網(wǎng)膜等的器質(zhì)性改變[26]。在高血壓狀態(tài)下、全血粘稠增高，血小板聚集增加，微循環(huán)障礙。龍血竭能抑制高血壓狀態(tài)下的血小板聚集，縮短凝血酶原時(shí)間，達(dá)到收斂止血的功效[27]。

纖溶酶原激活物抑制劑1(PAI-1)是尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)和組織型纖溶酶原激活物(tPA)的天然特異性抑制劑。PAI-1的表達(dá)升高會(huì)增加動(dòng)靜脈血栓形成的風(fēng)險(xiǎn)、PAI-1可能是在血栓的形成的重要因素之一[28]。在FeCL3誘導(dǎo)的小鼠腹腔動(dòng)脈血栓模型中，龍血素B能有效的阻止uPA/PAI-1復(fù)合物的形成，從而抑制PAI-1的活性，達(dá)到抗血栓的目的，這可能是龍血竭活血化瘀作用機(jī)理之一[29]。

3.4 輻射防護(hù)作用 放射治療是現(xiàn)代治療惡性腫瘤的主要方法之一，但在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，機(jī)體的正常細(xì)胞，組織也會(huì)受到相應(yīng)的損傷，這給接受放療的患者增加了極大的痛苦。尋找有效的藥物來(lái)減輕放療引起的副作用，已經(jīng)成為研究輻射防護(hù)藥物的熱點(diǎn)。龍血竭對(duì)受輻射的機(jī)體有一定的防護(hù)作用，但是機(jī)制尚未明確，可能與其提高機(jī)體抗氧化酶活性以及增加機(jī)體清除自由基活力相關(guān)。小鼠給與不同劑量的GyX射線照射后，與陰性組相比外周血白細(xì)胞和有核細(xì)胞的數(shù)量以及肝組織中SOD、CAT/GSH-PX活性均明顯降低，MDA含量升高，說(shuō)明輻射對(duì)機(jī)體的造血系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)均造成損害。預(yù)先給予龍血竭藥物后，能明顯減輕外周白細(xì)胞，有核細(xì)胞的下降程度，明顯的提高SOD、CAT/GSH-PX的活性[30]。Lewis肺癌小鼠在接受60Co-y輻射治療后，造血功能受到顯著的影響，與荷瘤模型組相比，表現(xiàn)為外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板及淋巴細(xì)胞數(shù)目顯著降低。給予龍血竭干預(yù)Lewis肺癌小鼠放療后，血小板下降幅度明顯降低，且能有效的促進(jìn)荷瘤輻射后的小鼠血小板的恢復(fù)[31]。

3.5 抗肝纖維化/肺纖維化作用 在博來(lái)霉素法誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化模型中，龍血竭在早期可以抑制大鼠IL-2表達(dá)水平和上調(diào)IL-5表達(dá)水平，有效減緩大鼠肺纖維程度；龍血竭還可能通過(guò)抑制大鼠肺組織TGF-β1mRNA的表達(dá)，減少I(mǎi)型膠原蛋白的過(guò)度沉積，有效地減輕大鼠肺纖維化進(jìn)程[32-33]。

龍血竭在抗肝纖維化方面也有著很好的藥理作用。采用龍血竭干預(yù)的硫代乙酰胺誘導(dǎo)的肝纖維化模型大鼠，藥物干預(yù)后，能有效降低肝纖維化大鼠血清中透明質(zhì)酸酶，層黏連蛋白和IV型膠原及谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶水平，減少膠原纖維增生，改善大鼠纖維化病理?yè)p傷程度，表明龍血竭具有抗肝纖維化的作用[34]。龍血素B可以通過(guò)阻止uPA/PAI-1復(fù)合物的形成，可以有效地減少小鼠肝細(xì)胞壞死，纖維增生和炎癥浸潤(rùn)，能有效的防治肝纖維化[29]。

3.6 抑菌作用 近年來(lái)，抗生素的濫用使許多的細(xì)菌產(chǎn)生了耐藥性，中藥抑菌抗菌逐漸成為研究熱點(diǎn)。采用試管液基稀釋法測(cè)定了龍血竭多酚提取物對(duì)聚生小穴殼菌、栗疫病菌、梨葉點(diǎn)霉、立枯絲核菌、金黃殼囊孢、亞麻刺盤(pán)孢和枯斑盤(pán)多毛孢7株真菌的抑制作用，結(jié)果表明龍血竭多酚提取物對(duì)7株真菌都有明顯的抑制作用，且最低抑菌濃度為0.26～5.0 mg/mL[35]。

龍血竭聯(lián)用蜘蛛香對(duì)革蘭氏陽(yáng)性也有較好的抑制作用，以金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌和大腸埃希菌為供試菌種，采用棋盤(pán)設(shè)計(jì)法和固體培養(yǎng)基連續(xù)稀釋法研究?jī)晌吨兴幝?lián)用后的抑菌效果，結(jié)果兩味中藥聯(lián)用后對(duì)4種供試菌種都有著不同程度的抑制作用[36]。

3.7 其他藥理作用 糖尿病潰瘍是糖尿病常見(jiàn)并發(fā)癥之一，創(chuàng)面愈合較慢，嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量。龍血竭具有去腐生肌、斂瘡生肌的功效，臨床上外用治療皮膚瘡瘍。龍血竭外用于糖尿病潰瘍大鼠，可有效地下調(diào)Smads3、Smad4蛋白的表達(dá)，顯著提高TGF-β1和α-SMA的表達(dá)水平，刺激組織細(xì)胞的分裂增殖，促進(jìn)創(chuàng)面組織成纖維細(xì)胞增殖和新生血管增生，加快創(chuàng)面的愈合[37-39]。臨床上，常用龍血竭膠囊聯(lián)合前列地爾等藥物治療糖尿病足，療效顯著，能有效緩解患者的臨床癥狀[40]。

龍血竭提取物及其單體化合物對(duì)神經(jīng)退行性疾病有著良好的療效。在神經(jīng)退行性疾病中，活性氧(ROS)和過(guò)度炎癥反應(yīng)起到關(guān)鍵性作用[41]。ROS的水平與細(xì)胞修復(fù)損傷相關(guān)，可干擾氧化還原狀態(tài)下的細(xì)胞產(chǎn)生過(guò)多的過(guò)氧化物和氧自由基，從而破壞細(xì)胞組分。而ROS可被抗氧化劑與醌氧化還原酶1(NQO1)破壞，進(jìn)而引起神經(jīng)損傷[42]。采用LPS誘導(dǎo)的BV-2細(xì)胞模型，發(fā)現(xiàn)龍血竭中紫檀烯能很好的誘導(dǎo)NQO1的活性保護(hù)BV-2細(xì)胞免受氧化性損傷，對(duì)氧化損傷的神經(jīng)有保護(hù)作用[43]。

近年來(lái)，在我國(guó)的2型糖尿病患病率顯著增加，嚴(yán)重影響我國(guó)公眾的衛(wèi)生安全。糖尿病在中醫(yī)上稱(chēng)為“糖洛病”，臨床上運(yùn)用中藥治療糖尿病的研究也逐漸增加。在MKR轉(zhuǎn)基因2型糖尿病小鼠模型中，龍血竭膠囊聯(lián)用薯蕷丸能有效的降低小鼠血糖[39]。龍血竭的氯仿和乙酸乙酯提取部分均能降低鏈脲佐菌素誘導(dǎo)的高血糖模型小鼠空腹血糖水平[44]。

4 結(jié)語(yǔ)

龍血竭是我國(guó)的名貴藥材，廣西有著豐富的資源。近年，隨著對(duì)龍血竭成分分離技術(shù)的不斷發(fā)展，藥理活性研究的深入，不斷發(fā)現(xiàn)龍血竭及其提取物在抗炎、心血管防護(hù)及抗輻射方面作用明顯，對(duì)龍血竭的化學(xué)成分及生物活性進(jìn)行系統(tǒng)的研究奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)，對(duì)龍血竭新產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)利用均有重要的意義。